Dostupnosť moderných liekov proti hepatitíde B (HBV) s jasnými indikáciami na ich podávanie si vyžaduje presné a rýchle overenie diagnózy. Kvôli nedostatočným klinickým údajom v prvých týždňoch ochorenia a obmedzeným analytickým metódam imunotestu sa však rýchlosť diagnózy znižuje.
Prítomnosť markerov anti-HBc IgM, HBsAg, anti-HBc, HBeAg, anti-HBe vám umožňuje potvrdiť HBV alebo stanoviť skutočnosť predchádzajúceho ochorenia. Je však možné určiť prítomnosť aktívnych vírusových častíc v krvi a ich počet v čase štúdie pomocou PCR - kvantitatívny real-time test na detekciu hepatitídy B. Metóda, v porovnaní s diagnostickými metódami ELISA, rieši diagnostické problémy a umožňuje predpovedať priebeh ochorenia počas prijímania. antivírusové lieky.
Základy diagnostiky chorôb
Diagnóza hepatitídy B je založená na hodnotení klinických prejavov, enzýmových imunotestov a inštrumentálnych metód výskumu. Ochorenie prebieha v akútnej fáze po inkubačnej dobe a v závislosti od dávky infekcie a účinnosti liečby vstupuje do chronického štádia. Hlavným cieľom liečby je zabrániť chronizácii, to znamená eliminácii všetkých vírusových častíc z krvi. Klinický priebeh ochorenia je liek bez následnej virémie.
Skutočnosť eliminácie infekcie sa musí preukázať kvantitatívnou metódou výskumu.
Keďže akýkoľvek kvalitatívny enzýmový imunoanalýzu umožňuje diagnostikovať HBV nepriamo, to znamená, že nevykazuje prítomnosť patogénu vo vnútornom prostredí tela, ale charakterizuje imunitnú reakciu na infekciu, sledovanie účinnosti liečby a fakt, že liečba sa ťažko dokazuje. Preto by mal byť pacient s hepatitídou B alebo s prítomnosťou diagnostických kritérií v jeho prospech vykonaný polymerázovou reťazovou reakciou, aby sa kvantifikoval počet vírusových častíc v krvi. Diagnostická frekvencia je nedostatok kópií DNA infekcie.
Opis diagnostickej metódy
Vysoko citlivá metóda PCR diagnostiky hepatitídy B patrí do kategórie geneticky modifikovaných molekulárno-biologických štúdií. Cez to je určené množstvom vírusovej DNA v biologickom materiále pacienta a prípustnou rýchlosťou. Podľa získaných výsledkov sa stanoví počet vírusových častíc na jednotku objemu. Materiál pre diagnostický test je venózna krv pacienta. Príjem je žiaduci na prázdny žalúdok kvôli možnému účinku chyle séra na výsledok štúdie.
Získané výsledky musia byť poskytnuté lekárovi na interpretáciu a určenie ďalšej taktiky. Nezávislé dekódovanie nepredstavuje diagnostickú hodnotu.
Významnosť výsledku počtu vírusových častíc získaných metódou PCR presahuje hodnotu enzýmových imunotestov. Keďže analýza v reálnom čase ukazuje prítomnosť pôvodcu ochorenia v krvi, jeho informačný obsah je vyšší ako ostatné. Ak ELISA indikuje iba prítomnosť protilátok, ktoré sú pozorované od 4 týždňov inkubačnej doby a trvajú viac ako 8 týždňov po eliminácii vírusu z krvi, potom polymerázová reťazová reakcia jasne potvrdzuje aktívny priebeh ochorenia alebo jeho vyliečenie, charakterizuje dynamiku predpísanej liečby.
Polymerázová reťazová reakcia s kvantitatívnym stanovením častíc patogénov rieši diagnostické otázky v prospech zastavenia liečby z dôvodu zotavenia alebo pokračujúcej liečby z dôvodu jej nedostatočnej účinnosti. Metóda je pre vírus HBV čo najšpecifickejšia a vyznačuje sa prijateľnou chybou.
Indikácie a výkonnostné ciele
Kvantitatívna analýza hepatitídy B je najspoľahlivejšia a umožňuje potvrdiť údaje získané metódami ELISA. Je menovaný, keď:
- získanie pozitívneho diagnostického výsledku ELISA;
- liečenie pacienta so stanovenou diagnózou poškodenia vírusovej pečene;
- pri diagnostike zmiešanej etiológie hepatitídy;
- v prípade potreby stanovte vírusovú záťaž u pacienta.
Pretože enzýmová imunoanalytická metóda sa v praxi špecialistu na infekčné ochorenia používa vo väčšej miere, niektorí pacienti s miernym ochorením sa môžu liečiť bez toho, aby museli počítať vírusovú záťaž. Ale PCR je všeobecne považovaná za „zlatý štandard“ diagnostiky v hepatológii, pretože kvôli jedinečnosti jej výsledku odstraňuje množstvo organizačných problémov. Preto má smerovanie pacienta na kvantitatívnu analýzu tieto ciele:
- získanie údajov o počte vírusových častíc v krvi pacienta;
- potvrdenie akútneho priebehu hepatitídy a včasné overenie chronického ochorenia;
- nepretržitá detekcia latentných vírusových nosičov s pozitívnymi testami ELISA, monitorovanie ich virémie;
- rozhodovaní o vymenovaní antivírusovej liečby, jej kombinácii a ukončení.
Najdôležitejším cieľom aplikácie kvantitatívneho PCR testu na detekciu HBV je identifikovať možné kombinácie liečby. V prípadoch vysokej vírusovej záťaže poskytuje výsledok analýzy špecialistovi možnosť pokračovať v kombinácii liekov. Počas liečby je ľahké určiť účinnosť predpísanej farmakologickej liečby na základe výsledkov PCR. Vzhľadom na to, že sa riadi iba údajmi imunofermentálnych metód, nie je možné včas určiť skutočnosť liečby a jej aktuálnu účinnosť. Kvantitatívny test v reálnom čase je preto nevyhnutnou analýzou pred začatím liečby akútnej hepatitídy, latentnej vírusovej infekcie s vysokou virémiou a chronickou HBV.
Interpretácia výsledkov kvantitatívnych testov PCR
Výklad výsledkov kvantitatívneho testu PCR by mal vykonať ošetrujúci lekár pacienta. Je potrebné vyhodnotiť diagnostický indikátor a určiť terapeutickú taktiku.
Štandardný analyzátor je schopný produkovať kvantitatívny indikátor, ktorý odráža počet kópií vírusovej DNA prítomnej v študovanej žilovej krvi. Merné jednotky - kópie / ml, IU / ml (kópie na mililiter, medzinárodné jednotky na mililiter). Interpretácia výsledkov je uvedená v tabuľke s uvedením rôznych jednotiek merania.
Podstata analýzy PCR pre hepatitídu B a jej výsledky
Vírusová hepatitída B sa úspešne lieči, ak je včas detegovaná a počet protilátok a antigénov v krvi pacienta je správne stanovený. Pomocou enzýmového imunotestu na hepatitídu je možné detegovať prítomnosť vírusových markerov, ale nemôžu určiť presný stupeň procesu.
Na kvantitatívne hodnotenie sa použila PCR diagnostika. Pomocou testu je možné pomocou antivírusových liekov spočítať počet markerov, predpovedať priebeh ochorenia a pravdepodobnosť vyliečenia.
Hlavnou výhodou štúdie je schopnosť detegovať aj minimálne koncentrácie vírusu, identifikovať patogén v štádiu druhu.
Diagnóza hepatitídy B
Vírus hepatitídy B je vysoko nákazlivý a odolný voči vonkajším vplyvom. Zostáva aktívny v krvi pacienta niekoľko týždňov. Preto je každá osoba vystavená riziku infekcie, aj keď je pozorovaná profylaxia.
Ak chcete diagnostikovať ochorenie, predpíšte nasledujúce štúdie:
Podstata metódy PCR
Americký chemik K.Mullis dostal Nobelovu cenu a jeho diagnostická metóda sa stále používa.
Predchodca PCR metódy (polymerázová reťazová reakcia) je považovaný za vedca z Nórska H. Kleppe. Najprv začal vykonávať amplifikáciu (regeneráciu) DNA s použitím krátkeho reťazca DNA, to znamená syntetického priméru (druh kópie).
Vedec si však svoju myšlienku neuvedomil. Podobné štúdie vykonal americký chemik K.Mullis, ktorý v roku 1993 získal Nobelovu cenu za svoj vynález. Odvtedy bola PCR použitá na stanovenie otcovstva, diagnostikovanie genetických ochorení a detekciu vírusov.
Podstatou reakcie je, že pomocou enzýmov sa skopíruje určitá časť DNA. Môžete kopírovať iba oblasť, ktorá zodpovedá zadaným parametrom a ak je v predloženej vzorke. Na začatie reakcie sa používajú nasledujúce zložky:
- Matrix DNA s miestom, ktoré sa má kopírovať.
- Priméry podobné štruktúre ako DNA.
- Polymeráza, to znamená enzým, ktorý spúšťa reakciu. Mala by byť termostabilná, to znamená, aby odolala teplotným extrémom.
- Roztok s určitými parametrami, zabezpečujúci priechod reakcie.
Reakcia sa uskutočňuje v niekoľkých stupňoch:
Na detekciu hepatitídy B sa používajú dva typy reakcií: kvantitatívne a kvalitatívne.
Kvantitatívna PCR
Kvantitatívna metóda určuje množstvo genómu HBV
Kvantitatívna PCR zahŕňa simultánnu tvorbu kópií fragmentov DNA a stanovenie počtu molekúl. Meranie sa vykonáva po každom stupni, to znamená v reálnom čase. To sa dosahuje použitím fluorescenčných sond, ktoré sú obsiahnuté v reťazci molekúl a žiarenia v určitom období štúdie.
Táto metóda sa používa na detekciu fragmentov DNA, ktoré sú markermi vírusu hepatitídy. Pomocou kvantitatívnej metódy je možné presne izolovať genotyp vírusu. Inými slovami, vypočíta sa počet kópií genómu HBV na počet buniek pacienta.
Kvantitatívna analýza poskytuje odpovede na nasledujúce otázky:
- S akou intenzitou choroba postupuje.
- Ako účinná je liečba.
- Vyvinula sa rezistencia voči liekom?
Kvantitatívne meranie je tiež nevyhnutné pre diagnostiku chronického štádia infekcie. Ak je množstvo DNA nižšie ako 100 ks / ml na normálnej úrovni transaminázy, potom je osoba nositeľom vírusu.
V akútnej fáze je množstvo protilátok omnoho vyššie, pri antivírusovej terapii zvýšenie počtu protilátok indikuje vývoj rezistencie na liečivo, čo je signál na úpravu liečby.
Vysoko kvalitná PCR
Vysoko kvalitná PCR poskytuje menej informácií, ale dokáže eliminovať infekciu.
Vysoko kvalitná PCR môže iba potvrdiť prítomnosť patogénu v krvi. Ak sú neprítomní, pacient nie je infikovaný, ak patogén vstúpi do krvi, výsledok bude pozitívny.
S pomocou kvalitatívnej reakcie však nie je možné objasniť genóm vírusu, štádium ochorenia. Preto pre diagnózu HBV vykonali kvantitatívne aj kvalitatívne merania.
Príprava na prieskum
Na analýzu PCR sa vyžaduje venózna krv. To sa musí urobiť ráno nalačno.
Pacient by sa mal na štúdiu riadne pripraviť:
- Na 10 hodín odmietnuť jedlo, môžete piť len čistú vodu.
- V predvečer prestať užívať alkohol, po dobu 4 hodín nefajčiť.
- Pred vyšetrením sa treba vyvarovať fyzického a emocionálneho stresu.
- Ak to nie je možné, prestaňte užívať lieky počas 2 dní, je potrebné informovať laboratórneho technika. Niektoré lieky majú vplyv na konečný výsledok.
Interpretácia údajov
V kvantitatívnej reakcii sa získané indikátory hodnotia v závislosti od počtu kópií DNA.
Je ľahké interpretovať údaje merania kvality. On dáva buď pozitívnu alebo negatívnu odpoveď.
V kvantitatívnej reakcii je možné vyhodnotiť získané indikátory v závislosti od počtu kópií DNA. Mernou jednotkou sú kópie / ml.
Dáta sa dekódujú nasledovne:
- Ak je množstvo DNA HBV menšie ako 90, potom infekcia chýba. U pacienta sa vyvinula imunita po očkovaní alebo sa vyliečil z choroby.
- Keď sa počet kópií 2x100 hovorí o nosiči vírusu.
- Počet 2x106 označuje chronické štádium ochorenia.
- S DNA viac ako 2x109 má pacient akútne štádium hepatitídy.
Chybné výsledky
Výhody diagnostickej metódy pri použití polymerázových reakcií sú nasledovné: t
- Priama detekcia patogénov. Naproti tomu test ELISA poskytuje informácie o prítomnosti protilátok proti vírusu.
- Špecifickosť. To znamená, že je to DNA oblasť, ktorá je prítomná vo vzorke biomateriálu, ktorá sa kopíruje.
- Precitlivenosť. Spôsob môže dokonca detekovať fragmenty jednotlivých buniek.
- Diagnostika chorôb v akútnom a latentnom štádiu. To znamená, že ochorenie je možné diagnostikovať v štádiu predklinických prejavov.
Metóda má nedostatky, ktoré vedú k falošným výsledkom. Najvýznamnejšou nevýhodou je pravdepodobnosť kontaminácie materiálu. Hlavným zdrojom kontaminácie sú zle spracované skúmavky, laboratórne ruky, reagencie.
Časť DNA z predchádzajúcej reakcie môže vstúpiť do krvi. Preto sa na laboratóriá kladú zvýšené hygienické požiadavky: oddelené miestnosti, plastové rúrky, ultrafialové spracovanie laboratórií atď.
Falošne negatívne výsledky môžu byť spôsobené zníženou citlivosťou reakcie. To sa deje v nasledujúcich situáciách:
- pacient užíva lieky, napríklad antikoagulanciá;
- osoba bola pred analýzou vystavená fyzickému stresu (šport, tvrdá práca);
- nedávno sa vyskytla infekcia.
Ak má pacient vysokú pravdepodobnosť infekcie a výsledok štúdie je negatívny, musí byť znovu vyšetrený.
Pozri tiež:
záver
Metóda polymerázovej reťazovej reakcie je hlavnou a najviac informatívnou pre diagnostiku HBV. To umožňuje nielen stanoviť stav dopravcu infekcie, ale aj objasniť štádium ochorenia, vyhodnotiť výsledky liečby.
Pre presnejšiu diagnostiku sa používa kvalitatívne a kvantitatívne meranie. Nevýhodou metódy je pravdepodobnosť kontaminácie, znížená citlivosť a pomerne vysoká cena.
Aby boli výsledky čo najspoľahlivejšie, mali by sme sa riadne pripraviť na štúdiu a vykonávať ju na klinike s príslušnou licenciou a dobrou povesťou.
Rozlúštenie krvného testu na hepatitídu B
Hepatitída B je jednou z najnebezpečnejších chorôb našej doby.
Je spôsobená vírusom, ktorý vstúpi do tela, keď krv prichádza do styku s infikovaným biologickým materiálom, vrátane tých, ktoré zostávajú na manikúrových doplnkoch, lekárskych nástrojoch, tetovacích strojoch, ktoré neboli riadne dezinfikované. Vírus sa môže prenášať aj prostredníctvom sexuálneho kontaktu.
Hepatitída B sa analyzuje na diagnostikovanie ochorenia odberom krvi pacienta.
K infekcii dochádza prostredníctvom sexuálnych a domácich ciest, typom šírenia je hematogénna (krv). Keď je infikovaný, vírus vstupuje do hepatocytov (pečeňových buniek), ktoré sa produkujú v budúcnosti. Cez krvný obeh sa choroba rýchlo šíri po celom tele. Vírus B (HBV) sa vyznačuje vysokou odolnosťou voči účinkom teploty a kyseliny a je schopný udržať svoje škodlivé vlastnosti po dobu šiestich mesiacov.
Aké krvné testy máte na hepatitídu B?
Ak hepatitída B vykazovala prvé príznaky, je potrebné vykonať testy pred začiatkom liečby a liečby. Krvný test je spoľahlivý spôsob inštalácie infekcie hepatitídy. Vedené v laboratóriu. Testovací materiál pre hepatitídu B sa podáva nalačno: z posledného jedla by malo uplynúť minimálne 8 hodín.
Na zistenie vírusu hepatitídy B v krvi sa používajú testy troch typov, ktoré charakterizujú prítomnosť vírusu v krvi:
- analýza prítomnosti HBV DNA v materiáli študovaním polymerázovej reťazovej reakcie;
- kvalitatívna štúdia prítomnosti proteínu anti-HBc IgG a antigénu HBsAg (zistené u zdravých, infikovaných a chorých);
- analýza na detekciu proteínov HBeAg a anti-HBc IgM (charakterizovať zhoršenie ochorenia).
Pre úplnosť sa odporúča súčasne vykonávať výskum na niekoľkých markeroch.
Imunologické testy na hepatitídu B
Najbežnejšie testy na hepatitídu B sú imunologické. Ich podstatou je detekcia protilátok v krvi produkovaných telom alebo pečeňou. Vzorky sú kvalitatívne a kvantitatívne. Testy a transkripty hepatitídy B zvyčajne obsahujú informácie o niekoľkých charakteristických proteínoch. Počas testu sa testujú nasledujúce protilátky: t
Vyskytuje sa v skorých štádiách infekcie pred nástupom klinických príznakov.
Pozitívny marker indikuje prítomnosť vírusu, ale nachádza sa aj u zdravých ľudí. Ak je v krvi menej ako 0,05 IU / ml, výsledok sa považuje za negatívny. Ak je koncentrácia protilátky vyššia, analýza sa považuje za pozitívnu.
Nachádza sa prakticky u každého infikovaného pacienta. Udržiavanie ukazovateľov na vysokej úrovni môže naznačovať prechod ochorenia na chronickú formu kurzu. Pozitívny marker indikuje prítomnosť ochorenia v období exacerbácie, predĺženého zotavenia. HBeAg je mimoriadne zlé znamenie. Pacient je veľmi nákazlivý. Normálne nie je proteín detekovaný v krvi.
Existujú dva typy protilátok proti HBc: IgG a IgM. Prítomnosť IgM v krvi je známkou priebehu akútnej formy, vysokej infekčnosti pacienta a možnosti ochorenia pererohody v chronickej forme. Normálne nie je prítomnosť IgM povolená. IgG je priaznivým indikátorom. Marker označuje, že telo vytvára imunitu proti hepatitíde B.
Ak je v krvi detekovaný marker, je možné vyvodiť záver o priaznivom priebehu ochorenia a vytvorení ochrannej imunity u pacienta.
- Anti-HBs.
Marker signalizuje obnovu a tvorbu imunity.
Detekcia HBV DNA pomocou PCR
Na laboratórne vyšetrenie a detekciu prítomnosti diagnózy hepatitídy B v krvi sa používa metóda PCR. Spôsob polymerázovej reťazovej reakcie je najaktuálnejší v oblasti detekcie chorôb.
Konečné dekódovanie ukazuje, či existujú stopy génovej prítomnosti patogénu v pečeňových bunkách.
Ak sa počas výskumu budú dodržiavať všetky zásady, výsledok je úplne presný. Metóda sa používa na diagnostiku, používa sa v procese liečby av antivírusovej terapii.
- Vysoko kvalitná PCR na celkovom počte má len dva významy: „detegované“ a „nezistené“. Tento postup sa vykonáva pre každého pacienta s podozrením na hepatitídu. Pri priemernej citlivosti testu PCR v rozsahu od 10 do 500 IU / ml, pri nízkych hladinách vírusovej DNA v krvi, nebude detegovaný žiadny génový materiál.
- Kvantitatívna PCR. Na rozdiel od kvalitatívneho indikuje nielen hepatitídu B. Kvantitatívna analýza ukazuje, do akej miery je norma zdravého človeka v číselnom vyjadrení ďaleko od indikátorov pacienta. Metóda umožňuje vyhodnotiť štádium ochorenia a predpísať liečbu. Citlivosť testu PCR v kvantitatívnom sledovaní je vyššia ako pri kvalitatívnej metóde. Základom je počet zistených DNA, ktorý je vyjadrený v kópiách na mililiter alebo IU / ml.
Okrem toho kvantitatívna PCR poskytuje prehľad o účinkoch liečby a správnosti zvolenej terapie. V závislosti od množstva vírusového génového materiálu môže byť rozhodnuté o skrátení doby liečby alebo naopak o predĺženie a posilnenie.
Biochemický krvný test na hepatitídu B
Na získanie úplného klinického obrazu priebehu ochorenia je potrebná metóda biochemickej analýzy. Táto diagnostická metóda dáva pochopenie práce vnútorných orgánov (pečeň, obličky, žlčník, štítna žľaza a iné). Dekódovanie dáva pochopenie metabolizmu v tele, možných patológií metabolizmu. Podrobné ukazovatele poukazujú na nedostatok vitamínov, makroživín a minerálov potrebných pre ľudské zdravie a život.
Test na hepatitídu môžete vykonať v ktoromkoľvek inom diagnostickom centre (Invitro, Gemotest atď.). Biochemický krvný test na detekciu hepatitídy B zahŕňa nasledujúce zložky.
Kvantitatívna analýza enzýmu ALT (AlAt)
Tento enzým sa najčastejšie vyskytuje vo zvýšených koncentráciách pri akútnej a chronickej hepatitíde. Látka je obsiahnutá v pečeňových bunkách a s léziami orgánov cez krvný obeh vstupuje do krvných ciev.
Množstvo a koncentrácia v krvi počas vírusového ochorenia sa neustále mení, takže výskum sa vykonáva aspoň raz za štvrťrok. ALT odráža nielen aktivitu vírusu hepatitídy, ale aj stupeň poškodenia spôsobeného v pečeni. Hladina ALT sa zvyšuje so zvyšujúcim sa množstvom toxických látok pečeňového pôvodu av prítomnosti vírusu.
Kvantitatívna analýza AST-enzýmu
Proteín je súčasťou najdôležitejších orgánov človeka: pečene, nervového tkaniva, tkaniva obličiek, kostry a svalov. Enzým je zapojený do budovania najdôležitejších svalov - srdca. Vysoká AST u pacienta s hepatitídou B môže signalizovať fibrózu pečene. Podobná situácia nastáva, keď alkoholické, drogové alebo iné toxické poškodenie pečeňových buniek.
Indikátory prehriatia sú znakom poškodenia pečene na bunkovej úrovni. Pri stanovení diagnózy je potrebné vziať do úvahy pomer AST a ALT (de Rytisov koeficient). Súčasné zvýšenie koncentrácie oboch enzýmov je známkou nekrózy pečene.
bilirubín
Látka sa tvorí v slezine a pečeni v dôsledku rozpadu hemoglobínu v ich tkanivách. Táto zložka je súčasťou žlče. Existujú dve proteínové frakcie: priamy bilirubín (viazaný) a nepriamy bilirubín (voľný). Pri zvýšení hladiny bilirubínu v krvi má zmysel podozrenie na hepatitídu alebo iné poškodenie pečene. To priamo súvisí s cytolýzou pečeňových buniek.
Ak sa množstvo nepriameho bilirubínu zvýši, potom je s najväčšou pravdepodobnosťou lézia parenchymálneho tkaniva alebo Gilbertov syndróm. Vysoká hladina bilirubínu podľa výsledkov analýzy môže byť dôsledkom obštrukcie žlčových ciest. Keď je hladina bilirubínu viac ako 30 mikromolov na liter, pacient vykazuje ikterický odtieň kože, moč sa stmavne a biele oči menia svoju farbu.
bielkovina
Syntéza tohto proteínu sa vyskytuje v pečeni. Ak je jeho množstvo znížené, znamená to pokles syntézy enzýmov v tele v dôsledku výskytu závažných lézií pečeňových buniek.
Celkový proteín
Ak sa množstvo celkového proteínu stane výrazne nižším ako je prijatá norma, potom to znamená spomalenie fungovania pečene.
GGT (GGTP)
Enzým používaný na detekciu obštrukčnej žltačky a cholecystitídy. Zvýšenie hladiny GGT je signálom toxického poškodenia pečene. Môže byť vyvolaný chronickým alkoholizmom a nekontrolovaným užívaním drog. Proteín je obzvlášť citlivý na toxíny a alkohol, pod ich vplyvom rýchlo rastie jeho aktivita. Udržanie vysokej koncentrácie GGT v krvi po dlhú dobu hovorí o závažnom poškodení pečene.
kreatinínu
Je produktom metabolizmu proteínov, ktorý sa vyskytuje v pečeni. Prudký pokles úrovne je signálom, že orgán sa spomaľuje.
Proteínové frakcie
Zníženie hladiny proteínových frakcií je známkou patológie pečene.
Dekódovacia analýza pre hepatitídu B a hodnoty sú normálne
Diagnostika hepatitídy B je kumulatívna štúdia ukazovateľov. Len ich komplexná analýza umožňuje vyvodiť závery o infekcii pacienta. Zvážte dekódovaciu analýzu hepatitídy B. Pre porovnanie, rýchlosť látok v krvi.
Čo robí kvantitatívna analýza hepatitídy B pomocou PCR a normy štúdie
Hepatitída je zápalová patológia pečene, ku ktorej dochádza v dôsledku prenikania vírusov do orgánu alebo pôsobenia jedov, toxínov vedúcich k deštrukcii hepatocytov (funkčné bunky orgánu). V nezávažnej forme sa choroba vylieči sama. V závažných prípadoch vedie k závažným komplikáciám: fibróze, cirhóze alebo onkológii. Identifikuje sa päť typov vírusovej hepatitídy: A, B, C, D a E. Je možné pochopiť, či má osoba ochorenie av akej forme, podľa výsledkov špeciálnych štúdií.
Typy vírusov
Príčincami hepatitídy sú hepatotropné vírusy. Vstupujú do pečeňových buniek, integrujú sa do svojho genómu, narušujú štruktúru, vedú k nekróze tkaniva. V iných orgánoch málokedy zapustí korene. Vírusy nezničia pečeňovú bunku, ale ju použijú na reprodukciu.
Ľudská imunita rázne bojuje proti vírusom a snaží sa viesť k ich oslabeniu a zastaveniu reprodukcie. Čím silnejší je boj, tým viac hepatocytov zomrie. To vedie k rozvoju zápalu (hepatitída) a poškodeniu funkcie pečene.
S dobrou imunitou sa môže samotná pečeň zbaviť vírusu a poraziť ochorenie. To sa deje s chorobami typu A, E a B. Ak imunitný systém stráca v boji, hepatitída sa stáva chronickou (najmä pre typy C, D a menej často B).
Existuje päť typov ochorenia:
- Hepatitída A (pôvodca HAV). Prenosová dráha je fekálne-orálna. Nečistoty, nemyté výrobky a znečistená voda sú príčinou infekcie. Niekedy prenášané počas intimity. Často má miernu formu a vedie k úplnému uzdraveniu, po ktorom nasleduje vytvorenie imunity. Vzácne ťažké druhy sú smrteľné. Očkovanie sa vykonáva.
- Hepatitída B (HBV). Vstupuje do tela cez tekutý biologický materiál (krv, semenná tekutina) a dieťa v čase narodenia. Pri použití použitej injekčnej striekačky so zavedením injekčných liekov (rizikových drogovo závislých). Prostredníctvom nesterilných a opakovane použiteľných nástrojov v nemocniciach (z nedbanlivosti zamestnancov). Infúziou darcovskej krvi bez predchádzajúceho overenia. Existuje vakcína.
- Hepatitída C (HCV). Infikované, podobne ako pri hepatitíde B. Vakcíny ešte neexistujú.
- Hepatitída D (HDV) postihuje len tie, ktoré sú infikované HBV. Vzhľadom na dvojitý nápor pečene sa zvyšuje závažnosť ochorenia. Očkovanie proti B tiež chráni proti HDV.
Ak vírusová hepatitída trvá dlho a tajne, vedie k nebezpečným a nezvratným následkom. Vedomosť o tejto skutočnosti je podnetom na to, aby ste túto chorobu nevynechali a prijali včasné opatrenia.
Hepatitída B
Hepatitída B je zápalová pečeňová patológia, ktorá sa vyskytuje v dôsledku vniknutia vírusu B do organizmu, ktorý je nebezpečný na získanie cirhózy pečene alebo onkológie orgánu.
Spôsoby prenikania choroby:
- použitie použitej injekčnej striekačky na injekciu;
- prostredníctvom nesterilných a opakovane použiteľných nástrojov v zdravotníckych zariadeniach (nedbanlivosťou zamestnancov);
- použitie bez predchádzajúceho testovania darcovskej krvi;
- prax nechráneného pohlavia;
- vertikálny prenos z trpiaceho dieťaťa na matku.
Včas rozpoznať ochorenie a začať liečbu pomôže poznať príznaky ochorenia:
- Útoky na nevoľnosť a nutkanie zvracať.
- Strata chuti do jedla
- Pocit nepohodlia pod rebrami vpravo.
- Bolesti v kĺboch.
- Porušenie frekvencie a konzistencie výkalov (bezfarebné výkaly, tmavý moč).
- Vzhľad žltej kože.
- Ospalosť a rýchla únava.
V súčasnosti neexistujú žiadne lieky, ktoré úplne vylučujú vírus z tela a úplne sa hojia. Ak sa však v primeranom čase prijmú lekárske opatrenia, je možné zaistiť bezpečnosť pečene.
Čo je DNA hepatitídy B? Kvantitatívna definícia
Na detekciu DNA vírusu hepatitídy B sa môže použiť PCR (polymerázová reťazová reakcia). Podozrenie z choroby - na klinike, pomocou laboratórnych a inštrumentálnych metód. Pôvodne je patológia skrytá (doba inkubácie), potom ide do akútneho štádia.
Postupom času sa stáva chronickým ochorením, ale ovplyvňuje počet vírusov a kvalitu liečby. Je veľmi dôležité zabrániť poslednej fáze.
Pre prítomnosť vírusovej DNA existuje vysoko kvalitný enzýmový imunotest. Ale nie je úplne objektívny. Nedetekuje prítomnosť patogénu vo vnútri orgánov.
Pomáha identifikovať:
- ako reaguje imunita voči infekcii;
- či sú v krvi antigény a protilátky.
Preto je kontrola terapie komplikovaná. Preukázať, že osoba má späť, na základe tejto metódy je nemožné. Detekcia a identifikácia nie je potvrdená kvalitatívnou analýzou DNA vírusu hepatitídy B pomocou kvantitatívnej analýzy.
Takáto analýza je spoľahlivá a je priradená v týchto prípadoch:
- Enzýmový imunosorbentný test (ELISA) na protilátky je pozitívny.
- Zistila sa prítomnosť vírusového ochorenia pečene.
- Existuje možnosť niekoľkých typov hepatitídy.
- Ak potrebujete vedieť, čo zaťaženie vírusmi na tele.
Ak ochorenie postupuje ľahko a bez komplikácií, nie je potrebné určiť zaťaženie vírusmi. Pacient sa lieči na základe svedectva testu ELISA.
Lekárska veda vyvinula metódu polymerázovej reťazovej reakcie (PCR), pomocou ktorej sa stanoví prítomnosť vírusovej DNA a jej množstvo v krvi.
DNA detekcia HBV pomocou PCR
Na detekciu DNA vírusu hepatitídy B sa vykoná PCR na výpočet počtu častíc HBV na jednotku objemu krvného séra. Počet vírusov hepatitídy sa považuje za normálny v neprítomnosti dvojčiat DNA infekcie.
Táto diagnostika má za cieľ:
- Vypočítajte počet vírusových častíc na jednotku objemu séra.
- Potvrďte akútnu hepatitídu.
- Včasná prevencia prechodu ochorenia v chronickom stave.
- Identifikujte nosiče vírusu s pozitívnymi výsledkami ELISA.
- Sledujte návrat vírusov po liečbe.
- Urobte správne rozhodnutie o menovaní terapie, jej kombinácii alebo ukončení.
Po inkubačnej dobe je akútna hepatitída pozitívna na PCR po siedmich až štrnástich dňoch.
Pred pridelením krvi na analýzu lekár zistí anamnézu pacienta:
- či sa drogy injikovali do žily;
- či krv niekoho iného pretekala alebo sa vzdala ako darcovská krv;
- boli tam nejaké operácie;
- či boli kožné lézie;
- či existovali pochybné sexuálne vzťahy;
- boli kontakty s ľuďmi infikovanými hepatitídou B?
Krv sa odoberá na analýzu z žily na lačný žalúdok ráno od 7 do 9 hodín, takže výsledky sú spoľahlivé.
Pripravte sa na odber krvi, dodržiavajte pravidlá:
- nejedzte tučné potraviny po dobu 12 hodín, neberte alkoholické nápoje, nefajčite;
- vyhnúť sa fyzickému a športovému zaťaženiu;
- Upozornite v laboratóriu, či sa užívali lieky (ak je to možné, nepoužívajte);
- deťom mladším ako päť rokov, pol hodiny pred odberom krvi, vypite dvesto gramov prevarenej vody v 10-minútových intervaloch.
Koncentrácia DNA HBV sa meria v kópiách / ml alebo me / ml.
Pri hodnotení výsledkov štúdie sa riadia tieto ukazovatele:
- 2x10 ^ 6 - v deväťdesiatpäť percent prípadov sa stane chronickým.
Kvantitatívna PCR je hlavnou metódou diagnostiky exacerbácií hepatitídy B, ktorá identifikuje latentný nosič infekcie s vysokou virémiou HBV.
V ktorých chorobách je DNA vírusu hepatitídy B kvantifikovaná
Na detekciu infekcie sa vykonáva PCR hepatitídy (HBV DNA). Tento typ diagnostickej detekcie škodlivých mikroorganizmov prichádza na pomoc nielen pri hepatitíde B. Aby sa našli patogény, ktoré sú sekrečné a ťažko sa nachádzajú v orgánoch, PCR sa často používa na potvrdenie alebo vyvrátenie infekcie v gynekologickej a urologickej praxi.
Preskúmanie krvi, zistenie:
- hepatitídy A, B, C, D a TT;
- HIV infekcia;
- ochorenie pečene;
- herpes všetkých druhov;
- cytomegalovírus;
- enterovírusovú infekciu;
- toxoplazmóza;
- ružienke;
- iné ochorenia spôsobené vírusmi.
Nielen krvné sérum je vhodné na diagnostikovanie ochorení touto metódou. Ďalšie biomateriály sa tiež používajú na analýzu. To sú sliny, šmuhy z genitálií, ejakulát.
Preto sa rozširuje zoznam chorôb, pre ktoré sa diagnostikuje PCR:
- Tuberkulóza.
- Salmonelóza.
- Záškrt.
- Pohlavné choroby.
- Vírusové papilomy
PCR je súčasťou série povinných testov pre ženu, ktorá má dieťa. Aby sa zabránilo patologickému priebehu tehotenstva a abnormalitám vo vývoji dieťaťa, je potrebné vylúčiť pravdepodobnosť infikovania matky nebezpečnými chorobami.
Termín analýzy DNA vírusu hepatitídy B kvantitatívnym spôsobom
PCR bez chýb s vysokou presnosťou detekuje prítomnosť vírusu v ranom štádiu. V štúdii ELISA sa antigén objavuje len dva mesiace po infekcii. S PCR - za tridsať dní. Detekuje sa nielen bežný vírus, ale aj mutované kmene, ktoré žiadna iná analýza nedokáže detegovať.
Existujú štandardné čísla pre kvantifikáciu vírusu. Porovnávajú sa s hodnotami získanými v štúdii a vyvodzujú závery o stupni vývoja ochorenia alebo jeho neprítomnosti. Dátová analýza PCR sa vydáva za dva týždne.
Ľudia často nevedia, že mali hepatitídu B. Mýlia si ju s nachladnutím alebo chrípkou. V dôsledku choroby sa riziko zvyšuje v priebehu života, aby sa získali závažné komplikácie z pečene. Preto je lepšie hrať bezpečne a kontaktovať špecialistu na infekčné ochorenia.
Ktorí lekári by mali byť konzultovaní
Pacient, ktorý dostal na rukách výsledky testov, sa snaží vyvodiť závery o prítomnosti hepatitídy a určiť štádium vývoja ochorenia. V tomto prípade sa pri posudzovaní skutočného stavu často vyskytuje chyba. Aby sa tomu zabránilo, prichádzajú k lekárom na radu.
Lekárski špecialisti v tejto oblasti:
Ošetrujúci lekár analyzuje kvantitatívny test PCR, pričom rozlúči charakter priebehu hepatitídy B a indikácie pre ďalšiu diagnózu.
Pomáha zvoliť si potrebnú liečbu alebo ju zrušiť v neprítomnosti ochorenia pacienta.
Lekár s infekčným ochorením objektívne vyhodnotí zdravotný stav pacienta po dešifrovaní, predpíše správnu liečbu a poradí.
Aby nedošlo k problémom spojeným s touto chorobou, hepatológovia dôrazne odporúčajú, aby sa vakcíny proti hepatitíde typu B. Zavedenie vakcíny poskytuje stopercentnú záruku, že osoba bude chránená pred touto chorobou.
- všetky deti bezprostredne po narodení;
- zamestnancov zdravotníckych zariadení;
- tých, ktorí sú naplnení krvou niekoho iného.
Ako dlho bude zavedená vakcína pôsobiť, závisí od imunity každého jednotlivca (od 10 do 20 rokov). Ak je to potrebné, očkovanie urobte znova.
Liečime pečeň
Liečba, príznaky, lieky
Prepis transkriptu kvantitatívnej analýzy hepatitídy B
Hepatitída B je jednou z najnebezpečnejších chorôb našej doby.
Je spôsobená vírusom, ktorý vstúpi do tela, keď krv prichádza do styku s infikovaným biologickým materiálom, vrátane tých, ktoré zostávajú na manikúrových doplnkoch, lekárskych nástrojoch, tetovacích strojoch, ktoré neboli riadne dezinfikované. Vírus sa môže prenášať aj prostredníctvom sexuálneho kontaktu.
Hepatitída B sa analyzuje na diagnostikovanie ochorenia odberom krvi pacienta.
K infekcii dochádza prostredníctvom sexuálnych a domácich ciest, typom šírenia je hematogénna (krv). Keď je infikovaný, vírus vstupuje do hepatocytov (pečeňových buniek), ktoré sa produkujú v budúcnosti. Cez krvný obeh sa choroba rýchlo šíri po celom tele. Vírus B (HBV) sa vyznačuje vysokou odolnosťou voči účinkom teploty a kyseliny a je schopný udržať svoje škodlivé vlastnosti po dobu šiestich mesiacov.
Aké krvné testy máte na hepatitídu B?
Ak hepatitída B vykazovala prvé príznaky, je potrebné vykonať testy pred začiatkom liečby a liečby. Krvný test je spoľahlivý spôsob inštalácie infekcie hepatitídy. Vedené v laboratóriu. Testovací materiál pre hepatitídu B sa podáva nalačno: z posledného jedla by malo uplynúť minimálne 8 hodín.
Na zistenie vírusu hepatitídy B v krvi sa používajú testy troch typov, ktoré charakterizujú prítomnosť vírusu v krvi:
- analýza prítomnosti HBV DNA v materiáli študovaním polymerázovej reťazovej reakcie;
- kvalitatívna štúdia prítomnosti proteínu anti-HBc IgG a antigénu HBsAg (zistené u zdravých, infikovaných a chorých);
- analýza na detekciu proteínov HBeAg a anti-HBc IgM (charakterizovať zhoršenie ochorenia).
Pre úplnosť sa odporúča súčasne vykonávať výskum na niekoľkých markeroch.
Imunologické testy na hepatitídu B
Najbežnejšie testy na hepatitídu B sú imunologické. Ich podstatou je detekcia protilátok v krvi produkovaných telom alebo pečeňou. Vzorky sú kvalitatívne a kvantitatívne. Testy a transkripty hepatitídy B zvyčajne obsahujú informácie o niekoľkých charakteristických proteínoch. Počas testu sa testujú nasledujúce protilátky: t
Vyskytuje sa v skorých štádiách infekcie pred nástupom klinických príznakov.
Pozitívny marker indikuje prítomnosť vírusu, ale nachádza sa aj u zdravých ľudí. Ak je v krvi menej ako 0,05 IU / ml, výsledok sa považuje za negatívny. Ak je koncentrácia protilátky vyššia, analýza sa považuje za pozitívnu.
Nachádza sa prakticky u každého infikovaného pacienta. Udržiavanie ukazovateľov na vysokej úrovni môže naznačovať prechod ochorenia na chronickú formu kurzu. Pozitívny marker indikuje prítomnosť ochorenia v období exacerbácie, predĺženého zotavenia. HBeAg je mimoriadne zlé znamenie. Pacient je veľmi nákazlivý. Normálne nie je proteín detekovaný v krvi.
Existujú dva typy protilátok proti HBc: IgG a IgM. Prítomnosť IgM v krvi je známkou priebehu akútnej formy, vysokej infekčnosti pacienta a možnosti ochorenia pererohody v chronickej forme. Normálne nie je prítomnosť IgM povolená. IgG je priaznivým indikátorom. Marker označuje, že telo vytvára imunitu proti hepatitíde B.
Ak je v krvi detekovaný marker, je možné vyvodiť záver o priaznivom priebehu ochorenia a vytvorení ochrannej imunity u pacienta.
Marker signalizuje obnovu a tvorbu imunity.
Detekcia HBV DNA pomocou PCR
Na laboratórne vyšetrenie a detekciu prítomnosti diagnózy hepatitídy B v krvi sa používa metóda PCR. Spôsob polymerázovej reťazovej reakcie je najaktuálnejší v oblasti detekcie chorôb.
Konečné dekódovanie ukazuje, či existujú stopy génovej prítomnosti patogénu v pečeňových bunkách.
Ak sa počas výskumu budú dodržiavať všetky zásady, výsledok je úplne presný. Metóda sa používa na diagnostiku, používa sa v procese liečby av antivírusovej terapii.
- Vysoko kvalitná PCR na celkovom počte má len dva významy: „detegované“ a „nezistené“. Tento postup sa vykonáva pre každého pacienta s podozrením na hepatitídu. Pri priemernej citlivosti testu PCR v rozsahu od 10 do 500 IU / ml, pri nízkych hladinách vírusovej DNA v krvi, nebude detegovaný žiadny génový materiál.
- Kvantitatívna PCR. Na rozdiel od kvalitatívneho indikuje nielen hepatitídu B. Kvantitatívna analýza ukazuje, do akej miery je norma zdravého človeka v číselnom vyjadrení ďaleko od indikátorov pacienta. Metóda umožňuje vyhodnotiť štádium ochorenia a predpísať liečbu. Citlivosť testu PCR v kvantitatívnom sledovaní je vyššia ako pri kvalitatívnej metóde. Základom je počet zistených DNA, ktorý je vyjadrený v kópiách na mililiter alebo IU / ml.
Krvný test na hepatitídu B vo forme kvantitatívnej PCR poskytuje pochopenie stupňa infekčnosti pacienta. Čím vyššie je skóre, tým vyššie je riziko šírenia vírusu.
Okrem toho kvantitatívna PCR poskytuje prehľad o účinkoch liečby a správnosti zvolenej terapie. V závislosti od množstva vírusového génového materiálu môže byť rozhodnuté o skrátení doby liečby alebo naopak o predĺženie a posilnenie.
Biochemický krvný test na hepatitídu B
Na získanie úplného klinického obrazu priebehu ochorenia je potrebná metóda biochemickej analýzy. Táto diagnostická metóda dáva pochopenie práce vnútorných orgánov (pečeň, obličky, žlčník, štítna žľaza a iné). Dekódovanie dáva pochopenie metabolizmu v tele, možných patológií metabolizmu. Podrobné ukazovatele poukazujú na nedostatok vitamínov, makroživín a minerálov potrebných pre ľudské zdravie a život.
Ak je podozrenie na hepatitídu B, testy nevyhnutne zahŕňajú biochemickú štúdiu založenú na žilovej krvi. V tomto prípade venujte osobitnú pozornosť ukazovateľom charakterizujúcim prácu pečene a jej možné poškodenie.
Test na hepatitídu môžete vykonať v ktoromkoľvek inom diagnostickom centre (Invitro, Gemotest atď.). Biochemický krvný test na detekciu hepatitídy B zahŕňa nasledujúce zložky.
Kvantitatívna analýza enzýmu ALT (AlAt)
Tento enzým sa najčastejšie vyskytuje vo zvýšených koncentráciách pri akútnej a chronickej hepatitíde. Látka je obsiahnutá v pečeňových bunkách a s léziami orgánov cez krvný obeh vstupuje do krvných ciev.
Množstvo a koncentrácia v krvi počas vírusového ochorenia sa neustále mení, takže výskum sa vykonáva aspoň raz za štvrťrok. ALT odráža nielen aktivitu vírusu hepatitídy, ale aj stupeň poškodenia spôsobeného v pečeni. Hladina ALT sa zvyšuje so zvyšujúcim sa množstvom toxických látok pečeňového pôvodu av prítomnosti vírusu.
Kvantitatívna analýza AST-enzýmu
Proteín je súčasťou najdôležitejších orgánov človeka: pečene, nervového tkaniva, tkaniva obličiek, kostry a svalov. Enzým je zapojený do budovania najdôležitejších svalov - srdca. Vysoká AST u pacienta s hepatitídou B môže signalizovať fibrózu pečene. Podobná situácia nastáva, keď alkoholické, drogové alebo iné toxické poškodenie pečeňových buniek.
Indikátory prehriatia sú znakom poškodenia pečene na bunkovej úrovni. Pri stanovení diagnózy je potrebné vziať do úvahy pomer AST a ALT (de Rytisov koeficient). Súčasné zvýšenie koncentrácie oboch enzýmov je známkou nekrózy pečene.
bilirubín
Látka sa tvorí v slezine a pečeni v dôsledku rozpadu hemoglobínu v ich tkanivách. Táto zložka je súčasťou žlče. Existujú dve proteínové frakcie: priamy bilirubín (viazaný) a nepriamy bilirubín (voľný). Pri zvýšení hladiny bilirubínu v krvi má zmysel podozrenie na hepatitídu alebo iné poškodenie pečene. To priamo súvisí s cytolýzou pečeňových buniek.
Bilirubin u ľudí
Ak sa množstvo nepriameho bilirubínu zvýši, potom je s najväčšou pravdepodobnosťou lézia parenchymálneho tkaniva alebo Gilbertov syndróm. Vysoká hladina bilirubínu podľa výsledkov analýzy môže byť dôsledkom obštrukcie žlčových ciest. Keď je hladina bilirubínu viac ako 30 mikromolov na liter, pacient vykazuje ikterický odtieň kože, moč sa stmavne a biele oči menia svoju farbu.
bielkovina
Syntéza tohto proteínu sa vyskytuje v pečeni. Ak je jeho množstvo znížené, znamená to pokles syntézy enzýmov v tele v dôsledku výskytu závažných lézií pečeňových buniek.
Celkový proteín
Ak sa množstvo celkového proteínu stane výrazne nižším ako je prijatá norma, potom to znamená spomalenie fungovania pečene.
Zvýšenie hladiny proteínov signalizuje zápalový proces v tele.
GGT (GGTP)
Enzým používaný na detekciu obštrukčnej žltačky a cholecystitídy. Zvýšenie hladiny GGT je signálom toxického poškodenia pečene. Môže byť vyvolaný chronickým alkoholizmom a nekontrolovaným užívaním drog. Proteín je obzvlášť citlivý na toxíny a alkohol, pod ich vplyvom rýchlo rastie jeho aktivita. Udržanie vysokej koncentrácie GGT v krvi po dlhú dobu hovorí o závažnom poškodení pečene.
kreatinínu
Je produktom metabolizmu proteínov, ktorý sa vyskytuje v pečeni. Prudký pokles úrovne je signálom, že orgán sa spomaľuje.
Proteínové frakcie
Zníženie hladiny proteínových frakcií je známkou patológie pečene.
Dekódovacia analýza pre hepatitídu B a hodnoty sú normálne
Diagnostika hepatitídy B je kumulatívna štúdia ukazovateľov. Len ich komplexná analýza umožňuje vyvodiť závery o infekcii pacienta. Zvážte dekódovaciu analýzu hepatitídy B. Pre porovnanie, rýchlosť látok v krvi.
Miera kvantitatívnej analýzy hepatitídy B
DNA vírusu hepatitídy B, kvantitatívne stanovenie
Čo je kvantifikácia DNA vírusu hepatitídy B?
HBV je komplexný vírus obsahujúci DNA a patrí do čeľade Hepadnaviridae rodu Orthoepadnavirus.
Hepatitída B je antroponotická infekcia, hlavne s parenterálnym mechanizmom infekcie, ktorá sa môže vyskytovať vo forme vírusového transportu, akútnych a chronických foriem a je charakterizovaná poškodením pečene s možným rozvojom akútneho zlyhania pečene, chronickej hepatitídy, cirhózy pečene a primárneho karcinómu pečene (hepatocelulárneho karcinómu).
K infekcii ľudského tela dochádza priamym preniknutím HBV do krvi (pri akýchkoľvek invazívnych zákrokoch a pri transfúzii krvi a jej prípravkoch), alebo cez sliznice a pokožku počas pôrodu, počas sexuálnych a blízkych kontaktov v domácnosti. Akonáhle je v pečeni, HBV preniká do hepatocytov, kde sa rýchlo množia.
K rozvoju infekčného procesu môže dôjsť dvoma spôsobmi: replikatívnou a integračnou. Replikatívna forma infekcie vedie k rozvoju akútnej alebo chronickej hepatitídy a cirhózy pečene, zatiaľ čo integračná forma vedie k rozvoju zdravej vírusovej infekcie, inaktívnej chronickej hepatitíde, cirhóze pečene a primárnemu hepatokarcinómu.
Sérologická diagnostika a prognóza HBV infekcie je založená na detekcii vírusových antigénov a protilátok proti nim. Ako sa však ukázalo, v populácii vírusu hepatitídy B sa nachádza dostatok mutantných kmeňov (HBeAg-negatívnych), ktoré sa nezistili bežnými sérologickými testami. Metóda PCR na diagnostiku HBV infekcie je preto mimoriadne dôležitá.
Kvantitatívne stanovenie DNA vírusu hepatitídy B pomocou PCR.
Analytické ukazovatele: Detekcia DNA vírusu hepatitídy B (vírus hepatitídy B) metódou polymerázovej reťazovej reakcie (PCR) a stanovenie vírusovej záťaže v krvnej plazme.
Identifikovaný fragment je jedinečná sekvencia DNA génu štruktúrneho proteínu vírusu hepatitídy B. Špecifickosť stanovenia je 98%. Detekčná citlivosť je od 2x105 IU / ml 5x103 kópií / ml vírusových častíc v sére.
Kvantitatívna charakterizácia obsahu DNA vírusu hepatitídy je dôležitá pre hodnotenie účinnosti antivírusovej terapie a má prognostickú hodnotu na stanovenie chronicity hepatitídy B: s počiatočnou nízkou hladinou virémie (HBV DNA je nižšia ako 2x105 kópií / ml (2x105 IU / ml)) na nulu. Pri koncentrácii DNA HBV od 2 x 105 kópií / ml (2x105 IU / ml) do 2 x 10 kópií / ml (8x105 IU / ml) sa proces pozoruje u 25-30% pacientov a u pacientov s vysokou hladinou vírusu (viac ako 2 x 10 kópií / ml). (8x105 IU / ml)) akútna hepatitída B sa najčastejšie stáva chronickou. 85% pokles koncentrácie DNA vírusu hepatitídy B do tretieho dňa od začiatku liečby je rýchly a presný parameter na predpovedanie účinnosti liečby.
Trápi vás niečo? Chcete vedieť podrobnejšie informácie o DNA vírusu hepatitídy B, kvantifikácii alebo iných testoch? Alebo potrebujete navštíviť lekára? Môžete sa dohodnúť s lekárom - klinika Eurolab je vždy k vašim službám! Najlepší lekári vás preskúmajú, poradia, poskytnú potrebnú pomoc a urobia diagnózu. Môžete tiež zavolať lekára doma. Klinika Eurolab je otvorená nepretržite.
Ako kontaktovať kliniku:
Telefónne číslo našej kliniky v Kyjeve: (+38 044) 206-20-00 (multikanálové). Tajomník kliniky si vyberie vhodný deň a čas návštevy u lekára. Tu sú zobrazené naše súradnice a smery. Podrobnejšie sa pozrite na všetky služby kliniky na jej osobnej stránke.
Ak ste predtým vykonali akékoľvek štúdie, uistite sa, že ste ich výsledky konzultovali s lekárom. Ak štúdie neboli vykonané, urobíme všetko potrebné na našej klinike alebo s našimi kolegami na iných klinikách.
Musíte byť veľmi opatrní na svoje celkové zdravie. Existuje mnoho chorôb, ktoré sa najprv v našom tele neprejavujú, ale nakoniec sa ukazuje, že sú nanešťastie už príliš neskoro na to, aby sa mohli liečiť. Ak to chcete urobiť, musíte byť vyšetrený lekárom niekoľkokrát ročne. nielen preto, aby sa zabránilo hroznej chorobe, ale aj aby sa udržala zdravá myseľ v tele a tele ako celku.
Ak sa chcete opýtať lekára, použite sekciu online konzultácie. Možno tam nájdete odpovede na svoje otázky a prečítajte si tipy na starostlivosť o seba. Ak máte záujem o recenzie na kliniky a lekárov - skúste nájsť informácie, ktoré potrebujete na fóre. Zaregistrujte sa aj na zdravotnom portáli Eurolab. držať krok s najnovšími správami a novinkami na stránke o DNA vírusu hepatitídy B, kvantifikácii a ďalších analýzach na stránke, ktoré budú automaticky odoslané na váš e-mail.
Ak máte záujem o akékoľvek iné testy, diagnostiku a služby kliník všeobecne, alebo máte ďalšie otázky a návrhy - napíšte nám. pokúsime sa vám pomôcť.
Znalostná báza: HBV, kvantifikovaná DNA [real-time PCR]
HBV, kvantifikovaná DNA [real-time PCR]
Štúdia na identifikáciu pôvodcu hepatitídy B (HBV), počas ktorej sa stanoví prítomnosť genetického materiálu (DNA) vírusu a jeho množstvo (vírusová záťaž) vo vzorke krvi pomocou metódy polymerázovej reťazovej reakcie v reálnom čase (RT-PCR).
DNA HBV sa môže detegovať pri koncentrácii mimo dolnej hranice rozsahu lineárnej koncentrácie. Rozsah lineárnej koncentrácie je rozsah, v ktorom môžete presne vypočítať počet kópií patogénu. Pre túto analýzu je lineárny rozsah koncentrácií HBV DNA stanovený detekčným zosilňovačom 7,5 x 102 - 1,0 x 108 kópií / ml vzorky.
Vírus hepatitídy B (HBV), kvantifikácia DNA.
DNA vírusu hepatitídy B, kvantitatívna, real-time PCR, krv; HBV Vírusová záťaž; DNA vírusu hepatitídy B Quant.
Reťazová reakcia v reálnom čase.
Kópia / ml (kópia na mililiter).
Aký biomateriál možno použiť na výskum?
Ako sa pripraviť na štúdium?
Nefajčite 30 minút pred darovaním krvi.
Všeobecné informácie o štúdii
Vírusová hepatitída B (HBV) je infekčné ochorenie pečene spôsobené vírusom hepatitídy B obsahujúcim DNA (HBV). Zo všetkých príčin akútnej hepatitídy a chronickej vírusovej infekcie sa vírus hepatitídy B považuje za jeden z najbežnejších na svete. Skutočný počet infikovaných nie je známy, pretože mnoho ľudí má infekciu bez špecifických príznakov a nehľadá lekársku pomoc. Vírus sa často zisťuje počas preventívnych laboratórnych testov. Podľa hrubých odhadov je na svete približne 350 miliónov ľudí postihnutých vírusom hepatitídy B a 620 000 ľudí zomrie na jeho účinky každý rok. V Rusku počet nosičov HBV presahuje 5 miliónov ľudí.
Zdrojom infekcie je HBV pacient alebo asymptomatický nosič vírusu. HBV sa prenáša krvou a inými telesnými tekutinami. Môžete sa nakaziť nechráneným pohlavím, použitím nesterilných injekčných striekačiek, transfúziou krvi a transplantáciou darcovských orgánov, dieťa môže byť infikované matkou počas alebo po narodení (praskliny v bradavkách). Riziková skupina zahŕňa: zdravotníckych pracovníkov, ktorí môžu mať kontakt s krvou pacienta, pacientov, ktorí dostávajú hemodialýzu, injekčných užívateľov drog, ľudí s promiskuitnými sexuálnymi aktivitami, detí narodených matkám s HBV.
Inkubačná doba ochorenia je od 4 týždňov do 6 mesiacov. Vírusová hepatitída B sa môže vyskytovať vo forme miernych foriem trvajúcich niekoľko týždňov, ako aj vo forme dlhodobej chronickej infekcie. Hlavnými príznakmi hepatitídy sú: žltnutie kože, horúčka, nevoľnosť, únava, laboratórne testy - abnormálna funkcia pečene a špecifické antigény vírusu hepatitídy B. Akútne ochorenie môže rýchlo viesť k smrti, prejsť na chronickú infekciu alebo ukončiť úplné uzdravenie. Predpokladá sa, že po utrpení HBV vytvorila silnú imunitu. Chronická vírusová hepatitída B je spojená s rozvojom cirhózy a rakoviny pečene.
Existuje niekoľko špecifických testov na identifikáciu existujúcej alebo minulej vírusovej hepatitídy B. Na potvrdenie prítomnosti infekcie a na objasnenie obdobia ochorenia sa používa definícia vírusových antigénov, protilátok proti nim a vírusovej DNA.
Polymerázová reťazová reakcia je vysoko citlivá a špecifická. PCR sa môže použiť na stanovenie DNA vírusu buď kvalitatívne alebo kvantitatívne. Kvôli kvalitatívnej metóde sa potvrdzuje prítomnosť vírusu hepatitídy B v tele a jeho aktívna reprodukcia. Kvantifikácia vírusovej záťaže vám umožňuje vyhodnotiť intenzitu vývoja ochorenia, účinnosť liečby alebo rozvoj rezistencie na antivírusové lieky.
Existuje vzťah medzi koncentráciou vírusu v krvi a výsledkom akútnej vírusovej hepatitídy B. Pri nízkej úrovni virémie je pravdepodobnosť, že sa infekcia stane chronickou, takmer nulová a infikovaná osoba je pre ostatných neškodná. Pri vysokej vírusovej záťaži (5 kópií / ml) sa chronickosť vyskytuje často a pacient je potenciálnym zdrojom infekcie. Preukázaný vzťah medzi množstvom vírusovej DNA v sére, prítomnosťou HBeAg, zvýšenou ALT a rozvojom cirhózy a hepatocelulárneho karcinómu (rakovina pečene).
Účinnosť antivírusovej terapie sa hodnotí znížením množstva vírusovej DNA v krvi. 3-6 mesiacov po začiatku liečby sa má vírusová záťaž s adekvátnou terapeutickou odpoveďou znížiť o 1-2 rády. Neprítomnosť poklesu počtu vírusov alebo jeho zvýšenie na pozadí požadovanej liečby vyžaduje preskúmanie a zmenu terapie.
Kvantitatívne stanovenie DNA vírusu hepatitídy B spolu s klinickým obrazom ochorenia a biochemických ukazovateľov, markerov infekcie a výsledku biopsie pečene umožňuje predpovedať ochorenie a vyhodnotiť potrebu antivírusovej terapie.
Na čo sa používa výskum?
- Predpovedať priebeh vírusovej hepatitídy B.
- Potvrdiť chronickú formu vírusovej hepatitídy B.
- Identifikovať nosiče vírusovej hepatitídy B a monitorovať reprodukčnú aktivitu vírusu.
- Identifikovať skryté a mutantné kmene hepatitídy B.
- Posúdiť účinnosť antivírusovej liečby hepatitídy B a rozhodnúť o ďalšej taktike liečby.
Kedy je naplánovaná štúdia?
- S vysoko kvalitnou DNA detekciou vírusu hepatitídy B.
- Pri akútnej a chronickej vírusovej hepatitíde B.
- Pri zmiešanej hepatitíde.
- Pred a počas antivírusovej liečby.
Čo znamenajú výsledky?
- Nezistené - žiadna DNA vírusu hepatitídy B nebola detegovaná alebo hodnota je pod hranicou citlivosti metódy (200 kópií / ml = 90 IU / ml).
- 10 ^ 5 kópií / ml (2 x 10 ^ 4 IU / ml) - vysoká vírusová záťaž, aktívny infekčný proces (je potrebná antivírusová liečba).
- 1,0 x 108 kópií / ml (4,8 x 10 7 IU / ml) - DNA vírusu hepatitídy B sa detegovala pri koncentrácii nad rozsahom lineárnej koncentrácie.
Lineárny rozsah koncentrácií DNA vírusu hepatitídy B stanovený detekčným zosilňovačom je 7,5 x 10 2 - 1,0 x 10 8 kópií / ml (3,6 x 106 - 4,8 x 10 7 IU / ml).
Čo môže ovplyvniť výsledok?
- Kvantitatívne stanovenie DNA vírusu hepatitídy B je povinná štúdia pred vymenovaním antivírusovej terapie. V priebehu liečby sa analýza musí opakovať po 3-6 mesiacoch.
- Vírusová hepatitída B sa často kombinuje s vírusovou hepatitídou D.
Kto robí štúdiu?
- Zh.I. Vozianova Infekčné a parazitárne ochorenia: v 3 tonách - K. Health, 2000 - T.1. 601-654.
- Chan Henry Lik-Yuen, Wong May Ling a iní. DNA vírus hepatitídy B Reagent hepatitídy B hepatitídy B Október 2003; 41 (10): 4793 - 4795. PMCID: PMC294957
- Harrisonove princípy vnútorného lekárstva. 16th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
- Manažment hepatitídy B. Konferencia o rozvoji konsenzu NIH. Program a abstrakty. 20. - 22. október 2008.
Aké sú normy pre kvantifikáciu hepatitídy C?
Vírus hepatitídy C je schopný množiť sa v krvných bunkách a spôsobiť lymfoproliferatívne ochorenia. V dôsledku viacnásobných mutácií oslabuje imunitná obrana tela, objavia sa genotypy a podtypy vírusu. Správnym a včasným určením konkrétneho typu závisí účinnosť antivírusovej liečby. Nebezpečenstvo infekcie je, že choroba je asymptomatická. Iba 15 percent zo 100 môže zažiť nevoľnosť a vracanie, stratu hmotnosti a horúčku.
Detekcia vírusu hepatitídy C
Štandardná rýchlosť hepatitídy C je vo veľkostiach od 40 do 60 nm, s väčšinou lipidov, poškodením pečene v dôsledku akútneho alebo chronického priebehu ochorenia. Hepatitída C, a to RNA vírus rodiny Togaviridae, je extrémne rezistentná, je prenášaná krvnou transfúziou alebo použitím nesterilných predmetov, nesprávnych hygienických potrieb, atď. Kvantitatívna analýza vám umožňuje skúmať krv a identifikovať genetickú štruktúru infikovaného vírusu.
Na stanovenie hepatitídy C a jej genotypov vykonajte kvantitatívnu analýzu. V závislosti od analyzátora je možné určiť tri úrovne výskytu RNA vírusu.
Subtypy môžu produkovať rôzne modifikácie, takže špecifickosť a citlivosť analyzátora musí byť sto percent. Okrem detekcie ochorenia u pacienta je nevyhnutné určiť stupeň jeho závažnosti. Niektoré laboratóriá nemajú všetky údaje o dekódovaní vírusu RNA, existuje možnosť falošne pozitívnej reakcie.
Výskum hepatitídy C bude presnejší pri štúdiu týchto ukazovateľov:
S dôrazom na výsledky týchto ukazovateľov a celkový stav tela sa zobrazí výsledok ukazujúci stupeň infekcie, tvar a počet buniek hepatitídy C v krvi. To prispieva k procesu hojenia a účinnosti antivírusovej terapie.
Druhy analýzy hepatitídy C
Viacrozmerná reťazová reakcia (PCR) poskytuje predstavu o počte častíc DNA v uskutočnených analýzach pacientov, pričom správne identifikuje infekčné činidlo.
Môžu sa objaviť pôvodcovia infekčných ochorení. Takéto infekčné ochorenie pečene, ako je hepatitída C, je v súčasnosti liečiteľné, keď sa včas zistí. Ak je podozrenie na vírus, vykoná sa PCR analýza.
Vzhľadom k tomu, že dlhodobé príznaky vírusu môžu byť maskované, človek nemusí cítiť nástup ochorenia. Pri dôkladnom vyšetrení v 60–70% prípadov sa však zistí hepatitída C, prvá analýza, ktorou je ELISA, potom nasleduje PCR diagnostika. Analýza sa vykonáva v určitých obdobiach s cieľom určiť štádium ochorenia a predpísať vhodnú liečbu. Bez neho, bez použitia všetkých týchto postupov, je možné očkovanie proti hepatitíde.
Analýza, vrátane PCR diagnostiky, poskytuje obraz ochorenia, ako je vírus aktívny v rôznych obdobiach vývoja.
Po prvé, existuje kvalitatívna analýza, ktorá iba potvrdzuje hypotézu o infekcii a potom kvantitatívnu, určujúcu zaťaženie pečene. Ideálna možnosť by bola negatívnym výsledkom pre hepatitídu C v genetickom materiále pacienta.
Kvalitatívna a kvantitatívna analýza
Existujú kvalitatívne a kvantitatívne analýzy. Podstatou prvej je, že určuje prítomnosť infekcie v krvi. A to znamená, že vírus infikuje zdravé pečeňové bunky. Keď sa u pacienta nachádzajú protilátky proti hepatitíde C, okamžite sa vykoná kvalitatívny test. Miera, ktorú by výsledok mal dať, je „nezistená v krvi“. Pri určovaní koncentrácie vírusu je potrebné poznať citlivosť diagnostického systému, pretože ľudia, ktorí podstupujú antivírusovú terapiu, môžu vykonať analýzu. Stupeň citlivosti analyzátora by nemal byť nižší ako 50 IU / ml.
Keď sa zistí vírus, vykoná sa kvantitatívna analýza, inými slovami, vírusová záťaž, ktorá určuje koncentráciu vírusu v krvi a závažnosť ochorenia.
Vírusová RNA, ktorá je v určitom množstve krvi, je definovaná ako norma v pomere 1 ml na 1 centimeter kubický. Po kvantifikácii vírusovej záťaže je možné posúdiť stupeň infekcie ešte neinfikovaného prostredia. Akonáhle sa v krvi zvýši koncentrácia hepatitídy C, je potrebné izolovať ju od životného prostredia.
V počiatočných štádiách je dôležité zistiť stupeň koncentrácie hepatitídy, aby sa určilo tempo rehabilitácie. Ak je rýchlosť hepatitídy C prekročená o viac ako 800 tisíc IU / ml, je považovaná za príliš vysokú, s nárastom až na jeden milión - kritický. Ak je kvantitatívne rozmedzie menšie ako 400 tisíc IU / ml, predpokladá sa, že infekcia týchto pacientov bude menej pravdepodobná. Toto číslo objasňuje, že hepatitída C je prítomná v tele vo veľmi malých dávkach. Analýza nemohla určiť kvantitatívnu hodnotu RNA častíc vírusu, takže je niekoľkokrát opakovane označená pre presnú diagnózu.
Výsledky kvantitatívnej analýzy
Úlohou stanovenia množstva vírusovej záťaže v krvi pacienta je identifikácia stupňa infekcie u iných.
Analýza hepatitídy C umožňuje vyhodnotiť účinnosť antivírusovej liečby, úroveň infekčnosti a počet infikovaných tkanív.
Je dôležité zabrániť progresii ochorenia, včas prijať preventívne opatrenia, predpísať správnu liečbu založenú na diagnostike PCR. Ak je podľa výsledkov hladina vírusovej záťaže nižšia ako 400 tisíc IU / ml, potom môže byť koncentrácia minimálna, čo naznačuje možné úplné zotavenie. Norma pre pozitívny výsledok je absencia infekcie.
- Pozitívna odpoveď znamená infekciu v biologickom materiáli. Analýza umožňuje stanoviť presný počet infikovaných buniek.
- Negatívna odpoveď naznačuje absenciu infekcie, ktorá sa v tele starostlivo hľadá.
Metóda kvantitatívneho stanovenia hepatitídy C je presná a informatívna, vykonávaná na zariadeniach s vysokou citlivosťou. Rozlúštenie výsledkov analýzy vám umožní zistiť, či je infekcia a jej špecifickosť, vidieť najmenší počet infikovaných buniek na vysoko citlivých analyzátoroch.
Falošne pozitívne alebo opačné výsledky sú zriedkavo dané analýzou, častejšie sa to deje v štúdiách imunotestu.