Pečeň je centrálnym laboratóriom tela. Syntetizuje proteíny (albumín, protrombín, fibrinogén, ďalšie faktory zrážania krvi), lipidy (cholesterol), lipoproteíny, žlčové kyseliny, bilirubin, tvoria sa žlč. Toxické látky, ktoré sa vyskytujú v tele a vstupujú do tela (antitoxická funkcia) sa využívajú v pečeni. Pečeň syntetizuje glykogén a podieľa sa na pankrease pri regulácii zásob uhľovodíkov v tele. Jeho aktívna úloha v trávení je, že žlč emulguje tuky a zlepšuje ich rozpad pankreatickou lipázou. Produkty štiepania potravín (tuky, mastné kyseliny, glycerín, aminokyseliny, sacharidy, minerály, voda, vitamíny) vstupujú cez portálne žilové cievy do pečene. V ňom sú čiastočne uložené, čiastočne spracované, použité a čiastočne pripravené na použitie v iných tkanivách.
Ochorenia pečene spôsobujú poruchy jednej alebo druhej z jej funkcií, ktoré sa používajú na diagnostické účely. Najčastejšie sa vykonávajú v klinických laboratóriách štúdie porúch pigmentu, sacharidov, proteínotvorných funkcií. Pri akútnom zápalovom a toxickom poškodení pečene sa z pečene uvoľňuje významné množstvo intracelulárnych enzýmov. Štúdie aldolázy, alanínu a aspartátových transamináz (aminoferáz), laktátdehydrogenázy a jej frakcií, cholínesteráz, arginázy a ďalších získali diagnostickú hodnotu, ukazovatele aktivity aldolázy a transaminázy sa používajú na diagnostiku zápalových ochorení pečene, intoxikácie, sprevádzanej akútnou distrofiou jej vzorcov a tiež jej vzorcov. fosfatázy produkovanej v kostnom tkanive. Indikátory jeho aktivity sa používajú pri diagnostike obštrukčnej žltačky. Štúdium enzýmového spektra krvi sa používa v diferenciálnej diagnostike rôznych ochorení pečene, najmä žltačky.
Nižšie sú uvedené základné informácie o diagnostickej hodnote najznámejších vzoriek, ktoré odrážajú stav pečene za normálnych a patologických podmienok. Metódy niektorých vzoriek alebo princípy ich implementácie sú uvedené, ak metódy vyžadujú podrobný opis. Biochemické metódy na štúdium funkcie pečene možno nájsť v nasledujúcich publikáciách: Smernice pre použitie štandardizovaných klinických a laboratórnych výskumných metód.
Funkčné testy odrážajúce úlohu pečene v metabolizme sacharidov. U ochorení pečene je hladina cukru v krvi nalačno u väčšiny pacientov normálna - 4,44 - 6,11 mmol / l (80 - 110 mg%). Príležitostne dochádza k hyperglykémii, často kvôli dysfunkcii sympathoadrenálneho vegetatívneho nervového systému. Pri cirhóze pečene, keď je narušená syntéza glykogénu a jeho zásoby sú značne vyčerpané, môže dôjsť k hypoglykémii.
Vzorky na toleranciu k sacharidom s glukózovou záťažou sa vykonávajú rovnakým spôsobom ako v štúdii funkcie ostrovného aparátu. Test sa používa hlavne pri jednorazovom zaťažení glukózou (cukor, fruktóza, levulóza).
Galaktózový test je založený na skutočnosti, že galaktóza je ťažšia ako glukóza, mení sa na glykogén av prípade ochorenia pečene vo väčšom množstve sa vylučuje obličkami. Vo vnútri sa do testu vloží 40 g galaktózy v 200 ml vody. Potom sa každé 2 hodiny každé 3 hodiny odoberá moč v troch oddelených dávkach, pričom sa uvoľní 2 až 2,5 g galaktózy. Podľa A. I. Chazanova (1968), pri chronickej hepatitíde je test pozitívny u 4-12% pacientov av prípade cirhózy pečene u 47,1% pacientov.
Galaktozemické krivky sú citlivejšie ako galaktózová vzorka. Prázdny žalúdok u zdravého človeka obsahuje 0,1–0,9 mmol / l v krvi alebo 2–17 mg galaktózy. Po záťaži 40 g galaktózy u zdravého človeka sa pozoruje prudký vzostup hladiny galaktózy na 6,6 mmol / l alebo 120 mg% po dobu 30 - 60 minút a potom sa po 2 - 3 hodinách indikátor zníži na 2,20 mmol / l, alebo 40 mg%. U osôb s ochorením pečene je hladina galaktózy vyššia, trvá dlhšie a po 3 hodinách sa nevráti do normálu.
Funkčné testy odrážajúce úlohu pečene v metabolizme lipidov. Pečeň sa zúčastňuje všetkých štádií metabolizmu tukov. Pre normálnu absorpciu tuku v črevách je potrebná žlč. Pôsobí ako detergent a emulgátor tukov, uľahčuje prácu pankreatickej lipázy, zlepšuje vstrebávanie tukov v čreve. V pečeni sú fosfolipidy syntetizované v prítomnosti lipotropných látok, ktoré pôsobia ako donory lipidových skupín (metionín, cholín) alebo faktor prispievajúci k syntéze fosfolipidov (vitamín B).12). S nedostatkom lipotropných látok v pečeni sa hromadia neutrálne tuky a znižuje sa množstvo glykogénu. Keď ochorenie pečene znižuje obsah adenozíntrifosfátu, ktorý dodáva energiu syntetickým procesom.
Hladina cholesterolu v krvi je najdôležitejším indikátorom syntézy lipidov v pečeni. Cholesterol sa konzumuje s jedlom. Jeho absorpcia v čreve nastáva za účasti žlčových kyselín. Potravinový cholesterol však nie je jediným alebo dokonca hlavným zdrojom cholesterolu v tele. Je neustále syntetizovaný v pečeni z acetylkoenzýmu A. Syntéza cholesterolu presahuje jeho príjem. Nadbytok syntetizovaného aj dietetického cholesterolu sa vylučuje z tela cez črevá. Časť z nich sa premieňa v pečeni na žlčové kyseliny a používa sa aj v iných orgánoch (nadobličky, semenníky) ako východiskový materiál na syntézu steroidných hormónov. Časť cholesterolu sa v pečeni kombinuje s mastnými kyselinami za vzniku esterov cholesterolu.
Obsah cholesterolu v krvi je určený metódou Ilka. Cholesterol sa vopred extrahuje chloroformom. V prítomnosti anhydridu kyseliny octovej a zmesi kyseliny octovej a sírovej dáva roztok zelenú farbu. Koncentrácia cholesterolu sa stanoví kalorimetrickou metódou na FEC. U zdravých ľudí obsahuje sérum 3,0-6,5 mmol / l (116-150 mg%) cholesterolu. Pri hepatitíde a cirhóze pečene dochádza k porušeniu cholesterolu v krvi: hypercholesterolémia, zjavne spojená s porušením vylučovacej funkcie pečene, menej často - hypocholesterolémie, ktorá je spojená s poklesom jej syntézy v pečeni.
Estery cholesterolu v hepatitíde sú tvorené v menších množstvách ako normálne a pomer esterov a cholesterolu je u zdravých znížený na 0,3-0,4 namiesto 0,5-0,7.
V pečeni je syntéza lipoproteínov tiež veľmi nízka a vysoká hustota. Chylomikróny a malá časť lipoproteínov s veľmi nízkou hustotou sa tvoria v epitelových bunkách tenkého čreva. Syntéza a rozklad lipoproteínov prebieha za účasti lipoproteínovej lipázy, ktorá je spojená s heparínom. Je potrebné poznamenať, že v prípade cirhózy pečene sa znižuje obsah heparínu v krvi. Pečeň sa tak podieľa na tvorbe lipoproteínov a ich deštrukcii. Pri ochorení pečene dochádza k dyslipoproteinémii, hlavne k zvýšenej tvorbe lipoproteínov (hepatitída, počiatočné formy cirhózy pečene). Je tu zvýšená hladina beta-lipoproteínov v krvi.
Štúdium lipoproteínov v krvi sa vykonáva hlavne elektroforetickou metódou.
Intersticiálny metabolizmus lipoproteínov je zhoršený pri závažných ochoreniach pečene - hepatálnej kóme, cirhóze pečene. V tomto prípade je obsah laktátu (norma 0,78–1,2 mmol / l (7–14 mg%) a kyseliny pyrohroznovej (norma je 57–136 µmol / l (0,5–1,2 mg%)) zvýšenie krvi,
Keď sa zistí hepatálna kóma, zvýšia sa hladiny acetónu v krvi.
Funkčné testy odrážajúce úlohu pečene v metabolizme proteínov. Pečeň transaminuje aminokyseliny, oxiduje ich na kyselinu pyrohroznovú v cykle trikarboxylovej kyseliny (Krebs) a syntézu proteínov. Všetky albumíny, 75 - 90% alfa globulínov, 50% beta globulínov sa syntetizujú v pečeni. Zdravá pečeň môže denne produkovať 13-18 g albumínu. Protrombín, prokonvertín, proaccelerín sa syntetizuje iba v pečeni. Syntéza proteínov sa uskutočňuje za účasti energie. Jedným z dôvodov poklesu syntetickej funkcie pečene je zníženie obsahu mikroergických zlúčenín v pečeni. Pri závažnom ochorení pečene môže celkové množstvo srvátkového proteínu klesnúť. 40 g / l namiesto 80 g / l. Obsah albumínu sa významne znižuje (až na 20 g / l namiesto 40 g / l). Za patologických stavov pečeň syntetizuje globulíny s neobvyklými vlastnosťami (paraproteíny). Je známe, že takýto proteín je horší farbený biuretovým činidlom, menej stabilným vo fyziologickom roztoku (napríklad chlorid vápenatý) v prítomnosti tymolu. S týmito vlastnosťami boli vybudované sedimentárne diagnostické vzorky.
Celkový sérový proteín sa stanoví polarimetrickou metódou alebo reakciou s biuretovým činidlom. Norm - 60-80 g / l. Proteínové frakcie sa stanovia elektroforézou na papieri alebo v akrylamidovom géli. Obsah albumínu v krvnom sére je podľa V. E. Predtechenského 56,5–66,8%, alfarglobulín - 3,0–5,6, alfaglobulín - 6,9—10,5, beta-globulín - 7,3. - 12,5 a gama globulíny - 12,8 - 19,0%. Pri ochoreniach pečene dochádza k poklesu obsahu albumínu v krvi, nárastu obsahu gama globulínov. Pri akútnych zápalových procesoch (hepatitída) sa hladina alfa-globulínov zvyšuje 1,5-2 krát. Gama globulíny sú produkované lymfocytmi a bunkami retikuloendotelového systému. Pri chronickej hepatitíde vyskytujúcej sa s výraznými autoimunitnými procesmi sa významne zvyšuje obsah gama globulínov v krvi (až o 30%). A. I. Chazanov poznamenáva, že významný nárast beta alebo gama globulínu je pozorovaný u pacientov s cirensiou pečene dekensirovanny a často poukazuje na zlú prognózu ochorenia. Odráža reorganizáciu syntézy proteínov v pečeni a zvýšenú tvorbu paraproteínov.
Sedimentárne vzorky sú založené na zmenách koloidnej stability krvného séra pri interakcii s rôznymi elektrolytmi. Stabilita koloidného krvného systému je narušená v dôsledku dysproteinémie a paraproteinémie.
Sublimačný test (sublimaticko-sedimentačná reakcia), reakcia Takat-Ara, spočíva v tom, že počas interakcie sublimátu a uhličitanu sodného s proteínmi krvného séra sa precipitujú a vytvárajú vločky. V súčasnosti sa reakcia používa v modifikácii Grinstedta (1948). Do 0,5 ml nehemolyzovaného séra zriedeného 1 ml fyziologického roztoku chloridu sodného sa pridá 0,1% roztok sublimovaných kvapiek, až kým sa neobjaví trvalý zákal, pri čítaní novín sa stáva text vo vertikálnej vrstve kvapaliny nemožným. Miera je 1,6–2,2 ml 0,1% roztoku chloridu ortuťnatého. Test je pozitívny pri poškodení parenchymálnej pečene, najmä pri cirhóze pečene, akútnej a chronickej hepatitíde, silikóze a silikotuberkulóze.
V roku 1930 bol navrhnutý Veltmannov test (koagulačný test, termokoagulačná reakcia) na rozlíšenie fibroproduktívnych a nekrotických procesov v pečeni. Čerstvé sérum bez stôp po hemolýze sa naleje do 11 očíslených 0,1 ml skúmaviek. Potom sa pridá 5 ml roztoku chloridu vápenatého v znižujúcich sa koncentráciách: 0,1, 0,09, 0,08 atď. Na 0,01%, obsah skúmaviek sa jemne pretrepe a vloží sa do vriaceho vodného kúpeľa na 15 minút. výsledok sa označí. Vzorka sa považuje za pozitívnu v prípade zrážania proteínov. Počet skúmaviek s pozitívnym výsledkom sa nazýva koagulačné pásmo. Normálne je to 6-7 trubíc. Jeho pokles (posun doľava) sa pozoruje pri zápalových procesoch v pľúcach, nádoroch, infarkte myokardu; predĺženie (posun doprava) - pri zápalových procesoch v pečeni, akútnej dystrofii pečene, cirhóze, ako aj pri hemolytickom ochorení, nefróze, fibróznej pľúcnej tuberkulóze. V súčasnosti bola vzorka Veltmann modifikovaná nasledovne: Do 0,1 ml krvného séra sa pridalo 4,9 ml vody, potom sa pridalo 0,1 ml 0,5% roztoku chloridu vápenatého. Zmes sa zahreje do varu, v neprítomnosti zrazeniny sa naleje ďalších 0,1 ml roztoku chloridu vápenatého. Postup sa opakuje, až kým sa v testovacej skúmavke neobjaví myšací proteín. Výsledky sa hodnotia na celkovom množstve chloridu vápenatého použitého pri reakcii. Obvykle sa vyžaduje 0,4 až 0,5 ml chloridu vápenatého.
Thymolový test (test turbidity tymolu) v modifikácii Huerg a Popper (test tymol-toner) je založený na tvorbe turbidity testovaného séra v prítomnosti nasýteného roztoku tymolu vo veronálnom pufri. Zrazenina sa vytvorí ako výsledok vzhľadu komplexu globulín-timolofosfatid s poklesom obsahu albumínu v krvi, zvýšením beta a gama globulínov. Stupeň zákalu závisí od teploty okolia a pH. Reakcia sa vyhodnotí fotokalometrickou metódou pri 660 nm proti roztoku tymol-meronalu. Výpočet sa vykoná podľa kalibračnej krivky získanej zo suspenzie síranu bárnatého. Normálne je sérová turbidita 0 - 5 jednotiek. M (Maklagana). Zvýšenie turbidity (pozitívny test) sa pozoruje v podmienkach poškodenia pečene pri epidémii hepatitídy (test je pozitívny pred vznikom žltačky), pri cirhóze pečene, po akútnej hepatitíde a tak ďalej.
Pri závažnom porušení pečene je narušený proces deaminácie aminokyselín, čo vedie k zvýšeniu ich obsahu v krvi a moči. Ak je u zdravých ľudí obsah amino dusíka v sére 50-80 mg / l, potom pri ťažkých dystrofických procesoch v pečeni sa môže zvýšiť na 300 mg / l (300 mg / l zodpovedá 30 mg% pomeru prenosu aminoskupiny, vyjadreného v mg%, v mmol / l je 0,7139). A. I. Chazanov poznamenáva, že pri akútnej vírusovej hepatitíde sa zvyšujú hladiny glutatiónu, kyseliny glutámovej, metionínu, fenylalanínu, serínu a treonínu v sére. Pri chronickej hepatitíde sa zistili rovnaké zmeny v obsahu aminokyselín v krvi, ale vyjadrené v menšom rozsahu.
Počas dňa sa 100-400 mg (v priemere 200 mg) aminokyselín vylučuje do moču zdravého človeka. Aminoazot je medzi nimi 1-2% celkového dusíka v moči a pri ochoreniach pečene dosahuje 5-10%. Pri akútnej hepatálnej dystrofii sa pozoruje zvýšené vylučovanie leucínu a tyrozínu močom. Normálne sa tyrozín uvoľňuje v množstve 10-20 mg / l, s akútnou vírusovou hepatitídou - až do 1000 mg / l (2 g denne). V močovom sedimente sa nachádzajú leucínové a tyrozínové kryštály.
Zvyškový dusík a močovina v krvnom sére pri ochoreniach pečene sa zvyšujú, ak sa vyvinie akútne zlyhanie pečene alebo závažné akútne poškodenie pečene (akútna dystrofia pri akútnej hepatitíde, exacerbácia chronickej hepatitídy, cirhóza pečene, rakovina pečene, po chirurgickom zákroku žlčových ciest a a kol.). U zdravých ľudí je reziduálny dusík v krvi 14,3–28,6 mmol / l (0,20–0,40 g / l), močovina - 2,5–3,3 mmol / l (0,15–0, 20 g / l). Pri ochoreniach pečene sa obsah zvyškového dusíka v krvi mierne zvyšuje - až 35,4-64,3 mmol / l (0,50 -; 0,90 g / l). Zvýšenie jeho hladiny nad 71,4 mmol / l (1,0 g / l) sa pozoruje pri poškodení obličiek a významne zhoršuje prognózu ochorenia.
Zvyškový dusík v krvi sa stanovuje niekoľkými metódami - po mineralizácii krvi priamou reakciou s Nesslerovým činidlom alebo metódou Rappoport-Eichgorn. Močovina v krvi sa tiež stanovuje niekoľkými metódami: expresná metóda je založená na použití reaktívneho papiera „Ureatest“, používa sa ureázová metóda s chloridom fenolu, metóda ureázy s Nesslerovým činidlom atď.
Pečeň a hemostáza sú úzko prepojené. V pečeni sa syntetizujú proteíny, ktoré sa podieľajú na zrážaní krvi. Najdôležitejšie z nich sú protrombín a fibrinogén a častejšie sa vyskytujú porušenia syntézy týchto proteínov. Je potrebné poznamenať, že pri akútnych zápalových ochoreniach pľúc, kĺbov, pečene sa môže významne zvýšiť obsah fibrinogénu v krvi. Zníženie obsahu protrombínu v krvi je zaznamenané u pacientov s akútnou vírusovou, toxickou, chronickou hepatitídou, cirhózou pečene. Najdôležitejšie klinické príznaky nedostatku protrombínu sú spontánne krvácania pod kožou, pod sliznicami, krvácanie do ústnej dutiny, žalúdka.
Syntéza proteínov, ktoré zabezpečujú proces zrážania krvi, nastáva za účasti vitamínu K. Vitamín K je rozpustný v tukoch a spolu s tukmi vstupuje do tela. Pri ochoreniach pečene v dôsledku porúch tvorby žlče a vylučovania žlčou v tele dochádza k hypovitaminóze K.
Zhoršená syntéza krvných koagulačných faktorov môže byť spojená s inhibíciou funkcie tvorby pečene v proteíne. V tomto prípade sa hypoprotrombinémia vyskytuje s dostatočným zabezpečením tela vitamínom K. Na klinike na diagnostické účely sa množstvo protrombínu v krvi vyšetrí pred a po naplnení Vikasolom.
Veľké množstvo heparínu sa syntetizuje v pečeni a pľúcach.
Otázka možnosti hemoragickej diatézy, ktorá je spojená so zvýšením produkcie antikoagulačných faktorov krvného systému pri ochoreniach pečene, nie je dobre známa.
Aktivita faktorov protrombínového komplexu (prothrombi-nový index) je študovaná metódou Quick (95 - 105% norma), koncentrácia fibrinogénu v krvi je študovaná Rutbergovou metódou (norma je 200 - 300 mg v 100 ml plazmy). Podľa jednotnej gravimetrickej metódy odporúčanej V. V. Menshikovom (1987) je rýchlosť fibrinogénu v krvi 200 - 400 mg% alebo 2 - 4 g / l. Metóda stanovenia faktorov zrážania krvi je podrobne opísaná v Príručke metód klinického a laboratórneho výskumu.
Funkčné testy odrážajúce úlohu pečene v metabolizme pigmentov. Toto je primárne stanovenie bilirubínu v sére, štúdium urobilínu, sterkobilínu, žlčových pigmentov v moči. Už sme spomínali štúdium obsahu bilirubínu v žlči. Tieto indikátory priamo alebo nepriamo odrážajú proces konverzie bilirubínu v pečeni. Pečeň hrá dôležitú úlohu v metabolizme pigmentov obsahujúcich železo - hemoglobín, myoglobín, cytochróm atď.
Počiatočným štádiom rozkladu hemoglobínu je rozpad metylového mosta a tvorba verdohemoglobínu (verdoglobínu), ktorý obsahuje aj železo a globín. V budúcnosti Verdoglobin stráca železo a globín, začína proces rozbaľovania porfyrínového kruhu a tvorbu biliverdinu, pričom sa obnovuje hlavný žlčový pigment - bilirubín (nepriamy, neviazaný bilirubín). Takýto bilirubín sa kombinuje s Ehrlichom diazoreaktívnym po liečbe alkoholom alebo kofeínovým činidlom, to znamená, že poskytuje nepriamu farebnú reakciu. Aktívne sa absorbuje hepatocytmi a pomocou enzýmov sú glukuronyltransferázy v Golgiho aparáte spojené s jedným (monoglukuronidom) alebo dvoma (diglukuronidmi) molekulami kyseliny glukurónovej. Pätnásť percent bilirubínu v pečeni prostredníctvom sulfát transferázy s kyselinou sírovou a tvorí fosfoadenozín fosfosulfát. Takýto bilirubín rýchlo reaguje s diazoreaktívnou a dáva priamu reakciu.
Pri ochoreniach pečene je zvýšený obsah bilirubínu v krvi determinovaný hlavne tým, že ho hepatocyty vylučujú do žlče a krvných kapilár. Bilirubín sa hromadí v krvi, čo poskytuje priamu reakciu s diazoreaktívnym (priamym alebo viazaným bilirubínom). Menšie množstvo tiež obsahuje bilirubín v prípade závažného poškodenia pečene, čo dáva nepriamu reakciu, ktorá je spôsobená poklesom aktivity zachytávania nekonjugovaného bilirubínu z krvi pečeňovými bunkami a je to pravdepodobne spôsobené porušením mechanizmu zachytávania bilirubínu a absorpcie v bunkách hepatocytov.
Keď obštrukcia žlčového alebo pečeňového kanálika kameňom, nádorom, viskóznym hlienom, zúženie jeho lúmenu jazvami (napríklad po chirurgickom zákroku žlčových ciest) v žlčových kanálikoch žlče zvyšuje tlak žlče. Preniká do krvných a lymfatických kapilár. Krv sa akumuluje hlavne bilirubínu, čo dáva priamu reakciu s diazoreaktívnou (subhepatickou alebo mechanickou žltačkou).
Hemolýza erytrocytov je sprevádzaná uvoľňovaním veľkého množstva hemoglobínu, ktorého časť je vylučovaná obličkami, niektoré sú zachytené bunkami retikuloendotelového systému a konvertované na verdoglobin a bilirubín. Časť takéhoto bilirubínu je konjugovaná s kyselinou glukorónovou v pečeni a vylučuje sa vo zvýšenom množstve žlčou do čreva. Významné množstvo bilirubínu, ktoré vedie k nepriamej reakcii, však zostáva v krvi. Takáto žltačka sa nazýva hemolytická alebo suprahepatická.
S obštrukčnou žltačkou, veľmi málo žlčou (bilirubín) vstupuje do čriev alebo nevstupuje vôbec. Farba výkalov závisí od produktov konverzie bilirubínu - stercobilínu, ktorý sa tvorí v čreve zo sterkobilinogénu - medziproduktu premeny bilirubínu. Ak žlčové pigmenty nevstúpia do čreva, výkaly sa stávajú svetlými, bielymi, acholichny. Reakcia na stercobilín a urobilín v takýchto prípadoch je negatívna.
V žltačke parenchýmu prenikajú žlčové pigmenty do čreva v menších množstvách, než je obvyklé, pretože obsah bilirubínu v žlči klesá a množstvo samotnej žlče je malé. Bilirubín, ktorý vstupuje do čreva, však stačí na zafarbenie výkalov vo svetlohnedej farbe. Časť stercobilinu sa absorbuje a vylučuje obličkami, najskôr vo forme urobilinogénu a potom urobilín. Keď je konjugovaný (priamy) bilirubín v krvi nadbytočný, časť z neho vstupuje do moču, kde môže byť detegovaná Rosinom (s alkoholovým roztokom jódu) alebo vzorkou so zrážaním bilirubínu soľami bária.
S hemolytickou žltačkou v žlči sa zvyšuje hladina bilirubínu. Sterobilín a urobilín sa tiež tvoria v nadbytku - výkaly a moč sa intenzívne sfarbia. V krvi sa zvyšuje obsah nenaviazaného bilirubínu, je slabo rozpustný vo vode, nepreniká cez renálnu bariéru do tkaniva. Preto nie je v moči žiadny bilirubín.
Sérum bilirubínu je určené metódou Endrašíka, Cleghorna a Grofa. Táto metóda je založená na kombinácii kyseliny diazofenylsulfónovej (vytvorenej interakciou kyseliny sulfanilovej s dusitanom sodným) s bilirubínom v sére, čo vedie k ružovo-fialovému zafarbeniu. Intenzita jeho súdil na koncentráciu bilirubínu, vstúpil do priamej reakcie. Keď sa do séra pridá kofeínové činidlo, nekonjugovaný (nepriamy) bilirubín sa dostane do rozpustného disociovaného stavu a poskytne diazoreaktívnu zmes ružovo-fialovému farbiacemu roztoku. Táto technika je opísaná v referenčnej knihe V. G. Kolba, V. S. Kamyshnikov; Handbook ed. A. A. Pokrovsky; metodické pokyny ed. V. V. Menšikov a iní.
Hodnota niektorých enzýmov v diagnostike ochorení pečene. Enzýmy pečene, rovnako ako iné orgány, sa delia na orgánovo špecifické a nešpecifické. Pre pečeň sú orgánovo špecifickými enzýmami ornitínkarbamyltransferáza, glutamátdehydrogenáza, fosfofruktaldoláza, histidáza, sorbitoldehydrogenáza. Piata izoenzýmová laktátdehydrogenáza sa navyše považuje za špecifickú.
Pečeňové bunky sú bohaté na enzýmy. Poškodenie hepatocytov vedie k uvoľneniu významného množstva intracelulárnych enzýmov a ich akumulácii v krvi. V tomto ohľade získali transaminázy, aldolasy a enzýmy nachádzajúce sa v bunkách iných orgánov a tkanív diagnostickú hodnotu. Vyhodnoťte ich aktivitu v krvi a porovnajte s klinickými príznakmi ochorenia.
Aldolase - názov skupiny enzýmov zapojených do mechanizmov aeróbneho štiepenia sacharidov. Sérum aldoláza katalyzuje reverzné štiepenie fruktóza-1,6-difosfátu na dva fosfo-triosefosfoglyceraldehyd a dioxyacetón monofosfát. Aktivita aldolasy v sére sa zvyšuje pri akútnej epidémii hepatitídy av menšej miere pri akútnej toxickej hepatitíde. Pri akútnej vírusovej hepatitíde sa pozoruje 5- až 20-násobné zvýšenie aktivity fruktóza-difosfát aldolázy u 90% pacientov. Jeho zvýšenie nastáva 3-15 dní pred objavením sa iných klinických príznakov ochorenia. Po 5 dňoch od začiatku žltačky sa aktivita aldolázy znižuje. Zvýšenie aktivity aldolázy je tiež zaznamenané v prípade anikterických foriem akútnej hepatitídy. U pacientov s chronickými zápalovými procesmi v pečeni sa aktivita aldolázy mierne zvyšuje av malom počte.
Štúdium aktivity aldolázy v sére sa uskutočňuje podľa metódy V. I. Tovarnitského, E. N. Voluiskaya. U zdravých ľudí aktivita tohto enzýmu nepresahuje 3-8 jednotiek.
Aminotransferázy (transaminázy) sa často používajú na diagnostiku zápalových ochorení pečene. Aminotransferázy v ľudskom tele vykonávajú transaminačné procesy (reverzný prenos aminoskupín aminokyselín na keto kyseliny). Štúdia aktivity aspartátaminotransferázy (AST) a alanínaminotransferázy (ALT) má mimoriadny význam. Tieto enzýmy sú široko distribuované v rôznych orgánoch a tkanivách - pečeni, myokarde, kostrových svaloch, obličkách atď. Zvýšenie aktivity aminotransferáz získava diagnostickú hodnotu v porovnaní s klinickými príznakmi ochorenia.
Štúdia sa vykonáva podľa metódy Reitman a Fraenkel. Norma pre AST je 0,1–0,45 mmol / (h • l) (8–40 jednotiek), pre AlT 0,1–0,68 mmol / (h • l) (5–30 jednotiek), V súčasnosti sa množstvo substrátu v móloch katalyzovaných 1 1 testovanej kvapaliny na 1 hodinu inkubácie pri 37 ° C (mmol / (h • l)) berie ako jednotka aktivity enzýmu, jednotky enzýmovej aktivity, ktoré sa odobrali skôr, sa konvertujú na uvedené pomocou nasledujúcich vzorcov: pre AsT - D / 88, pre AlT-D2 / 88, kde D je indikátor aktivity enzýmu, vyjadrený v starom rozmere (jednotky), 88 je konverzný faktor, číslovo rovný molekulovej hmotnosti kyseliny pyrohroznovej.
Pri epidémii hepatitídy sa aktivita aminotransferáz zvyšuje s veľkou konzistenciou a v skorých štádiách, dokonca pred výskytom žltačky. Pri toxickej hepatitíde a exacerbácii chronickej aktivity aminotransferáz sa zvyšuje 3-5 krát. Zmeny cirhózy pečene nie sú také pravidelné.
Laktátdehydrogenáza (LDH) je glykolytický enzým, ktorý reverzibilne katalyzuje oxidáciu 1-laktátu na kyselinu pyrohroznovú. Pre LDH sa vyžaduje ako medziprodukt akceptora vodíka nikotínamidový dinukleotid. V sére sa detegovalo päť izoenzýmov LDH. LDH, nachádzajúce sa v myokarde, LDH5 - v pečeni. Piata frakcia enzýmu je inhibovaná močovinou a táto vlastnosť enzýmu uľahčuje jeho stanovenie.
Sérový LDH sa stanoví metódou Sevel a Tovarek. Normálne hodnoty celkovej aktivity LDH v sére sú 0,8 - 4,0 mmol kyseliny pyrohroznovej na liter séra za 1 hodinu inkubácie pri 37 ° C. Močovina-LDH tvorí 54-75% celkovej LDH.
Používa sa aj v klinických laboratóriách na stanovenie LDH metódou elektroforézy krvného séra v polyakrylamidovom géle. Metóda stanovenia LDH sa nachádza v referenčnej knihe V. G. Kolba, V. S. Kamyshnikov. U vírusovej hepatitídy je aktivita LDH4 a LDH5 zvýšená v prvých 10 dňoch u všetkých pacientov, stupeň jej zvýšenia závisí od závažnosti ochorenia.
Cholinesterázy sú obsiahnuté v erytrocytoch (acetylcholinesteráza) a v sére (acylcholín acylcholín). Oba enzýmy štiepia cholínové estery na cholín a zodpovedajúce kyseliny a vyznačujú sa svojou špecifickosťou. Acetylcholínesteráza hydrolyzuje iba acetylcholín (predtým nazývaný pravá cholínesteráza). Sérová cholinesteráza je schopná rozkladať sa spolu s acetylcholínom a butyrylcholínom (a dvakrát rýchlejšie ako acetylcholín). Preto je tiež známy ako butyrylcholínesteráza alebo falošná cholínesteráza v sére. Je syntetizovaný v pečeni, jeho aktivita sa používa ako znak funkčnej schopnosti pečene.
Aktivita sérovej cholínesterázy je určená stupňom hydrolýzy acetylcholínchloridu na kyselinu octovú a cholínu. Množstvo uvoľnenej kyseliny octovej je určené zmenou farby tlmivého roztoku v prítomnosti indikátora kyslosti na FEC. Štandard je 160–340 mmol / (h • l). V prípade ochorení pečene (hepatitída, cirhóza) sa znižuje syntéza cholínesterázy v sére. U pacientov s obštrukčnou žltačkou dochádza k poklesu aktivity cholínesterázy len vtedy, keď sa objavia príznaky závažného poškodenia pečene. Zníženie jeho aktivity je pozorované pri hypoproteinémii, kachexii, otrave organofosfátovými jedmi, svalovými relaxanciami. V niektorých prípadoch (hypertenzia, myómy maternice, peptický vred atď.) Sa pozoruje zvýšenie aktivity cholínesterázy.
Gama-glutamyltranspeptidáza (G-GTP) rozkladá chromogénny substrát gama-glutamyl-4-nitronylid a uľahčuje prenos gama-glutamylového zvyšku na akceptorový dipeptid glycylglycín. Uvoľnený 4-nitroanilín sa stanoví fotografickou kalorimetrickou metódou pri 410 nm po zastavení enzymatickej reakcie s kyselinou octovou.
GGTG sa nachádza vo všetkých ľudských orgánoch a tkanivách. Aktivita tohto enzýmu v obličkách, pečeni, pankrease, slezine, mozgu je najvyššia (približne 220 mmol / h), v iných orgánoch (srdce, kostrové svaly, pľúca, črevá) - oveľa nižšie (0,1 - 18 mmol / l). Najvyššia aktivita G-GTP sa pozoruje v žlči a v moči, jej aktivita v sére je 4-6 krát nižšia ako v moči, v červených krvinkách tento enzým chýba, aktivita G-GTP v sére zdravých mužov je 0,9 - 6,3 mmol / (h • l), pre ženy - 0,6 - 3,96 mmol / (h • l) Aktivita G-GTP je zvýšená v cirhóze pečene u 90% pacientov s t Vládne, v chronickej hepatitídy - 75% v chronickej cholangiohepatitis -. Takmer enzymaticky aktivované všetci pacienti etanol Stanovenie T-GTP je citlivý test pre diagnostiku ochorení pečene alkoholom toxický..
Alkalická fosfatáza je jednou z hydroláz, ktoré fermentujú organické zlúčeniny, estery kyseliny fosforečnej s elimináciou jej zvyškov. Je aktívny v médiu s pH 8,6 - 10,1 a je silne aktivovaný pod vplyvom iónov horčíka. Alkalická fosfatáza sa nachádza vo všetkých ľudských tkanivách a orgánoch. Zvlášť veľa v kostnom tkanive, pečeňovom parenchýme, obličkách, prostate, iných žľazách, črevnej sliznici. Obsah alkalickej fosfatázy u detí je 1,5-3 krát vyšší ako u dospelých.
V agarovom géli sa elektroforéza použila na izoláciu piatich izoenzýmov alkalickej fosfatázy. Prvá z nich sa považuje za špecifickú pre pečeň, druhá pre kostné tkanivo, piata pre žlčové cesty. Enzým sa vylučuje z pečene žlčou.
Aktivita alkalickej fosfatázy sa deteguje pomocou fosforečnanu sodného beta-glycerolu, ktorý sa hydrolyzuje, aby sa uvoľnil anorganický fosfor. Toto kritérium je kritériom aktivity enzýmu. Enzým sa stanoví v sére podľa Bodanského metódy. Normálne je aktivita alkalickej fosfatázy 0,5-1,3 mmol anorganického fosforu na 1 liter séra počas 1 hodiny inkubácie pri 37 ° C.
Zvýšenie aktivity alkalickej fosfatázy sa vyskytuje hlavne v dvoch stavoch: ochorenia kostí s proliferáciou osteoblastov a ochorenia zahŕňajúce cholestázu. Zvýšená aktivita alkalickej fosfatázy sa pozoruje pri nasledujúcich ochoreniach kostí: hyperparatyroidizmus (Recklinghausenova choroba), kostný sarkóm, deformujúca osteóza alebo fibrózna osteodystrofia (Pagetova choroba) a iné formy osteoporózy. kameň, nádor, lymfatické uzliny pri rakovine žlčových ciest, žalúdok, u osôb so zápalovými ochoreniami pečene a žlčových ciest, pankreasu, lymfatanu, atď. stály nárast aktivity alkalickej fosfatázy pozorované nádory pečene, chronická hepatitída a cirhóza, akútna hepatitída, žltačka a to ako bez a s žltačky. Aktivita enzýmu sa zvyšuje, ak sa mechanická zložka žltačky spája (cholangitída, kompresia spoločného pečeňového kanála regionálnymi lymfatickými uzlinami, uzly regenerujúcej pečene v oblasti jej brán). Zvýšenie aktivity alkalickej fosfatázy v krvi pacientov so žltačkou teda indikuje jeho mechanickú povahu.
Test funkcie pečene
S porážkou pečene nie sú všetky jeho funkcie rušené, nie sú zároveň a nie rovnako. Okrem toho, pečeň má značné rezervné schopnosti: dosť ušetriť 20% funkčného pečeňového parenchýmu na udržanie aktivity tela. Regeneračná schopnosť pečene je rovnako veľká. Preto určité zníženie funkčnosti pečene nemusí mať vplyv na stav pacienta, pretože pečeň aj v týchto podmienkach poskytuje potrebnú úroveň životne dôležitých procesov.
Podstata väčšiny funkčných testov (nielen pečene, ale aj iných orgánov) spočíva v tom, že testovaný orgán je vyrobený tak vysoko, že sa s ním chorý orgán nedokáže vyrovnať (metóda záťaže). Medzi vzorkami, ktorými sa skúmajú pečeňové funkcie, niektoré odrážajú špecifickú aktivitu tohto orgánu, napríklad pigmentové, neutralizačné, proteínotvorné funkcie; iné vzorky iba čiastočne odhaľujú funkciu pečene, pretože jej účasť na tomto type metabolizmu nie je izolovaná, ale súvisí s úlohou ďalších orgánov. Medzi ne patria napríklad vzorky skúmajúce sacharidy, vodu, metabolizmus tukov.
Obr. 117. Schéma izolácie bilirubínu v norme (/) av rôznych typoch žltačky: hemolytická (2), parenchymálna (J) a mechanická <4).
Štúdium metabolizmu pigmentov Odrazom metabolizmu pigmentov v pečeni je obsah bilirubínu v krvi (ako aj vo výkaloch a v moči) a produkty jeho regenerácie. Identifikácia porúch metabolizmu pigmentov dáva predstavu o funkčnom stave hepatocytov a tiež pomáha rozlišovať rôzne typy žltačky.
Tvorba bilirubínu sa vyskytuje v retikuloendotelových bunkách kostnej drene, lymfatických uzlinách, ale najmä v slezine, ako aj v retelloendotelových bunkách pečene (obr. 117). Bilirubin sa tvorí z hemoglobínu, ktorý sa uvoľňuje počas fyziologického rozpadu červených krviniek; súčasne sa hemoglobín rozkladá na proteínové telo globínu a hemu obsahujúceho železo. V bunkách retikuloendotelového systému sa z uvoľneného hemu vytvára voľný bilirubin, ktorý cirkuluje v krvi v nestabilnom vzťahu s albumínovým proteínom. Obsah voľného bilirubínu v krvi je 8,55 - 20,52 μmol / l (0,5 - 1,2 mg%). Väčšina z nich vstupuje do pečene, kde sa uvoľňuje zo svojho spojenia s albumínom a za účasti pečeňových enzýmov sa kombinuje s kyselinou glukurónovou, čím sa vytvára vo vode rozpustná zlúčenina, bily-rubinglukuronid (mono- a diglukuronid alebo viazaný bilirubin), ktorý sa vylučuje do žlčových ciest.
V dôsledku toho sa pečeň podieľa na výmene bilirubínu, pričom plní tieto funkcie: 1) tvorba bilirubínu v stelulárnych retikuloendotelových bunkách; 2) zachytenie voľného bilirubínu z krvi; 3) vytvorenie zlúčeniny bilirubínu s kyselinou glukurónovou; 4) bilirubovanie sekrécie glukuronidu do žlče (viazaný bilirubín).
Na začiatku XX storočia. Van den Berg si všimol inú interakciu séra pacientov so žltačkou so sulfodiazoreaktivom s žltačkou rôznych etiológií. Kým sérum pacienta s obštrukčnou žltačkou sa ihneď po pridaní diazoreaktívneho činidla okamžite zčervenalo, táto zmena farby séra pacienta s hemolytickou žltačkou sa vyskytla až po pridaní alkoholu. Reakcia v prvom prípade sa nazýva priamy, v druhom - nepriamy. Ukázalo sa, že nepriama reakcia je daná voľným bilirubínom a priamou reakciou bilirubovaním glukuronidu (konjugovaného, t.j. viazaného bilirubínu). V závislosti od pridania jednej alebo dvoch molekúl kyseliny glukurónovej k molekule bilirubínu vzniká mono- alebo diglukuronid bilirubínu.
V krvi zdravých ľudí je len voľný pigment. Pri ochoreniach, ktoré sú sprevádzané porušením alebo skreslením normálneho výboja žlčového bilirubínu, vstúpi do krvného obehu a potom v ňom obe pigmenty cirkulujú (môžu byť určené samostatne).
Kvalitatívna vzorka Van den Berga poskytuje informatívne informácie: ak sa ukáže, že je nepriama, môžeme predpokladať, že v krvi je len voľný biliruín; ak sa ukáže, že je priamy, potom nie je známe, v akom pomere sú oba pigmenty - pozitívna priama reakcia maskuje prítomnosť akéhokoľvek množstva voľného bilirubínu. V súčasnosti používajú hlavne oddelené kvantitatívne stanovenie frakcií bilirubínu. Vo väčšine štúdií vykonaných na tento účel sa použijú rovnaké diazo reagenty ako pre kvalitatívnu vzorku (diazo činidlo I: 5 g kyseliny sulfanilovej a 15 ml silnej kyseliny chlorovodíkovej sa rozpustí v destilovanej vode a objem sa upraví na 1 1 destilovanou vodou; diazoreakt II: 0,5% roztok dusitanu sodného, diazo zmes: 10 ml diazoreaktívneho I + 0,25 ml diazoreaktívneho II).
Kvalitatívny test: do 0,5 ml séra nalejte 0,25 ml diazo zmesi. V prípade sčervenenia séra v priebehu menej ako 1 minúty sa reakcia považuje za priamu a indikuje prítomnosť sérového viazaného bilirubínu. Ak sa sčervenanie objavuje pomaly (v priebehu 1 - 10 minút), ku ktorému dochádza, keď je relatívne malé množstvo viazaného bilirubínu naviazané na voľné, reakcia sa považuje za priamu oneskorenú. Ak nie je začervenanie dlhšie ako 10 minút, priama reakcia sa považuje za negatívnu. Ak sa chcete uistiť, že žlté sfarbenie takéhoto séra závisí od bilirubínu, pridáva sa do neho dvojnásobné množstvo alkoholu, filtruje sa a do filtrátu sa pridáva diazo-zmes, v dôsledku čoho sa kvapalina zmení na ružovú (nepriama reakcia). Existuje množstvo spôsobov kvantitatívneho stanovenia frakcií bilirubínu. Niektoré z nich sú založené na skutočnosti, že voľný bilirubín je ovplyvnený takými látkami, ako je kofeín, ktorý sa používa v najbežnejšej metóde Endrashika, metylalkoholu atď., Ktorý pôsobí ako katalyzátor, urýchľovač, získava schopnosť reagovať s diazoreaktantom. V prvej časti séra ošetreného urýchľovačom je možné stanoviť celkový obsah oboch frakcií. V inej časti, bez pridania urýchľovača, sa stanoví len viazaný pigment. Odčítaním jeho viazanej frakcie od celkového množstva bilirubínu rozpoznajú voľnú frakciu. Ďalšie metódy separátneho stanovenia frakcií bilirubínu (chemické, chromatografické) sú zložitejšie.
Voľný bilirubín, nerozpustný vo vode, sa nevylučuje obličkami; po naviazaní s kyselinou glukurónovou sa stáva rozpustným vo vode, keď sa akumuluje v krvi - so subhepatickou a hepatálnou žltačkou, ktorá sa deteguje v moči. V žlčových cestách sa uvoľňuje len viazaný bilirubín (bilirubinglukuronid). Vo veľkých žlčovodoch a žlčníku (najmä počas zápalových procesov v nich) a ďalej v čreve sa malá časť bilirubínu obnovuje na urobilinogén, ktorý sa vstrebáva do hornej časti tenkého čreva a vstupuje do pečene krvou portálnej žily. Zdravá pečeň ju úplne zachytí a oxiduje, ale chorý orgán nie je schopný túto funkciu vykonávať, urobilinogén prechádza do krvi a vylučuje sa močom ako urobilín. Urobilinúria je veľmi jemným a včasným príznakom funkčného zlyhania pečene. Zvyšok, väčšina bilirubínu v čreve je obnovená až do sterkobilinogénu. Hlavná časť sa vylučuje vo výkaloch, mení sa na konečník a z neho (vo svetle a vo vzduchu) sa premieňa na stercobilin, čo dáva výkaly normálnu farbu. Malá časť sterkobilinogénu, absorbovaná v dolných častiach hrubého čreva cez hemoroidné žily, obchádzajúca pečeň, vstupuje do celkovej cirkulácie a vylučuje sa obličkami. Normálny moč vždy obsahuje stopy sterkobilinogénu, ktorý sa vplyvom svetla a vzduchu mení na sterkobilín.
Väčšina reakcií, ktoré detekujú produkty redukcie bilirubínu v moči, poskytuje podobné výsledky ako so urobilínom, tak so stercobilínom, hoci tieto dve látky sa líšia chemickou štruktúrou a fyzikálnymi vlastnosťami. Spôsoby ich separácie sú relatívne zložité. Preto sa v laboratórnej praxi spoločne otvárajú a označujú ako urobilinoidy (urobilínové telieska).
Obsah urobilínových teliesok v moči sa zvyšuje nielen pri nedostatočnej funkcii pečene, ale aj pri zvýšenej hemolýze. V týchto prípadoch sa v dôsledku uvoľnenia významného množstva hemoglobínu tvorí viac bilirubínu a vylučuje sa do čreva. Zvýšená produkcia sterko-bilínu vedie k zvýšenému vylučovaniu močom. V prípade obštrukčnej žltačky, keď žlč nevstúpi do čreva vôbec, v stolici nie je žiadny sterkobilín, v moči nie sú žiadne urobilínové telieska. Keď hepatocelulárna žltačka znižuje vylučovanie bilirubínu v žlči a množstvo stercobilinu vo výkaloch sa znižuje a zvyšuje sa počet urobilinických orgánov v moči. Ich pomer vo výške 10: 1–20: 1 je významne znížený a dosahuje 1: 1 pre závažné poškodenia pečene.V prípade hemolytických žltačiek stúpanie stercobilínu vo výkaloch výrazne prevyšuje zvýšenie vylučovania urobilínových telies do moču. Ich pomer stúpa na 300: 1–500: 1. Pomer produktov bilirubín na regeneráciu vo výkaloch a v moči je oveľa výraznejší pri rozlišovaní žltačky ako absolútna hodnota každého z nich.
Štúdium metabolizmu sacharidov. V pečeňových bunkách za účasti enzýmových systémov dochádza k syntéze glykogénu, jeho ukladaniu a glykogenolýze, ako aj glykoneogenéze. Udržiavanie glukózy v krvi sa okrem pečene poskytuje aj činnosťou iných orgánov a systémov - pankreasu, hypofýzy a nadobličiek atď. V tejto súvislosti sa zmeny glykémie nalačno menia len pri extrémne závažnom poškodení pečene a odhaľujú jej nedostatočnú účasť na sacharidoch. výmena je možná len s pomocou funkčných vzoriek.
Test záťaže glukózou je neúčinný, pretože obsah týchto látok v krvi je okrem už uvedených orgánov ovplyvnený aj stavom vegetatívneho nervového systému, zásobami glykogénu v pečeni a svaloch atď.
Test so záťažou galaktózy je známej hodnoty (galaktóza nie je absorbovaná žiadnymi tkanivami a orgánmi, okrem pečene a hormóny neovplyvňujú jej obsah v krvi). Pacientovi sa nechá vypiť roztok 40 g galaktózy v 200 ml vody a stanoví sa jeho vylučovanie v moči. Normálne sa vyskytuje najviac 4 hodiny a neprekračuje 3 g. Funkcia obličiek a absorpcia čriev môžu ovplyvniť vylučovanie galaktózy v moči, preto je stanovenie obsahu galaktózy v krvi výraznejšie. S dobrou funkciou pečene sa maximálny nárast obsahu galaktózy v krvi pozoruje po 30–60 minútach a neprekročí 15% počiatočnej hladiny; táto sa dosiahne opäť o 2 h. Pri zlej funkcii pečene je zvýšenie hladiny galaktózy vyššie, pokles hladiny galaktózy v krvi sa prejavuje pomalšie.
Štúdium metabolizmu proteínov Úloha pečene v metabolizme proteínov je veľmi vysoká: proteíny sa syntetizujú a ukladajú sa do nej, aminokyseliny, potravinové polypeptidy a produkty rozkladu tkanivových proteínov vstupujú do krvného obehu.
Tu sa katabolizujú, neutralizujú a odstraňujú nepoužité produkty rozkladu. Niektoré aminokyseliny podliehajú deaminácii a transaminácii. Uvoľnený amoniak sa v pečeni premieňa na menej toxickú močovinu, z aminokyselín, ktoré prichádzajú zvonka a syntetizujú sa v pečeni, opäť vytvára vlastné tkanivové proteíny, ako aj krvné proteíny; albumín, globulíny (a a p, do určitej miery y), fibrinogén, protrombín, heparín, niektoré enzýmy. V pečeni sa tvoria zlúčeniny proteínov s lipidmi (lipoproteínmi) a sacharidmi (glykoproteínmi).
Porušenie funkcie tvorby pečene proteínom sa zistí vyšetrením proteínov krvnej plazmy alebo séra. Toto narušenie neovplyvňuje ani tak celkové množstvo bielkovín, pretože pomer ich zlomkov, ktorých zmena - dysproteinémia - sa pozoruje u väčšiny lézií pečene.
Metóda elektroforézy na papieri, ktorá je v súčasnosti najviac používaná v klinickej praxi, je založená na skutočnosti, že rôzne proteíny v elektrickom poli závisia od veľkosti, tvaru molekuly, jej náboja a ďalších faktorov pri rôznych rýchlostiach smerom k pozitívnej elektróde. Počas elektroforézy na papieri sú rôzne proteínové frakcie koncentrované v rôznych častiach papierového pásu, kde môžu byť identifikované vhodným sfarbením. Veľkosť frakcií je určená intenzitou farby každého z nich. Plazmatické proteíny sú rozdelené do piatich hlavných frakcií - albumín; a, -, a2-, (5-, rovnako ako y-globulíny (tabuľka 4). Elektroforéza v iných médiách (agar, škrobový gél, atď.) Umožňuje rozdeliť proteíny na väčší počet frakcií.
Pri ochoreniach pečene je najčastejšie znižovanie pomeru albumín-globulín (A / G), najmä v dôsledku poklesu hladiny
Tabuľka 4. Normálny proteinogram
Zdravie, medicína, zdravý životný štýl
Kvantitatívny test funkcie pečene
Chronické ochorenia pečene sú charakterizované prítomnosťou dlhého latentného obdobia s minimálnymi nešpecifickými klinickými symptómami (štádium kompenzácie). V terminálnom štádiu ochorenia sa vyvíja ascites, žltačka, encefalopatia a prekom (štádium dekompenzácie). Hladina albumínu a protrombínu v sére umožňuje vyhodnotiť syntetickú funkciu pečene, ktorá je vo väčšine prípadov dlhodobo normálna. Kvantitatívna štúdia funkcie pečene v počiatočných štádiách dynamiky umožňuje monitorovanie účinnosti liečby a posudzovanie prognózy, ale nemá diagnostickú hodnotu.
Zát'ažový test galaktózy
Galaktóza je neškodná látka. Môže byť podávaný intravenózne v dávke dostatočnej na saturáciu enzýmového systému zodpovedného za jeho elimináciu. Rýchlosť eliminácie galaktózy závisí od jej fosforylácie galaktokinázou. V tomto prípade je potrebné vziať do úvahy časť podanej dávky, ktorá je eliminovaná extrahepatrickou cestou. Tento test presne odráža funkciu pečeňových buniek, ale vyžaduje opakované stanovenie hladiny galaktózy počas 2 hodín.
Tablitsa2-2. Kvantitatívny test funkcie pečene
Mikrozómy (systém cytochrómu P450)
Glykoproteín s terminálnym zvyškom galaktózy
* Pri nízkej dávke vám umožní vyhodnotiť prietok krvi pečeňou.
Dýchacie testy
Aminopyrín sa transformuje N-demetyláciou cytochrómom P450 (umiestneným v mikrozomálnej frakcii hepatocytov) na oxid uhličitý. Táto látka vo svojich vlastnostiach spĺňa požiadavky na respiračné testy v štúdii funkcie pečene. Aminopyrín je značený rádioaktívnym izotopom 14C a podáva sa perorálne. Vzorky vydychovaného vzduchu sa odoberajú v dvojhodinových intervaloch. Koncentrácia 14C vo vydychovanom CO2 korelovali s mierou poklesu plazmatickej rádioaktivity. Vzorka odráža zostávajúcu hmotnosť fungujúcich mikrozómov a životaschopného pečeňového tkaniva. Výsledky získané v experimentoch na potkanoch s modelom cirhózy pečene naznačujú, že k poklesu N-demetylácie dochádza v dôsledku straty funkčnej hmoty hepatocytov; Súčasne zostáva funkčná aktivita na hepatocyty nezmenená. Štúdia má prognostickú hodnotu a umožňuje sledovať účinnosť liečby (jej úloha v diagnostike je malá). Aminopirínový test sa môže použiť na štúdium účinku liekov na funkciu pečeňových mikrozomálnych enzýmov.
Označené 14 Pri kofeíne a fenacetíne sa môže použiť aj pri respiračných testoch. Vzorka so záťažou14C-galaktózy umožňuje vyhodnotenie enzýmov lokalizovaných v cytosóle. Všetky dýchacie testy sú zložité a drahé, takže je nepravdepodobné, že budú v budúcnosti široko používané.
Odstránenie kofeínu slinnými žľazami
Kofeín (1,3,7-trimetylxantín) je takmer úplne metabolizovaný N-demetyláciou v mikrozomálnom systéme pečene (cytochróm P448). Metylxantíny sa vylučujú močom. Hladina kofeínu v sére a slinných žľazách sa môže skúmať enzýmovým imunotestom. Rýchlosť vylučovania kofeínu slinami cez noc dobre koreluje s jeho klírensom, ako aj s výsledkami respiračného testu s aminopyrínom. Štúdia vylučovania kofeínu slinnými žľazami je jednoduchý spôsob, ako zhodnotiť dysfunkciu pečene. Odstránenie kofeínu ovplyvňujú rôzne faktory: fajčenie urýchľuje metabolizmus kofeínu indukovaním enzýmov, niektoré lieky, ako napríklad cimetidín, inhibujú rozklad kofeínu; klírens kofeínu klesá s vekom. Pri opakovanom stanovení klírensu kofeínu u toho istého pacienta by mala byť dávka kofeínu rovnaká, pretože jeho klírens závisí od dávky.
Test s lidokaínom
Lidokaín je metabolizovaný oxidačnou N-deetyláciou cytochrómom P450; súčasne sa vytvorí monoetylglycín-cenexylidid (MEGE), ktorého hladina koreluje s rýchlosťou klírensu lidokaínu. Stanovenie koncentrácie MEGE v sére po intravenóznom podaní lidokaínu vám umožňuje kvantifikovať funkciu pečene. Koncentrácia MEGE podlieha výrazným výkyvom u ľudí so zdravou pečeňou au pacientov s miernym porušením jeho funkcie. Významný pokles tohto ukazovateľa sa pozoruje pri cirhóze pečene a stupeň poklesu koreluje s prognózou ochorenia. Pri vykonávaní diferenciálnej diagnózy medzi cirhózou a menším poškodením pečene sú štúdie eliminácie galaktózy a respiračného testu aminopyrínu informatívnejšie.
Test s antipyrínom
Antipyrín má dlhý polčas rozpadu, ktorý u pacientov so závažným poškodením pečene môže presiahnuť 30 hodín, takže vzorky krvi a slín na výskum sa musia užívať dlhodobo, čo obmedzuje použitie tejto vzorky na diagnostické účely.
Stanovenie asialoglykoproteínových receptorov
Hepatocyty odvodzujú asialoglykoproteíny (s terminálnym galaktózovým zvyškom) z vaskulárneho lôžka v dôsledku prítomnosti špecifických receptorov na sínusovej membráne hepatocytov. Keď sú lézie parenchýmu pečene, počet týchto receptorov klesá. Posudzuje sa podľa stupňa zachytenia značeného 99mTc galaktozylového neoglykalbumínu (analóg asialoglykoproteínu) v pečeni, ktorý sa stanoví pomocou štandardnej scintilačnej komory pri jedinom vyšetrení vzorky krvi. Výsledky štúdie korelujú so závažnosťou ochorenia (určeného systémom kritérií dieťaťa), výsledkami respiračného testu s aminopyrínom a klírensom indokyanínu. Priemerná koncentrácia receptorov v terminálnom štádiu cirhózy je 0,35 ± 0,07 µmol / l v porovnaní s 0,83 ± 0,06 µmol / l v kontrolnej skupine [9]. Podobné výsledky sa získali pri použití ľudského sérového albumínu značeného s 99m Tc-dietyléntriamom a npenta-acetát-galaktozyl [5]. Počet receptorov sa znižuje s akútnou hepatitídou a počas obdobia zotavovania sa znovu zvyšuje [12]. Napriek sľubným výsledkom sa tento výskum uskutočňuje len v špeciálnych prípadoch.
Kapacita vylučovania pečene (bromsulfaleínový test)
Stará metóda skúmania rýchlosti eliminácie intravenózne injikovanej BS z cievneho lôžka umožňuje vyhodnotiť absorpčnú a vylučovaciu schopnosť hepatocytov. Táto metóda nebola na klinike aplikovaná kvôli jej zložitosti, vysokým nákladom a možným komplikáciám [4].