Kvalitatívna analýza hepatitídy C

8. marec 2017, 12:29 Odborné články: Nová Vladislavovna Izvchikova 0 10,547

Kvalitatívna analýza polymerázovej reťazovej reakcie - PCR pre hepatitídu C určuje prítomnosť alebo neprítomnosť HCV v tele. V laboratórnych podmienkach sa skúma štruktúra RNA, ktorá bude obsahovať vírus. V prípade zistenia vírusu C je potrebné podstúpiť priebeh liečby, pretože zanedbaný stav pečene bude mať vážne následky. Vysokokvalitná PCR sa vykonáva po regenerácii, aby sa potvrdila neprítomnosť protilátok. Menovaný a na bežnú kontrolu. Pri nízkej koncentrácii pôvodcu v krvi nemusí PCR (kvalitatívna) nič detegovať, pretože diagnostický systém má svoje vlastné prahy citlivosti. V prípade počiatočného štádia ochorenia alebo miernej formy sa PCR uskutočňuje ultradiagnostikou na ultracitlivých zariadeniach.

Čo je RNA vírus?

Termín RNA vírusu hepatitídy C (alebo RNA vírusu hepatitídy C) je samotné ochorenie pečene. Vírus C sa viaže na zdravú bunku tela tým, že preniká dovnútra. V priebehu času, sa šíri po celom tele, je potrebné len dostať do krvi. V dôsledku toho patogén preniká do pečene, fúzuje s bunkami a pracuje tvrdo. Pečeňové bunky (hepatocyty) pracujú pod jej vplyvom, prechádzajú zmenami a odumierajú. Čím dlhšie je vírus C v pečeni, tým väčší je počet buniek. Postupom času sa vyvíjajú nebezpečné ochorenia, ktoré vedú k malígnej degenerácii a smrti.

Infekcia pečene týmto typom vírusu sa nemusí prejavovať externe. Po mnoho rokov alebo desaťročí sa infikovaný človek cíti úplne zdravý a iba náhodné vyšetrenie najčastejšie odhaľuje patológiu. Pri darovaní krvi na hepatitídu sa skúma časť reťazca RNA (ribonukleová kyselina), ktorý je súčasťou ľudského génu (DNA). Výsledky laboratórnych testov by sa nemali používať na samoliečbu, pretože ide len o ukazovateľ. Presný obraz a ďalšia diagnóza je lepšie určená lekárom.

Po dokončení: indikácie pre výskum

Pri potvrdení HCV sa uskutoční PCR analýza (polymerázová reťazová reakcia). Štúdie PCR pomáhajú nájsť pôvodcu v štruktúre RNA a predpisujú účinnú liečbu. Menovaný v týchto prípadoch:

• zistenie príznakov zápalu pečene;
• skríningové štúdie na prevenciu;
• vyšetrovanie osôb v kontakte;
• diagnostika hepatitídy zmiešaného pôvodu (stanovenie hlavného patogénu);
• stanovenie úrovne reprodukčnej aktivity vírusu v chronickej forme;
• cirhóza pečene;
• na určenie účinnosti predpísanej liečby.

Výskum PCR predpisuje lekárovi, aby určil účinnosť priebehu liečby hepatitídy.

Existuje kvalitatívna aj kvantitatívna analýza PCR. Kvantitatívna PCR ukazuje percento RNA s nosičmi vírusu v krvi a kvalitatívne indikuje prítomnosť alebo neprítomnosť vírusu. Pozitívny indikátor kvality (prítomnosť RNA hepatitídy C) tiež vyžaduje kvantitatívny výskum. Vysoká úroveň koncentrácie pôvodcu hepatitídy C je spojená s rizikom jej prenosu, tj infekcie iných. Nízke čísla sú lepšie liečiteľné. Množstvo vírusov RNA v krvi nesúvisí s intenzitou ochorenia. PCR analýza sa tiež vykonáva v prípade terapie interferónom, aby sa stanovilo trvanie a komplexnosť liečebného postupu.

Vlastnosti vysoko kvalitnej PCR analýzy hepatitídy C

Kvalitatívna analýza je priradená ukazovateľovi polymerázovej reťazovej reakcie pre všetkých pacientov, ktorí majú protilátky proti hepatitíde C v krvi, tí, ktorí boli chorí a zotavení, musia znovu podstúpiť test. Odporúča sa vykonať analýzu hepatitídy B, potom v prípade pozitívneho záveru a hepatitídy D. Tiež kvalitatívne analyzovaná reakcia by sa mala vykonať v spojení s inými krvnými testami. Analýzy ukazujú úplný obraz šírenia vírusu.

Z výsledkov testov bude viditeľný alebo negatívny len pozitívny test na hepatitídu C, to znamená prítomnosť alebo neprítomnosť vírusu. Ak je výstup "detegovaný", vírus je a naďalej je aktívny. Označenie "nezistené" označuje neprítomnosť vírusu alebo jeho malého množstva. S týmto indikátorom je potrebné mať na pamäti, že analytická citlivosť diagnostických systémov je odlišná a že RNA hepatitída C môže byť stále v krvi, ale v analýze sa neprejavuje.

Zvlášť citlivá metóda PCR odhalila ultra hepatitídu C aj v malých množstvách. Používa sa fluorescenčná hybridizačná štúdia, ktorá je mnohonásobne vyššia ako štandardné PCR systémy. Metóda sa používa v niekoľkých prípadoch:

• podozrenie na skryté formy hepatitídy C;
• PCR diagnostika nepotvrdila patogén, ale sú tu protilátky;
• v prípade zhodnotenia;
• odhaliť skorú infekciu.

Späť na obsah

Dekódovacia analýza

Dekódovanie PCR HCV ovplyvňuje konečné rozhodnutie pri stanovení diagnózy, najmä pomocou ultrametodovej metódy. Hlavnou nevýhodou tejto štúdie je prísne dodržiavanie sterilných podmienok pre vzorku a materiály. Mierna odchýlka niekedy ukazuje nepresné analytické závery, komplikuje diagnostiku a následnú liečbu. Analýza PCR na stanovenie RNA hepatitídy nie vždy s istotou ukazuje obraz choroby, niekedy sú dovolené nepresnosti av oboch smeroch.

Pri diagnostike vírusu hepatitídy sa odporúča použiť komplexné vyšetrenie.

Norma ukazovateľov

Neprítomnosť JgM protilátok proti vírusovej hepatitíde C vo výsledkoch štúdie sa považuje za normu v analýze polymerázovej reťazovej reakcie. Zároveň zistenia sérologickej analýzy poukazujú na prítomnosť protilátok proti vírusu C, čo je tiež v normálnom rozsahu. Kvalitatívna definícia neukazuje intenzitu ochorenia, ale iba odhalí pôvodcu hepatitídy C v RNA. Táto analýza sa po spracovaní opakuje, aby sa potvrdila skutočná regenerácia.

odchýlky

Ak sú prítomné JgM protilátky proti HCV RNA, znamená to, že sa vyvíja infekcia. Ochorenie prebieha súčasne akútne alebo chronicky, prejavuje sa v rôznych štádiách. Ak sa zaznamená zníženie počtu protilátok, analýza ukáže, že výsledky liečby sa dosiahli počas zotavenia. Existujú mimoriadne zriedkavé prípady falošne pozitívnych nálezov v diagnostike. Nachádzajú sa u žien počas tehotenstva au ľudí s inými infekčnými chorobami.

Náklady na krvné testy a PCR na hepatitídu C

Hepatitída C je zápalová patológia, v ktorej sú postihnuté pečeňové bunky. Choroba sa vyvíja v dôsledku prenikania vírusu hepatitídy C (HVC) do ľudského tela.

Forma ochorenia môže byť akútna alebo chronická.

Najčastejšie chýbajú príznaky akútnej formy patológie u väčšiny pacientov, niekedy je choroba sprevádzaná bolestivými pocitmi v bruchu, zníženým výkonom, zvýšenou únavou, stratou chuti do jedla, tmavým nádychom moču, sfarbením stolice, žltnutím kože a slizníc, bolesťami kĺbov. Takéto príznaky sa zvyčajne vyskytujú 6-8 týždňov po infekcii, ale môžu sa objaviť po šiestich mesiacoch.

S rozvojom takýchto javov je potrebné kontaktovať zdravotnícke zariadenie a podrobiť sa komplexnému vyšetreniu celého organizmu. V rámci lekárskeho vyšetrenia sa vykoná krvný test na hepatitídu C.

Dnes, s pomocou moderných diagnostických techník, môže byť táto patológia identifikovaná v počiatočnom štádiu vývoja, čo výrazne zvyšuje šance na úplné vyliečenie ochorenia.

Na testovanie na hepatitídu C sú potrebné tieto skupiny ľudí:

• ženy v období nosenia dieťaťa;
• osoby so známkami hepatitídy;
• zdravotnícky personál;
• potenciálnych darcov orgánov a krvi;
• narkomani, osoby infikované HIV, promiskuitný intímny život.

Zoznam požadovaných štúdií

Aké testy mám užívať na hepatitídu C? Na presné diagnostikovanie ochorenia, identifikáciu jeho príčin a určenie stavu parenchýmu pečene sú potrebné nasledujúce štúdie:

• všeobecné testy moču a krvi;
• biochemická analýza krvi;
• PCR analýza;
• krvný test na detekciu protilátok proti HVC;
• krvný test dostupných protilátok proti vlastným pečeňovým bunkám;
• biopsia pečene.

Rozlúštenie krvného testu na hepatitídu C vykonáva odborník. Podrobnejšie zvážte každú metódu výskumu a pochopíme, ktorá analýza hepatitídy C je najpresnejšia.

Všeobecná analýza

Pri vykonávaní kompletného krvného obrazu na hepatitídu C môžete zhodnotiť stav pacienta. Zmeny krvných parametrov nie sú vnímané ako špecifické príznaky hepatitídy, avšak pri tejto chorobe existujú také poruchy, ako sú:

• koncentrácia hemoglobínu, trombocytov a leukocytov klesá;
• zvyšuje obsah lymfocytov;
• je porušená zrážanlivosť krvi;
• zvyšuje rýchlosť sedimentácie erytrocytov (ESR).

Všeobecná analýza moču umožňuje vo svojom zložení odhaliť urobelín - žlčový pigment, ktorý sa vyskytuje v moči v dôsledku zhoršenej funkcie pečene.

Biochemická analýza

Biochemická analýza krvi pri hepatitíde C umožňuje identifikovať takéto poruchy ako:

• zvýšené hladiny pečeňových enzýmov (alanín transamináza - ALT a aspartátaminotransferáza - AST), ktoré vstupujú do krvi, keď sú poškodené hepatocyty. V normálnom stave by tieto ukazovatele pre mužov nemali byť vyššie ako 37 IU / l, pre ženy - nie vyššie ako 31 IU / l. Zvýšená koncentrácia ALT a AST pri asymptomatickej hepatitíde C je často jediným príznakom tohto ochorenia. Okrem toho sa zvyšuje hladina alkalickej fosfatázy glutamyltranspeptidázy (zvyčajne nie vyššia ako 150 IU / l).
• prekračuje sa obsah bilirubínu (všeobecného aj priameho) v krvi. Ak hladina žltého pigmentu v sére presiahne 27-34 µmol / l, objaví sa žltačka (až 80 µmol / lv miernej forme, 86-169 µmol / lv stredne ťažkej forme, nad 170 µmol / lv ťažkej forme).
• Hladina albumínu sa znižuje, naopak koncentrácia gama globulínov sa zvyšuje. Gama globulíny sú tvorené imunoglobulínmi - protilátkami, ktoré chránia telo pred látkami spôsobujúcimi ochorenie.
• zvýšená koncentrácia triglyceridov v krvi.

PCR test

Pomocou PCR techniky je možné diagnostikovať pôvodcu. Vykonanie tejto analýzy umožňuje odhaliť vírus v krvi, aj keď je jeho množstvo minimálne. PCR analýza hepatitídy C umožňuje stanoviť existujúcu infekciu v krvi už po 5 dňoch od okamihu infekcie, teda dlho predtým, ako sa objavia protilátky.

Ak je výsledok krvného testu na hepatitídu C PCR pozitívny, znamená to prítomnosť aktívnej infekcie v tele. Pomocou tejto metódy môžete vykonať kvalitatívnu a kvantitatívnu štúdiu HVC RNA.

Počas kvalitatívnej analýzy PCR na hepatitídu C je možné detegovať existujúci vírus v ľudskom tele.

Tento diagnostický postup sa vykonáva, ak sa v krvi zistí anti-HVC.

Rozlúštenie analýzy hepatitídy C obsahuje informácie, že infekcia bola zistená alebo nebola zistená v tele. Normálne sa v krvi nenachádzajú žiadne patologické látky.

Ak je test hepatitídy C pozitívny, znamená to, že patogén sa nepretržite delí a infikuje pečeňové bunky.

Výsledky tejto analýzy môžu byť nespoľahlivé, je to možné v nasledujúcich prípadoch:

• použitý kontaminovaný biomateriál;
• v prítomnosti heparínu v krvi;
• v prítomnosti chemických alebo proteínových látok (inhibítorov) v skúmanom biomateriáli, ktoré ovplyvňujú prvky PCR.

Kvantitatívna analýza hepatitídy C poskytuje informácie o množstve vírusu obsiahnutého v krvi, to znamená určuje vírusovú záťaž. Týmto pojmom sa myslí objem HVC RNA prítomnej v krvi (napríklad v 1 ml). Pri interpretácii kvantitatívnej analýzy hepatitídy C je táto hodnota vyjadrená v digitálnom ekvivalente meranom v IU / ml.

Krv pre PCR na hepatitídu C sa odoberá pred terapeutickými opatreniami. Po analýze sa uskutoční 1, 4, 12 a 24 týždňov. Štúdia v 12. týždni je indikatívna a vykonáva sa na posúdenie účinnosti terapeutických postupov.

Ak je test na hepatitídu C počas tehotenstva pozitívny a hodnoty vírusovej záťaže sú prekročené, riziko prenosu patogénov z chorej matky na dieťa sa niekoľkokrát zvyšuje. Aj pri zvýšenej vírusovej záťaži je vykonávanie terapeutických opatrení ťažké.

Podľa prepisu testov na hepatitídu C, ak hodnoty vírusovej záťaže presiahnu 800 000 IU / ml, potom sú vysoké. Ak sú hodnoty nižšie ako 400 000 IU / ml, hladina vírusovej záťaže sa považuje za nízku.

Analýza hepatitídy C pomocou PCR sa považuje za najpresnejšiu a má niekoľko výhod oproti iným možnostiam výskumu, a to:

• priamu diagnózu pôvodcu ochorenia. Pri vykonávaní tradičných štúdií sa určuje prítomnosť proteínových markerov, ktoré sú odpadovými produktmi patogénov. To len naznačuje, že infekcia je prítomná v krvi. Pri testovaní na hepatitídu C pomocou PCR je možné určiť typ patogénu nebezpečnej patológie.
• špecifickosť techniky. Počas tohto postupu sa v biomateriále stanoví jedinečná oblasť DNA, ktorá zodpovedá iba jednému typu patogénu. Tým sa minimalizuje pravdepodobnosť falošných výsledkov.
• vysoká citlivosť. Pri vykonávaní analýzy PCR môžete zistiť minimálne množstvo vírusu. Je to dôležité, ak sa identifikujú podmienečne patogénne látky, ktoré predstavujú hrozbu len vtedy, ak sa ich úroveň zvyšuje.
• Pri použití tejto techniky v jednej vzorke biomateriálu možno naraz detegovať niekoľko patogénov.
• môže odhaliť skryté infekcie. Okrem toho analýza umožňuje diagnostikovať patogénne mikroorganizmy, ktoré žijú v bunkách a majú vysokú antigénnu variabilitu.

Ak sú výsledky testov pozitívne, potom sa v biomateriáli nachádzajú stopy vírusu, potom má sieť infekciu v tele.

Negatívna PCR analýza hepatitídy C znamená, že v biomateriále nie sú žiadne stopy infekcie.

Imunologická štúdia

Táto metóda vám umožňuje identifikovať protilátky proti všetkým typom vírusu hepatitídy, ako aj protilátky proti pečeňovým bunkám vlastného tela, ktorých vzhľad prispieva k rozvoju autoimunitnej hepatitídy.

Výsledky získané počas štúdie sú relevantné počas 3 mesiacov, potom by ste mali znovu darovať krv na hepatitídu C.

Expresnú štúdiu je možné vykonať aj pomocou špeciálnych testovacích prúžkov. Táto analýza umožňuje stanovenie protilátok proti vírusu C v zložení krvi a slín, tento postup sa môže vykonávať samostatne, doma.

Biopsia pečene

Na vykonanie tejto analýzy sa použije prvok parenchýmu pečene a vykoná sa histologické vyšetrenie získaného biomateriálu. To vám umožní posúdiť stav tela: identifikovať zápalové, nekrotické ložiská, štádium fibrózy a tak ďalej.

V súčasnosti sa používajú testy, ktoré nahrádzajú histologickú analýzu pečeňového parenchýmu.

Na posúdenie štádia poškodenia pečene a intenzity zápalového procesu sa používajú špecifické biomarkery venóznej krvi. Pomocou Fibrotestu môžete odhadnúť stupeň rastu fibrózneho tkaniva.

Pri vykonávaní Actitestu môžete získať informácie o intenzite patologických procesov v pečeňovom parenchýme. Použitie Steatototesta môže diagnostikovať tukové tkanivo pečene a vyhodnotiť rozsah tohto procesu. Fibromax pozostáva zo všetkých vyššie uvedených testov a môže zahŕňať niektoré ďalšie štúdie.

Príprava na štúdium

Aké testy sa vykonávajú na hepatitídu C a ako sme zistili tento alebo takýto typ výskumu. Rovnako dôležité je vedieť, ako sa pripraviť na analýzu.

Na získanie spoľahlivých výsledkov sa odporúča dodržiavať nasledujúce požiadavky:

• Testy hepatitídy C sa musia vykonávať ráno, nalačno. Jedlo by sa malo konzumovať najmenej 8 hodín pred štúdiou.
• Biomateriál sa môže zbierať vo dne alebo vo večerných hodinách. V tomto prípade je dôležité, aby medzi posledným jedlom a analýzou uplynulo aspoň 5-6 hodín.
• pred darovaním krvi na hepatitídu C by sa mal zlikvidovať čaj, káva, džús alebo iné nápoje, povolená je len voda.
• 48 hodín pred štúdiou je potrebné vylúčiť použitie mastných, vyprážaných potravín a nápojov obsahujúcich alkohol.
• aspoň hodinu pred analýzou sa musíte zdržať fajčenia.
• analýza sa nemá vykonať bezprostredne po ultrazvuku, inštrumentálnom vyšetrení, röntgenovom vyšetrení, masáži alebo fyzioterapii.
• jeden deň pred realizáciou štúdie je potrebné vylúčiť používanie liekov a intenzívnu fyzickú aktivitu. Kontraindikovaný je aj emocionálny stres.
• Odporúča sa stráviť 15 minút pred vykonaním štúdie v pokojnom stave.

Vykonanie postupu odberu krvi

Kde sa dá testovať na hepatitídu C? Biomateriál sa používa na ďalšie vyšetrenie v laboratóriu zdravotníckeho zariadenia alebo u pacienta doma.

Krv zo žily sa berie nasledovne:

• pomocou špeciálnej škrtiacej kocky omotanej okolo predlaktia pacienta sa zastaví prietok žily. Vďaka takýmto manipuláciám sa žily naplnia krvou a budú viditeľnejšie, čo značne uľahčí proces vkladania ihly.
• oblasť kože, do ktorej sa ihla vloží, sa opatrne spracuje alkoholom alebo kvapalinou obsahujúcou alkohol.
• Ihla sa jemne vloží do žily, potom sa k nej pripojí skúmavka, špeciálne navrhnutá na odber krvi.
• Ihneď po zavedení ihly do žily sa z paže pacienta vytiahne stláčací postroj.
• po odobratí objemu krvi potrebnej na analýzu sa ihla jemne vyberie zo žily.
• Na miesto vpichu injekcie sa musí aplikovať sterilný vatový tampón alebo gázová vložka navlhčená alkoholom.
• aby sa zabránilo výskytu hematómu, tampón by mal byť stlačený s určitým úsilím proti oblasti vpichu ihly, ohnúť rameno pri lakte a držať ho v tejto polohe niekoľko minút. Takéto akcie tiež pomôžu zastaviť krv rýchlejšie.

Za predpokladu, že technika vnútorného podávania je dobrá, tento postup je absolútne bezpečný a nespôsobuje bolestivé pocity.

V zriedkavých prípadoch po odbere krvi môžu žily napučiavať. Tento jav sa nazýva "flebitída". Kompresia (nie horúca) pomôže vyriešiť problém, mal by sa aplikovať na opuchnuté oblasti kože niekoľkokrát denne.

Určité problémy sa môžu vyskytnúť aj v prípade poruchy krvácania. Užívanie aspirínu, warfarínu a iných riedidiel krvi môže spôsobiť krvácanie. Preto je pred vykonaním analýzy potrebné odmietnuť akékoľvek lieky. Ak sa liečba nedá zrušiť, informujte o tom odborníka.

Termíny a ceny

Koľko sa testuje na hepatitídu C? Výsledky krvného testu na hepatitídu môžu byť pripravené v priebehu niekoľkých hodín a za niekoľko dní (zvyčajne nie viac ako 8 dní). Trvanie prípravy výsledkov závisí od typu vírusu a zvolenej metódy analýzy. Rýchlejšia je štúdia uskutočnená metódou PCR. Výsledky v tomto prípade budú pripravené v priebehu niekoľkých hodín.

Koľko stojí test na hepatitídu C? V závislosti na klinike a zložitosti štúdie sa cena zákroku môže pohybovať od 400 do 11 000 rubľov.

Mali by ste vedieť, že vytvorenie dostatočného množstva protilátok proti HVC môže trvať niekoľko týždňov. Preto v počiatočnom štádiu vývoja patológie môže byť výsledok štúdie falošne negatívny.

Získavanie nespoľahlivých údajov je možné aj pri nekvalitnej analýze a porušovaní podmienok prepravy získaného biomateriálu (vzorky musia byť dodané do laboratória maximálne 2 hodiny po odbere krvi).

Ak je výsledok štúdie pozitívny, mali by ste okamžite kontaktovať lekára infekčných chorôb. Odborník vykoná ďalšie vyšetrenie a predpíše vhodnú liečbu.

PCR diagnostika hepatitídy C

Hepatitída C je zápal pečeňových buniek, ku ktorému dochádza v dôsledku infekcie vírusom HCV (hepatitída C) kontaktom s krvou infikovanej osoby. Genetický kód HCV flavivírusu nesie molekula RNA (kyselina ribonukleová) obsiahnutá v štruktúre vírusu. Tento život ohrozujúci jav sa vyznačuje utajením v počiatočnom štádiu patológie. Časový interval medzi infekciou a nástupom symptómov (odpoveď imunitného systému) môže byť od jedného mesiaca do šiestich mesiacov. Choroba má spravidla chronickú formu a je ťažké ju vyliečiť.

Moderná medicína vám umožňuje diagnostikovať patológiu s malým poškodením pečene. Medzi najbežnejšie a najúčinnejšie diagnostické metódy patrí analýza PCR. Zvážte v tomto článku, čo to je a aké druhy existujú.

Čo je to štúdia

PCR analýza hepatitídy C je laboratórne vyšetrenie, ktoré detekuje flavírus, genetický materiál kyseliny ribonukleelénovej (RNA). Určuje počet molekúl RNA v krvi, kvalitu biologického materiálu, genetický typ vírusu HCV.

Metóda PCR pre hepatitídu C umožňuje detegovať minimálne množstvo flaviru pred tvorbou protilátok, spravidla krátko po infekcii.

Štúdia je často označovaná ako analýza RNA, pretože detekuje častice ribonukleovej kyseliny s veľkosťou 30-60 nm obsiahnuté v flavavíruse.

Štúdia sa vykonáva nasledovne: na prázdny žalúdok pacient dáva krv zo žily, ktorá sa potom testuje rôznymi metódami:

• PCR v reálnom čase sa uskutočňuje v uzavretom automatizovanom spôsobe a má dolnú hranicu na detekciu vírusu RNA, ktorá sa rovná 15 IU / ml;
• COBAS AMPLICOR s citlivosťou 50-100 IU / ml.

Čím vyššia je prahová hodnota citlivosti diagnostickej techniky, tým väčšia je pravdepodobnosť nájdenia najnižšieho obsahu vírusu v biologickom materiáli, ktorý je predmetom vyšetrovania.

Aké typy analýz sa používajú

Analýza, ktorá sa úspešne používa niekoľko desaťročí, sa nazýva PCR hepatitída a dá sa ľahko a rýchlo zistiť. V medicíne existujú dve metódy reakcie, ktoré sa navzájom zásadne líšia:

• kvalitatívna metóda odhaľuje prítomnosť v biologickom materiáli genetického zdroja špecifického vírusu;
• kvantitatívna analýza meria počet genetických látok, ktoré umožňujú určiť štádium patológie alebo vyhodnotiť účinnosť terapeutického priebehu;
• genotypovanie určuje typ vírusu prítomného v tele.

Všeobecne platí, že krvný test pomáha identifikovať povahu virémie a genetického typu patogénu. Výskum sa spravidla vykonáva raz v závislosti od stupňa citlivosti diagnostického systému. Ak je to potrebné, opakované testovanie sa vykonáva pomocou ultrazvukového činidla.

Vysoko kvalitná PCR

Čo je vysoko kvalitná PCR RNA pre hepatitídu C? Podstata reakcie spočíva v prítomnosti RNA sekvencie hepatitídy a reakcia je možná len v prítomnosti vírusových proteínov s podobnou etymológiou v teste ELISA. V procese porovnávania sa zistí zaťaženie a možné poškodenie oblasti pečene.

Charakteristickým znakom tejto metódy je schopnosť detegovať aj prítomnosť samostatného génu.

Treba poznamenať, že po získaní výsledkov testov PCR a ELISA si pacient vyžaduje vhodnú liečbu bez ohľadu na to, aký bol konečný výsledok imunotestu. Pozitívne indikuje infekciu a PCR negatívne indikuje redukovaný počet vírusových častíc vzhľadom na úroveň citlivosti.

Existuje niekoľko podmienok, ktoré ovplyvňujú produkciu negatívnej PCR a ELISA:

• nedostatok vhodných podmienok zberu materiálu;
• výsledná analýza obsahuje kontamináciu;
• v prípade skorej injekcie heparínu pacientovi.

Pacient nemusí dodržiavať určité pravidlá odberu vzoriek krvi na analýzu PCR, v tomto prípade závisí kvalita tejto analýzy od toho, či lekár vykonal zákrok. Schopnosť stanoviť prítomnosť ochorenia (najmä v akútnej forme) sa objaví v priebehu niekoľkých týždňov po infekcii.

Kvantitatívna analýza

Kvantitatívny test sa odporúča na detekciu vírusovej záťaže bezprostredne pred tvorbou ďalšej terapie a reakcie organizmu. Proces odberu krvi sa vykonáva podobným spôsobom ako pri vysokokvalitnej PCR a ELISA, jedinou podmienkou je absencia možnosti fajčiť pacienta pred zákrokom.

Vzhľadom na charakteristiky získané štúdiom údajov je zvýšená záťaž charakterizovaná indikátormi od 800000 IU / ml, nízkymi - 400000 IU / ml. Prítomnosť vírusu v tele pacienta je indikovaná PCR na hepatitídu nie je negatívny kvalitatívny test.

Tento druh výskumu umožňuje určiť, aký nebezpečný je pre ľudí ľudí okolo neho. Napríklad identifikácia vysokej hladiny indikuje zvýšenú infekčnosť pacienta. Okrem toho výsledky analýzy pomáhajú formulovať ďalšiu najúčinnejšiu liečbu a určiť, do akej miery sa súčasná liečba považuje za účinnú.

Rýchla negatívna reakcia testov indikuje úspech zvolenej techniky a pomalá naznačuje potrebu úprav a použitia viacfázovej liečby.

Proces vykonávania analýzy závisí od konkrétneho dňa priebehu ochorenia. Prvé stanovenie sa uskutoční prvý deň po prijatí pacienta do nemocnice, potom sa postup opakuje po 4, 12 a 24 týždňoch po užití liekov.

Kvantitatívna analýza teda ukazuje, ktorá liečba je najefektívnejšia, trvanie dostupnej terapie a nebezpečenstvo pacienta vo vzťahu k iným osobám.

genotypu

V štúdii materiálovej analýzy je dôležité určiť presnosť genotypu vírusu, ktorý sa uskutočňuje. V súčasnosti existuje 11 druhov vírusu hepatitídy C, ktoré zase zahŕňajú určité poddruhy.

Všetky tieto druhy reagujú odlišne na rôzne liečby, pričom jednotlivé odrody sú absolútne odolné voči mnohým liekom.

Genotyp umožňuje určiť a ukázať stav pečene. Nie je nezvyčajné, že výsledky nie sú vo výsledkoch „typizované“, čo znamená, že týmto testovacím systémom nie je detekovaný vírus v krvi pacienta. To sa dá zistiť, ak určitý genotyp nezodpovedá tejto zóne. V takejto situácii sa analýza vykonáva opakovane a na štúdium materiálu sa používa citlivejší systém.

Ultra citlivá metóda

Ultrazvuková metóda je nevyhnutná v niektorých prípadoch, keď diagnózu hepatitídy nie je možné vykonať inými metódami, a ak je potrebné vykonať analýzu, určí ošetrujúci lekár:

• ak máte podozrenie na prítomnosť vírusu hepatitídy C u pacientov so skrytou odrodou ochorenia;
• prítomnosť protilátok proti vírusu hepatitídy C, ktorá nebola potvrdená PCR diagnostikou;
• aby sa určila kvalita účinnosti zvoleného spôsobu liečby a potvrdila eliminácia ochorenia.

Citlivosť tejto metódy je oveľa vyššia ako citlivosť bežne používaná, avšak táto metóda nevylučuje získanie falošných výsledkov, pozitívnych aj negatívnych. V takejto situácii je dôležité kontrolovať kvalitu postupu a možnosť kontaminácie samotného materiálu.

Vysvetlenie PCR analýzy

Dekódovanie analýzy sa vykonáva na základe predložených materiálov, pričom výsledky laboratórneho výskumu zahŕňajú určité údaje opísané vyššie.

Transkript môže zahŕňať pozitívnu PCR polymerázovú reťazovú reakciu a negatívny test ELISA v teste, čo znamená, že pacient nemá žiadne príznaky hepatitídy C v krvi, ale v minulosti preniesol akútnu formu ochorenia. Spravidla sa pri diagnostikovaní špecialisti uchyľujú k použitiu indikátorov testu PCR.

Ak zhrnieme všetky uvedené skutočnosti, je možné konštatovať, že počas analýzy je dôležité dodržiavať všetky pravidlá a odporúčania tak, aby boli získané výsledky čo najpresnejšie a na základe získaných údajov je možné určiť efektívnosť použitej terapie a ďalšiu šancu na úplné uzdravenie.

Vykonanie PCR analýzy hepatitídy C a dekódovanie výsledkov

Analýza PCR hepatitídy C je štúdia, ktorej hlavným účelom je identifikovať genetický materiál pôvodcu. Analýza odhalila pôvodcu ochorenia pomocou polymerázovej reťazovej reakcie. Táto diagnóza má vysoký stupeň presnosti, špecifickosti na detekciu neprítomnosti alebo prítomnosti vírusovej infekcie.

Podstata diagnózy

Aby sa uskutočnila PCR analýza na stanovenie vírusu hepatitídy C od pacienta, odoberie sa venózna krv, ktorá potenciálne obsahuje HCV (ribonukleová kyselina) požadovaného vírusu.

Test PCR na hepatitídu C zahŕňa postup pridania do krvných častíc pacienta:

• priméry (krátke umelo syntetizované oblasti potrebného génu);
• špeciálny enzým (RNA polymeráza).

Po odbere vzoriek sa biologický materiál posiela na výskum do laboratória. Jedna časť krvi je potrebná na priamu PCR analýzu, druhá na testovanie pomocou ELISA. Enzým je schopný v krátkom čase zvýšiť počet genetického materiálu vírusu patogénu. V špeciálnom zariadení sa vykonáva niekoľko cyklov tepelných a chladiacich procesov. V poslednom štádiu sa získaný materiál porovná s génmi vírusu a urobí sa záver o prítomnosti alebo neprítomnosti patológie v tele pacienta.

Podstata a priebeh PCR analýzy v laboratóriu. Natočené SiberianMedicalLaboratory.

Typy výskumu

Existujú 3 typy diagnostiky, ktoré umožňujú určiť prítomnosť vírusu hepatitídy C v ľudskom tele:

• genotypu;
• kvalita;
• kvantitatívne.

Kvalitatívna metóda

Diagnóza hepatitídy C s kvalitatívnou metódou je použiteľná u pacientov, u ktorých sa v krvnom teste detegujú protilátky proti vírusu. V prípade prítomnosti akútnej fázy HCV RNA takéto diagnostické opatrenia môžu určiť prítomnosť ochorenia v priebehu 1-2 týždňov po infekcii. Počas tohto obdobia sa ešte nemusia vyvinúť protilátky proti hepatitíde C.

Kvantitatívna metóda

Na stanovenie koncentrácie vírusu vo vzorkách krvi sa používa kvantitatívna diagnostická metóda. Takýto test na virémiu (stupeň koncentrácie) umožňuje presne určiť počet jednotiek vírusovej RNA. Konečný výsledok je vyjadrený v príslušnom objeme. Ak hovoríme o kvantitatívnej analýze, potom sa indikátory merajú v 1 ml (1 m 3).

Parameter vírusovej záťaže znamená úroveň infekčnosti ochorenia, to znamená, že odráža stupeň "infekčnosti" pacienta. V praxi to znamená, že čím vyššia je koncentrácia vírusu v krvi, tým väčšia je šanca pre pacienta infikovať iných hepatitídou C. Kvantitatívna výskumná metóda vám tiež umožňuje stanoviť kvalitu a účinnosť liečby.

genotypu

Genotypizácia odhalila mutácie pôvodcu ochorenia. Pred predpísaním plánu liečby sa stanoví genotyp vírusu: závisí od neho kvalita a trvanie liečby. Napríklad pri liečení ochorenia typu I je účinnosť 60%, v prípade typu II, typu III - približne 80%.

Výhody analýzy hepatitídy PCR

Medzi hlavné výhody postupu patrí:

1. Možnosť včasnej diagnostiky. PCR analýza je schopná detekovať prítomnosť vírusu v skorých štádiách infekcie.
2. Nízke výsledky chýb. Študovaný biologický zdroj vám umožňuje diagnostikovať časť genetického materiálu, ktorá je charakteristická len pre jeden typ vírusovej infekcie. Táto okolnosť umožňuje zabrániť falošným diagnostickým výsledkom.
3. Vysoká citlivosť. PCR analýza je schopná detekovať RNA vírusu v malých množstvách, čo tiež umožňuje sledovať latentné infekcie v čase.

Indikácie pre

Testovanie na PCR na hepatitídu C je nevyhnutné, ak je k dispozícii:

• kontakt s chorými ľuďmi, čo by mohlo viesť k infekcii;
• príznaky cirhózy pečene (zväčšenie sleziny, nezvyčajné zmeny veľkosti pečene, detekcia venózneho plexu na bruchu pod kožou);
• pozitívne výsledky ELISA;
• zvýšená aktivita AST a ALT (prejavuje sa biochemickou analýzou krvi);
• potreba kontroly správania antivírusovej terapie;
• počiatočné štádium liečby pre potrebu stanoviť vírusovú záťaž;
• vykonanie poslednej fázy terapie na vylúčenie možných opakovaní;
• pacient má hepatitídu B na vylúčenie vzniku zmiešaného poškodenia pečene.

Ako sa pripraviť na darovanie krvi pre výskum PCR

Príprava na PCR analýzu zahŕňa nasledujúce odporúčania:

• krv sa odoberá ráno;
• analýza sa vykonáva na lačný žalúdok, preto sa odporúča prestávka medzi posledným príjmom potravy 8 až 10 hodín;
• niekoľko dní pred diagnózou by mali byť vylúčené mastné, korenené a vyprážané potraviny, alkoholické nápoje a fajčenie;
• jeden deň pred analýzou sa treba zdržať ťažkej fyzickej námahy, vylúčiť triedy v telocvični alebo bazéne.

Výsledky analýzy: normy a odchýlky

Samotná analýza nie je dlhodobá a vysoko kvalifikovaný špecialista na hepatológ alebo infekčné ochorenie dešifruje výsledky PCR na hepatitídu C. Na základe výsledkov analýzy je pacient diagnostikovaný.

S cieľom správne dešifrovať výsledky prieskumu sa zohľadňujú tieto ukazovatele: t

• biochemická analýza krvi;
• ultrazvukové dáta;
• výsledky biopsie.

Interpretácia kvantitatívnej analýzy

Pri získavaní výsledkov kvantitatívnej analýzy PCR sa zohľadňujú tieto ukazovatele: t

Pro analýza PCR pre vírus hepatitídy C

Hepatitída C je závažné ochorenie pečene pre každú osobu. Patológia je spôsobená flavivírusom HCV v štruktúre molekuly RNA, ktorá nesie všeobecný genetický kód vírusu.

Patológia môže byť rôznych foriem, všetko priamo závisí od všeobecného stavu osoby a od vlastností každého jednotlivého organizmu.

Táto štruktúra umožňuje analyzovať PCR na prítomnosť vírusu kategórie hepatitídy C v tele.

To vám umožní včas identifikovať vírus, ktorý je nebezpečný pre ľudí, podstúpiť liečbu drogovej závislosti a obnoviť zdravie, chrániť telo pred zničením pečene.

Vírus HCV sa môže prejaviť ako v akútnej, tak aj v nebezpečnej forme a chronicky. Ak sa zistí, že sa tento vírus vyskytol v jednej alebo inej chvíli, musí sa priradiť k analýze PCR.

Prečo sa vykonáva analýza PCR?

Na základe výsledkov analýzy bude lekár schopný zostaviť liečebný režim.

Laboratórna lekárska analýza PCR pre hepatitídu C je štúdia biologického materiálu odobratého na stanovenie flavavírusu. Štúdia predstavuje polymerázovú reťazovú reakciu.

Ukazuje celkovú kvantitatívnu hodnotu vírusovej lézie, jej kvalitatívne vlastnosti a je tiež možné určiť genotyp vírusu, ktorý obsahuje RNA.

Je to dôležité! Na základe tejto analýzy lekár určí spôsob, typ terapie a jej trvanie. Prostredníctvom analýzy je tiež možné určiť celkový epidemiologický faktor, teda úroveň rizika prenosu ochorenia na iných nosičov.

Analýza v modernej medicíne sa tiež nazýva analýza RNA. Dôvodom je to, že pre flavavírus hepatitídy C je zložená z častice RNA, ktorej veľkosť je približne 30-60 nm. Jedným z charakteristických znakov tohto vírusu je určitá tendencia k mutácii.

Každý prítomný poddruh alebo genotyp má rôzne rezistencie. Táto okolnosť sa stáva základom pre rôzne metódy výskumu a liečby ochorenia, ako aj ďalšiu prognózu s dobre vykonanou liečbou.

Ako

Analýza sa vykonáva striktne na prázdny žalúdok, to znamená, že žilová krv sa podáva pred raňajkami. Testovacia metóda sa vykonáva pomocou Real-Time PCR alebo vysoko citlivou diagnostikou moderných štandardov, ktorá sa vykonáva v reálnom čase.

Dolná hranica detekcie je v tomto prípade 15 IU / ml. Analýza sa vykonáva striktne s použitím uzavretých automatizovaných systémov. Hepatitídu C je možné stanoviť pomocou testov, ako je COBAS AMPLICOR s celkovou úrovňou citlivosti 50-100 IU / ml.

Je to dôležité! Všetky typy podobného moderného laboratórneho výskumu sa vykonávajú na základe zohľadnenia určitej hranice citlivosti.

Hovoríme o schopnosti činidla použitého na detekciu minimálnej úrovne schopnosti činidla určiť vírus v biologickom materiáli, ktorý je predmetom štúdie. Ak v tele nie je choroba, výsledok štúdie bude vyzerať ako „nenájdený“.

Na obrázku je znázornený obvod analýzy PCR:

Typy PCR analýzy a jej výsledky

Ak máte najviac drobných ochorení a bolesti v oblasti cookies, mali by ste okamžite konzultovať s lekárom, ktorý vykoná dôkladnú štúdiu. PCR analýza hepatitídy C je založená na troch hlavných bodoch:

1. Kvantitatívna analýza.
2. Kvalitatívna analýza.
3. Genotypizácia.

Vykonané testy poskytujú príležitosť na určenie a identifikáciu presnej povahy virémie a rôznych symptómov genetického plánu prítomnosti patogénu. V priamom pomere k citlivosti z vykonaného diagnostického systému sa môže lekársky výskum vykonať raz, ako aj určité potvrdenie.

Toto by sa malo vykonať s cieľom objasniť skôr získané výsledky a v tomto prípade sa používa citlivejším činidlom.

Vysoko kvalitná PCR

Kvalitatívna analýza pre PCR je ďalší názov pre štúdiu, ako je polymerázová reťazová reakcia. So štandardnou citlivosťou testu, ktorá umožňuje stanoviť prítomnosť vírusového mikróbu, budú indikátory v rozsahu 10-500 IU / ml.

Pri negatívnej analýze ochorenia bude analýza ukázať, že celková hladina koncentrácie v krvi pacienta bude rádovo nižšia ako všeobecná prahová hodnota citlivosti pre diagnostický systém.

Ak sa počas kvalitnej PCR získala odpoveď „nedetekovaná“, na následnú liečbu budete potrebovať poznať prah celkovej citlivosti činidla. Čo sa týka pozitívnej odozvy, počas analýzy PCR sa môže získať už štvrtý deň po infekcii. Štandardné proteínové frakcie k etablovaným flavavirom sa môžu objaviť oveľa neskôr.

Všeobecnú schému analýzy PCR je možné znázorniť nasledovne:

Kvantitatívna PCR

Kvantitatívna PCR je špeciálnym indikátorom vytvorenej vírusovej záťaže, čo odráža celkovú úroveň koncentrácie vírusovej RNA v ľudskom tele. Tento indikátor ukazuje množstvo vírusových RNA enzýmov, ktoré sú prítomné na kubický centimeter odobratý z krvnej žily.

Výsledky tejto štúdie v systéme medicínskeho výskumu sa označujú v jednotkách mililitra. Pri certifikátoch vydaných v rukách môže tento indikátor vyzerať ako 1,7 milióna alebo 1,700 000 IU / ml.

Pred uskutočnením protivírusovej terapie je týmto pacientom pridelená kvantitatívna PCR analýza. Druhýkrát sa koná 12. týždeň liečby, ktorý umožňuje správne vyhodnotiť výsledky liečby hepatitídou C. Inými slovami, analýza umožňuje určiť také dôležité parametre ako:

1. Určuje sa úroveň infektivity, to znamená stupeň rizika prenosu mikrobiálnych látok z infikovanej osoby na zdravého človeka. Čím vyššia je koncentrácia flavavírusovej RNA, tým vyššia je pravdepodobnosť infekcie inej osoby, čo je dôležité v sexuálnych vzťahoch.
2. Celková úroveň účinnosti a zvolený spôsob liečby.
3. Je to ideálna príležitosť na stanovenie trvania a prognózy antivírusovej terapie. Čím vyššie je zaťaženie, tým dlhšie bude ošetrenie trvať.

Stojí za to vedieť, že kvantitatívna PCR závisí od špecifického typu laboratórneho testu a prahu citlivosti. Najnižším limitom stanovenej normy je, že ukazovateľ nedosahuje 600 000 IU / ml.

Priemer je v rozmedzí 600 000 až 700 000 IU / ml. Ak boli výsledky získané nad 800 000 IU / ml, lekár okamžite zistí vysokú úroveň koncentrácie látky, ako je RNA, s vírusom prítomným v kompozícii.

Je to dôležité! Priamy vzťah medzi hladinou HCV RNA a závažnosťou ochorenia naznačuje, že tento vírus je prítomný v celkovom zložení krvi a tiež berie na vedomie komplexnosť patológie. Pacient môže mať dostatočne vysokú vírusovú záťaž. Okrem toho tento vzťah naznačuje, že dochádza k vážnemu poškodeniu buniek.

genotypu

Vzhľadom na relatívne vysokú mutačnú aktivitu HCV v prírode, v priebehu uskutočňovaného testovania, je možné určiť, ako je typ vírusu prítomný v krvi chorej osoby. V modernej medicíne je známych 11 genotypov vírusu, ako je napríklad hepatitída C. Zahŕňa pomerne veľký počet rôznych poddruhov alebo podtypov.

Typy 1, 2 a 3 sú známe a bežné v Rusku, genotypovanie je vo všeobecnosti veľmi dôležitým prvkom vykonanej analýzy. S ním lekár chápe úroveň rezistencie alebo rezistencie patológie voči vybraným liekom.

Takmer vždy, na základe tejto analýzy, sa buduje budúca liečba. Je to dôležité, pretože existujú pravidlá liečby, ako napríklad:

PCR analýza pre hepatitídu C

V 80% prípadov sa hepatitída C pohybuje od akútnej k chronickej. Replikácia patogénnych vírusov vo funkčných pečeňových bunkách vedie k dysfunkcii orgánov. Je to spôsobené tým, že parenchymálne tkanivo je nahradené spojivom. V dôsledku toho je anamnéza pacienta doplnená krvácaním v gastrointestinálnom trakte, intoxikáciou tela, problémami so zrážaním krvi. Preto sú skoršie patologické zmeny diagnostikované, tým väčšia je šanca pacienta na zotavenie. PCR analýza hepatitídy C je považovaná za najpresnejšiu metódu výskumu.

Táto diagnostická metóda sa môže vykonať niekoľko dní po infekcii. Polymerázová reťazová reakcia môže spoľahlivo určiť genotyp a koncentráciu vírusu v krvi. Na vykonanie analýzy sa pacientovi odoberie biologický materiál, v ktorom môže byť prítomná kauzálna RNA.

PCR pre hepatitídu C sa vykonáva v troch štádiách:

• Kvalitatívna analýza - použitie na určenie genetického materiálu patogénu.
• Kvantitatívny výskum - teda odhalenie vírusovej záťaže.
• Genotypizácia - v tejto fáze lekár rozpozná typ ochorenia.

Táto technika bola vyvinutá asi pred 30 rokmi. Používa sa na diagnostiku mnohých infekčných ochorení. PCR umožňuje odhaliť jedinečný genetický materiál. Na tento účel použite priméry. Takzvané krátke vlákna RNA, ktoré sú pripojené na začiatok génu.

V dôsledku toho sa počet fragmentov vírusu patogénov násobí. Každá fáza vyžaduje špeciálny teplotný režim a určitú dobu. Molekula DNA sa vytvorí v priebehu 3 minút. Amplifikácia zahŕňa asi 30 cyklov. PCR sa vykonáva v laboratóriu prostredníctvom špeciálneho zariadenia.

Označenia na vymenovanie

Analýza PCR môže byť spôsobená prítomnosťou klinických príznakov hepatitídy C. Tento postup je určený pre ľudí, ktorí:

• kontaktoval infikovanú osobu;
• trpia akútnym a chronickým ochorením pečene;
• liečených na patologické zmeny v parenchymálnom tkanive;
• sú ohrození;
• sú darcami krvi a jej zložiek.

PCR sa vykonáva nielen s hepatitídou C. Analýza sa používa v medicíne, biológii, forenznej praxi. Stanovenie špecifických ukazovateľov - stupeň potrebný na výber liekových schém.

Výhody analýzy

V schéme diagnostického vyšetrenia zahŕňajú imunofluorescenčnú analýzu a PCR. Pomocou prvého môžete určiť koncentráciu imunoglobulínov. Tieto látky vznikajú ochranným mechanizmom po vstupe patogénnych vírusov do tela. Na rozdiel od PCR nie je ELISA účinná počas inkubačnej doby. Pomocou polymerázovej reťazovej reakcie je možné zistiť hepatitídu C počas prvých 7 dní po infekcii.

Táto klinická štúdia má tieto charakteristiky:

• Minimálna pravdepodobnosť falošného výsledku.
• Vysoká účinnosť.
• Špecifickosť.
• Citlivosť.
• Univerzálnosť.
• Automatizovať proces.
• Bezpečnosť.
• Miera získavania ukazovateľov.

Jedinou nevýhodou PCR je jej technická zložitosť. To je spôsobené tým, že lekár musí zvoliť správne zloženie nukleotidov, ktorých funkciou je syntéza DNA. Vzhľadom na zvýšenú citlivosť metódy je možné získať falošne pozitívne alebo falošne negatívne výsledky.

Na dosiahnutie presnosti významných ukazovateľov je biologický materiál dôkladne očistený od liečiv a proteínových zlúčenín. Na potvrdenie výsledku sa vyžaduje porovnanie predtým testovaných vzoriek. Medzi faktory, ktoré spôsobujú chybu, patria:

Porušenie analýzy vzorkovacej techniky

• Porušenie techniky analýzy.
• Zmeny v sekvencii fragmentov RNA.
• Koincidencia syntetizovaných nukleotidov a génov patogénnych vírusov.

Pravdepodobnosť získania falošného výsledku v hepatitíde C je prítomná v dôsledku nemožnosti určiť genetický základ ochorenia. PCR diagnostika môže priamo identifikovať patogén. Použitím amplifikácie DNA sa detegujú patogény v potrave, vode a pôde.

Obmedzenia tejto metódy neznižujú jej účinnosť a popularitu. Klinický výskum sa vykonáva pravidelne. Lekár tak môže vyhodnotiť účinnosť prijatých liečebných opatrení. Potreba tohto je spôsobená tým, že vírus hepatitídy C je schopný mutovať. Neprítomnosť pozitívneho účinku znamená prispôsobenie vírusu použitým liekom.

Príprava na dodanie

Na uskutočnenie polymerázovej reťazovej reakcie u pacienta trpiaceho hepatitídou C sa odoberá venózna krv. Zvyčajne sú na štúdium potrebné dve dávky biologického materiálu. Prostredníctvom jednej sa PCR vykoná priamo a druhá sa odošle na imunotest.

Krv na analýzu PCR z žily

Príprava je dôležitá. Pacient daruje krv na PCR ráno nalačno. Niekoľko dní pred zákrokom bude musieť opustiť škodlivé potraviny, alkohol, nikotín a drogy. Pacient by sa mal vyhnúť sexuálnemu kontaktu, nadmernému fyzickému a emocionálnemu stresu. Bazén a posilňovňa sú zakázané. V každom prípade bude potrebné pripraviť sa.

Existujú špecifické indikácie týkajúce sa liečiv. Týka sa to antibiotík a antidepresív. Ženy, ktoré začali menštruovať, by mali oddialiť testovanie na hepatitídu C. Kolposkopia je tiež dôvodom odmietnutia postupu.

Uvedené pravidlá sú veľmi jednoduché. Vďaka nim môžete dosiahnuť maximálnu spoľahlivosť tejto diagnostickej metódy. Dešifrovanie výsledkov musí odborník. Je nepravdepodobné, že by ich interpretácia u pacienta bola úspešná.

Proces analýzy

PCR diagnostika je nasledovná:

Krv sa umiestni do termostatu.

• Najprv si vezmite biologický materiál. Krv sa umiestni do sterilizovaných zariadení. Požadovaný objem nepresahuje 1 - 1,5 ml. Uchovávajte krv a jej zložky maximálne 24 hodín. Teplota skladovania by nemala prekročiť 4 stupne Celzia.
• Po začatí klinickej štúdie. Pripravená krv sa umiestni do termostatu spolu s amplifikačnou zmesou. Zvyčajne nevyžaduje viac ako 25 ml špeciálneho zloženia. Amplifikácia sa vykonáva automaticky niekoľko hodín.
• Súčasne vykonajte kontrolné skúšky. Na tento účel použite biologické materiály odobrané od zdravého človeka. To pomôže vyhnúť sa falošným výsledkom.
• Dekódovanie a registrácia ukazovateľov. Genetický materiál sa deteguje pomocou etídiumbromidu. Vzhľadom na špecifický účinok sú fragmenty DNA zvýraznené. Prítomnosť (neprítomnosť) vírusu sa zistí zameraním na tieto tabuľky.

Výsledky dekódovania

Hodnotu týchto ukazovateľov môže určiť len špecialista na infekčné ochorenia a hepatológ. PCR analýza sa podáva diagnostickým komplexom spolu s biochemickými krvnými testami, ultrazvukom, ELISA a biopsiou. Diagnóza sa vykonáva na základe všetkých výsledkov. Postup dekódovania testov závisí od štádia diagnostického vyšetrenia.

V prvom štádiu PCR je pozitívnym výsledkom testu detekcia fragmentov DNA patogénneho vírusu. Pri vykonávaní kvantitatívnej analýzy určte úroveň vírusovej záťaže. Môže byť nízka (menej ako 8 x 10 5 IU / ml), médium (od 8 x 10 ^ 5 IU / ml), vysoké (viac ako 2,4 x 10 7 IU / ml). Neprítomnosť špecifických protilátok a častíc vírusovej RNA sa považuje za normu (negatívny výsledok). V štádiu genotypizácie je infekcia infekciou indikovaná RNA určitého genotypu.

Po prijatí pozitívneho výsledku je pacientovi predpísaný účinný terapeutický režim. Zároveň sa musia zohľadniť informácie o prítomnosti vírusu v krvi, stupni jeho aktivity a genotype. Cena procedúry závisí od spôsobu testovania, typu biologického materiálu. Náklady na odber krvi alebo iných tekutín sa môžu pripočítať k celkovým nákladom. Toto je spôsobené tým, že patogén sa často nachádza v moči, výkaloch a spermiách.