Princíp. Počítanie leukocytov počas mikroskopie v určitom počte štvorcov počítacej komory a výpočet ich počtu v 1 litri krvi, berúc do úvahy riedenie krvi a objem počítacej komory.
Činidlo: 3-5% roztok kyseliny octovej, tónovaný na farbenie jadier leukocytov niekoľkými kvapkami roztoku metylénovej modrej. Roztok má modrú farbu, môže byť dlhodobo skladovaný.
Priebeh odhodlania. V suchej skúmavke zalejeme 0,4 ml roztoku kyseliny octovej. Z prsta sa odoberá 0,02 ml krvi (môžete použiť antikoagulačne stabilizovanú žilovú krv). Utrite špičku pipety, potom z nej vyfúknite krv na dno skúmavky, premiešajte, znovu vytáčajte a vyfúknite zmes krvi a činidla (pipetovanie). Skúmavku označte a nechajte ju odpočítavať. Zmes krvi skladujte s roztokom kyseliny octovej maximálne 2 - 4 hodiny.
Krv zriedená v skúmavke s kyselinou octovou, dôkladne premiešajte a naplňte ju počítacou komorou. Naplnená komora sa ponechá v horizontálnej polohe 1 minútu, aby sa usadili biele krvinky. Bez zmeny horizontálnej polohy kamery ho umiestnia na stôl mikroskopu a pri malom zväčšení (okulár 10 ×, objektív 8 ×) spočítajú biele krvinky na 100 veľkých štvorcoch, čo zodpovedá 1600 malým.
Pre väčšiu presnosť sú leukocyty počítané naprieč mriežkou vo veľkých štvorcoch, ktoré nie sú rozdelené do malých štvorcov a pásikov, začínajúc od ľavého horného rohu mriežky. Pre lepší kontrast stmavte zorné pole, upustite kondenzátor a zatvorte otvor. Bunky umiestnené vo vnútri štvorca a ležiace na ľubovoľných dvoch líniách sa počítajú, aby sa nepočítala rovnaká bunka dvakrát.
Výpočet počtu leukocytov sa vykoná podľa vzorca: t
kde X je počet leukocytov v 1 μl krvi; a - počet leukocytov na 100 veľkých štvorcoch; 20 - riedenie krvi; 100 je počet veľkých štvorcov; 250 je konverzný faktor na 1 μl, pretože objem jedného veľkého štvorca je 1/250 μl (strana štvorca je 1/5 mm, výška je 1/10 mm).
V praxi sa na výpočet počtu leukocytov v 1 μl krvi ich počet v 100 veľkých štvorcoch vynásobí 50 a v 1 litri - výsledná hodnota sa vynásobí číslom 106.
Poznámka. Pri počítaní leukocytov je chyba nevyhnutná v 6–8% prípadov.
- Pri veľkom počte normocytov v periférnej krvi sa počítajú v počte leukocytov (leukocytov aj normocytov - nukleových buniek). Aby sa správne stanovil počet leukocytov, z celkového počtu nukleovaných krvných buniek by sa mal odčítať počet normocytov.
- Zostávajúce chyby sú podobné tým, ktoré vznikajú pri výpočte počtu červených krviniek v počítacej komore.
Počet leukocytov
Metóda počítania vo fotoaparáte. Odoberanie a riedenie krvi produkovanej skúmavkovou metódou. Do skúmavky sa zavedie 0,4 ml riediacej tekutiny a 0,02 ml kapilárnej krvi (výhodne Vidalevskaya). Výsledné riedenie je prakticky považované za 1:20 3-5% roztok kyseliny octovej tónovaný metylénovou modrou sa obyčajne používa ako riedidlo (kyselina octová lyzuje erytrocyty, metylénová modrá zafarbuje jadrá leukocytov). Pred naplnením komory sa skúmavka Goryaeva so zriedenou krvou dôkladne pretrepe. Komora sa plní rovnakým spôsobom ako počítanie červených krviniek.
Leukocyty sú omnoho menšie ako erytrocyty (1 - 2 na veľké štvorce), preto sa pre presnosť počítajú v 100 veľkých štvorcoch (netriedených). Výpočet: 100 veľkých štvorcov (1600 malých) sa spočítalo leukocytom.
Pamätajúc na to, že objem malého štvorca je 1/4000 mm3 a krv sa 20-násobne zriedi, vypočíta sa počet leukocytov v 1 μl krvi: 4000 20 a vydelí 1600 = a x 1/2. Na získanie skutočného obsahu leukocytov v 1 μl krvi postačuje rozdeliť na polovicu počet získaný vo výpočte a pridať 2 nuly. Priemerná chyba metódy je ± 7%.
Presnejšie (2-3% chyba) a perfektný je počet leukocytov pomocou elektronických zariadení. Počítanie leukocytov v počítadlách častíc sa uskutočňuje podľa rovnakého princípu ako erytrocyty. Pre-blood sa zriedi a zmieša s akýmkoľvek činidlom, ktoré lýzuje červené krvinky. V automatickom analyzátore „Technicon“ sa používa roztok kyseliny octovej ako taký, v zariadeniach „Culter“ a „Celloskop“ - saponín alebo sapoglobín, ktoré sa pridávajú zriedené (1: 500, 1: 700) v izotonickom roztoku chloridu sodného (6 kvapiek na 20 ml). riedenie).
Počítanie krvných leukocytov sa vykonáva na farbených periférnych krvných náteroch.
Je lepšie počítať v najtenšom mieste blízko konca steru, najmenej 200 buniek (s výnimkou výraznej leukopénie) a potom odvodiť percentuálny pomer určitých typov bielych krviniek. Počítanie sa odporúča v rovnakom poradí: polovica buniek by sa mala počítať v hornej časti, polovica v dolnej časti mŕtvice, bez toho, aby sa pohybovala až na okraj a stred, cik-cak (3-4 polia v smere zdvihu, 3-4 polia v pravom uhle k stredu mŕtvice, potom 3-4 polia na stranu rovnobežne s okrajom, opäť v pravom uhle smerom nahor a tak ďalej na jednej strane).
Príprava náterov. Opatrne umyté a odtučnené sklo (jeho okraj) sa dotýka kvapky krvi v mieste vpichu injekcie. Brúsenie skla sa vykonáva tak, že sa brúsne sklo umiestni pod uhlom 45 ° k sklzu pred kvapkou. Potom, čo priniesol sklo do tejto kvapky, čakajú, kým sa krv šíri pozdĺž jej okraja, potom rýchlym pohybom vykonajú brúsne sklo vpred, pričom ho neberú preč od objektu predtým, než vyschne celú kvapku.
Správne urobený náter má žltkastú farbu (tenkú), nedosahuje okraje skla a končí v stope (fúzy).
Farbenie suchých škvŕn po predbežnej fixácii. Najlepšia fixácia sa dosiahne v absolútnom metylén-alkohole (3-5 minút) alebo v zmesi Nikiforova s rovnakými dielmi absolútneho etanolu a éteru (30 minút).
Medzi hlavné hematologické farby patria metylénová modrá a jej derivát - azurová I (metylénová azúrová) a azurová II (zmes rovnakých častí azúrovej I a metylénovej modrej), kyslá - vo vode rozpustná žltá eozín.
● Maľba Romanovského-Giemsu. Farba Romanovsky-Giemsa (vyrobená z výroby) má nasledujúce zloženie: Azur II - 3 g, vo vode rozpustný žltý eozín - 0,8 g, metylalkohol - 250 ml a glycerín - 250 ml. Pracovný náterový roztok sa pripraví rýchlosťou 1,5-2 kvapiek hotového náteru na 1 ml destilovanej vody. Farba sa naleje na škvrnu s vyššou vrstvou; čas farbenia - 30-35 minút Po tomto čase sa tampóny premyjú vodou a vysušia na vzduchu. V tejto metóde je možné dobre rozlíšiť jadro, ale neutrofilná granularita cytoplazmy je oveľa horšia, takže sa široko používa na farbenie periférneho krvného náteru.
Kombinované farbenie May-Grunwald-Romanovsky-Giemsa podľa Pappenheima. Hotové farbivo, fixačné činidlo May-Grunwald, čo je roztok eozínometylénovej modrej v metylénalkohole, sa napipetuje na fixovaný náter počas 3 minút. Po 3 minútach sa do náteru, ktorý kryje roztok, pridá rovnaké množstvo destilovanej vody a farbenie pokračuje ďalšiu 1 minútu. Potom sa farba zmyje a rozter sa vysuší na vzduchu. Potom sa vysušený náter premaľuje čerstvo pripraveným vodným roztokom Romanovského farby po dobu 8-15 minút. Táto metóda je považovaná za najlepšiu, najmä pre šmuhy punkcií kostnej drene.
Zvýšenie počtu leukocytov v periférnej krvi nad normálnu hladinu sa nazýva leukocytóza, pokles sa nazýva leukopénia. Leukocytóza (leukopénia) je zriedkavo charakterizovaná proporcionálnym zvýšením (poklesom) počtu leukocytov všetkých druhov, napríklad leukocytózou so zhrubnutím krvi. Vo väčšine prípadov dochádza k zvýšeniu počtu (poklesu) akéhokoľvek typu buniek. Zvýšenie alebo zníženie počtu jednotlivých typov leukocytov v krvi môže byť relatívne alebo absolútne v závislosti od celkového počtu leukocytov - normálne, zvýšené alebo znížené. Zmena počtu, pomeru jednotlivých foriem a morfológie leukocytov závisí od typu a virulencie patogénu, povahy, priebehu a rozsahu patologického procesu, individuálnej reakcie organizmu.
Spôsob počítania leukocytov v Goryaevovej komore
Biele krvinky - biele krvinky - hrajú hlavnú úlohu v antimikrobiálnej ochrane tela. Granulocyty fagocytujú mikróby a zničia ich pomocou enzýmov uzavretých v granulách, lymfocyty produkujú protilátky a poskytujú imunitnú odpoveď na telo.
Metóda stanovenia metódy skúmavky: nalejte do skúmavky 0,4 ml roztoku Trk (Türkova kvapalina obsahuje kyselinu octovú, aby sa zničili červené krvinky a metylénová modrá na farbenie jadier leukocytov). Použite kapilárnu pipetu na natiahnutie 0,02 ml krvi z čerstvej kvapky, jemne ju vyfúknite do skúmavky s činidlom a opláchnite pipetu. Dobre premiešajte. Súčasne je riedenie krvi 20-krát. Na konci kruhovej sklenenej tyčinky sa odoberie kvapka zriedenej krvi a aplikuje sa na okraj leštenej sklenenej komory.
Počítanie sa vykonáva na 100 veľkých neporušených štvorcoch, ktoré tvoria štyri. Použil sa malý nárast.
Odvodenie počítacieho vzorca číslo 1.
1. 100 štvorcov obsahuje 1600 malých štvorcov (16x 100)
2. Objem krvi nad malým štvorcom 1/4000 mm3
3. Zriedenie krvi 20-krát
Počet leukocytov v 1 μl krvi = pri -4000-20. = Ax 50
Napríklad: 100 leukocytov sa spočítalo na 100 veľkých štvorcoch mriežky Goryaev. V 1 μl krvi bude počet leukocytov 130 x 50 = 6500 alebo 6,5-103.
Na stanovenie obsahu leukocytov v 1 litri krvi sa musí počet leukocytov, vyjadrený v tisícoch, vynásobiť 10 9.
V našom príklade je počet leukocytov v 1 litri krvi 6,5-109.
194.48.155.245 © studopedia.ru nie je autorom materiálov, ktoré sú zverejnené. Ale poskytuje možnosť bezplatného použitia. Existuje porušenie autorských práv? Napíšte nám Kontaktujte nás.
Zakázať adBlock!
a obnoviť stránku (F5)
veľmi potrebné
Počet leukocytov v krvi
Leukocytóza môže byť absolútna (verná) a relatívna (redistributívna).
Absolútna leukocytóza sa pozoruje pri akútnych zápalových procesoch, nekróze tkaniva, akútnych bakteriálnych infekciách (s výnimkou týfusovej horúčky, brucelózy, tularémie atď.), Alergických stavoch, zhubných nádorov (s poškodením tkaniva), poranení hlavy a krvácaní v mozgu, diabete. uremická kóma, šok, akútna strata krvi, ako primárna reakcia - s radiačnou chorobou. Významné zvýšenie počtu leukocytov sa vyskytuje pri leukémii.
Relatívna (redistributívna) je dôsledkom prijatia leukocytov v prietoku krvi z orgánov, ktoré slúžia pre jej depot. Vyskytuje sa po jedle (leukocytóza jedla), horúcich a studených kúpeľoch, silných emóciách (vegetovaskulárna leukocytóza), intenzívnej svalovej práci (myogénna leukocytóza) atď.
Leukopénia. Leukopénia sa považuje za indikátor inhibície funkčnej schopnosti kostnej drene v dôsledku vystavenia toxickým látkam (arzén, benzén, atď.), Niektorým liekom (sulfanilamidy, chloramfenikol, butadión, imuno, cyklofosfamid atď.), Vírusom (chrípka, vírusová hepatitída), osýpky, atď.), mikróby (týfus, brucelóza atď.), ionizujúce žiarenie, röntgenové žiarenie a hypersplenizmus (zvýšená funkcia sleziny).
Leukocytóza a leukopénia sú zriedkavo charakterizované úmerným zvýšením (poklesom) celkového počtu leukocytov všetkých typov (napríklad leukocytóza so zhrubnutím krvi); vo väčšine prípadov dochádza k zvýšeniu (poklesu) počtu akéhokoľvek typu buniek, preto sa používajú termíny „neutrofília“, „neutropénia“, „lymfocytóza“, „lymfopénia“, „eozinofília“, „eozinopénia“, „monocytóza“, „monocytopénia“., "Basophilia."
Pri klinickom hodnotení zmien v počte leukocytov je veľký význam pripisovaný percentuálnemu pomeru jednotlivých foriem leukocytov, to znamená vzorca leukocytov.
Počet leukocytov v krvi zdravej osoby:
Relatívna suma Absolútna suma
Basofily ……………………….0-1% 0-0,0650 x 10 9 / l
Eozinofily …………………….0,5-5% 0,02-0,30 x 10 9 / l
Neutrofily: - myelocyty............ 0% chýba
- bodol... 1 až 6% 0,040 až 0,300 x 10 9 / l
- segmentované….47-72% 2,0-5,5 x 10 9 / l
Lymfocyty …………………………….19-37% 1,2-3,0 x 10 9 / l
Monocyty ………………………….3-11% 0,09-0,6 x 10 9 / l
Počítanie leukocytov sa vykonáva v farbených periférnych krvných náteroch. Pre správnu interpretáciu výsledkov štúdie leukocytárneho vzorca sa odporúča počítať v absolútnych množstvách, ale nie v relatívnych. Najbežnejšie metódy maľovania náterov Romanovsky-Giemsa, Pappenheim. Pri ponorení sa počíta najmenej 200 buniek a potom sa odvodí percentuálny pomer určitých typov leukocytov. Analýza leukogramu s prihliadnutím na ďalšie parametre krvi a klinický obraz je hodnotnou metódou vyšetrenia, pomáha pri diagnostike a stanovení prognózy ochorenia.
Hlavné príčiny neutrofílie.
Akútne bakteriálne infekcie - lokalizované a generalizované.
Zápal alebo nekróza tkaniva.
Liečivé účinky (kortikosteroidy).
Hlavné príčiny neutropénie.
Infekcie - bakteriálne (brušný týfus, brucelóza, tularémia, paratyfatická horúčka) a vírusové (infekčná hepatitída, osýpky, chrípka, rubeola a iné).
Myelotoxické účinky a potlačenie granulocytopoézy (ionizujúce žiarenie; chemické látky - benzén, anilín, DDT; liečivé účinky - cytostatiká a imunosupresíva; vitamín B)12-anémia s nedostatkom kyseliny listovej, akútna aleukemická leukémia, aplastická anémia).
Expozícia protilátok (imunitné formy) - precitlivenosť na lieky, autoimunitné ochorenia (SLE, reumatoidná artritída, chronická lymfatická leukémia), izoimunitné prejavy (hemolytické ochorenie novorodenca).
Redistribúcia a depozícia v orgánoch - šokové stavy, ochorenia so splenomegáliou a hypersplenizmus.
Dedičné formy (familiárna benígna chronická neutropénia).
Hlavné príčiny eozinofílie.
Parazitické invázie (trichinóza).
Chronické kožné lézie - psoriáza, pemfigus, ekzém.
Nádory (eozinofilné varianty leukémie).
Iné ochorenia - fibroplastická endokarditída Lefflera, šarlach.
Vo fáze obnovy infekcií a zápalových ochorení (priaznivé prognostické príznaky).
Príčiny eozinopénie (aneosinofília).
Zvýšená aktivita adrenokortikosteroidov v tele.
Hlavné príčiny bazofílie:
Chronická myeloidná leukémia a erytrémia.
Hlavné príčiny monocytózy.
Subakútne a chronické bakteriálne infekcie.
Parazitárne infekcie - leishmanióza, malária.
Hemoblastóza - monocytová leukémia, lymfogranulomatóza, lymfómy.
Ďalšími stavmi sú SLE, sarkoidóza, reumatoidná artritída, infekčná monocytóza; v období zotavovania sa z infekcií, pri opúšťaní agranulocytózy, po splenektómii.
Zníženie počtu monocytov je dôležité najmä pri hodnotení pomeru lymfocytov a monocytov pri pľúcnej tuberkulóze.
Hlavné príčiny lymfocytózy.
Infekcie - akútne vírusové (infekčná mononukleóza, osýpky, rubeola, kuracie kiahne), chronické bakteriálne (tuberkulóza, syfilis, brucelóza), protozoálne (toxoplazmóza).
Hemoblastóza (lymfocytová leukémia, lymfóm).
Iné ochorenia - hypertyreóza, Addisonova choroba, vitamín B12-anémie z nedostatku folikulov, hypo- a aplastickej anémie.
Lymfocytopénia sa pozoruje pri SLE, Hodgkinovej chorobe, rozšírenej tuberkulóze lymfatických uzlín, v terminálnom štádiu zlyhania obličiek, akútnej chorobe z ožiarenia, stavoch imunodeficiencie, pri užívaní glukokortikoidov.
Zvýšenie alebo zníženie počtu určitých typov leukocytov v krvi môže byť relatívne alebo absolútne. Ak sa uskutoční iba percento určitého typu zmien bielych krviniek, potom sa uskutoční relatívna neutrofília, relatívna eozinopénia atď. Zvýšenie alebo zníženie absolútneho obsahu akéhokoľvek typu leukocytov, tj počet týchto buniek na jednotku objemu krvi, sa nazýva absolútna neutrofília, absolútna eozinopénia atď.
Posunutie vzorca doľava (zvýšenie počtu mladých foriem neutrofilov) je známkou zápalu alebo nekrotického procesu v tele.
Posun vzorca leukocytov doprava je charakteristický pre radiačnú chorobu a vitamín B12-anémia s nedostatkom kyseliny listovej.
Neprítomnosť alebo významné zníženie počtu všetkých typov granulovaných leukocytov - granulocytov (neutrofilov, eozinofilov, bazofilov) sa označuje termínom agranulocytóza. V závislosti od mechanizmu výskytu sa rozlišujú myelotoxické (účinky ionizujúceho žiarenia, cytostatický príjem) a imunitné (haptén a autoimunitné agranulocytózy).
Leukocyty (leukocytus)
Leukocyty. Kvantitatívne stanovenie leukocytov. Počítanie leukocytov pomocou kamery Goryaeva. Kvantitatívny obsah leukocytov. Leukocytóza.
Biele krvinky
Počet leukocytov v krvi závisí jednak od rýchlosti ich tvorby, jednak od ich mobilizácie z kostnej drene, ako aj od ich využitia a migrácie do tkanív (do lézií), odobratia pľúc a sleziny. Tieto procesy sú zase ovplyvnené množstvom fyziologických faktorov, a preto počet leukocytov v krvi zdravého človeka podlieha výkyvom: stúpa do konca dňa, počas fyzickej námahy, emocionálneho stresu, príjmu bielkovinových potravín a prudkých zmien teploty okolia.
Kvantitatívne stanovenie leukocytov
Leukocyty sa spočítajú pomocou kamery Goryaev a pomocou automatických počítadiel.
Počítanie leukocytov pomocou kamery Goryaeva
In vitro metódou odoberania krvi krvným leukocytom:
- Do skúmavky sa naleje 0,4 ml 3 až 5% roztoku kyseliny octovej s metylénovou modrou. Použite kapilárnu pipetu na odobratie 20 μl krvi z čerstvej kvapky (zriedenie 20-krát), opatrne ju vyfúknite do skúmavky s činidlom a opláchnite pipetu. Dobre premiešajte;
- čisté a suché krycie sklo sa vtiera do komory tak, aby sa v mieste dotyku vytvorili krúžky dúhy;
- krv zriedenú v skúmavke, dobre premiešajte. Koniec kruhovej sklenenej tyčinky berie kvapku krvi a privádza ju na okraj lešteného skla komory;
- po naplnení komory sa nechá 1 minútu v pokoji na sedimentáciu leukocytov;
- Leukocyty sa berú do úvahy pri malom zväčšení (cieľ × 8 alebo × 9, okuláre × 10 alebo × 15) so zatemneným zorným poľom (so zníženým kondenzátorom alebo zúženou membránou);
- pre uspokojivé výsledky sa leukocyty počítajú na 100 veľkých štvorcoch.
Poznajúc objem veľkého štvorca a stupeň riedenia krvi, nájdite počet leukocytov v 1 μl a 1 l krvi. Strana veľkého štvorca je 1/5 mm, plocha je 1/25 mm2, objem priestoru nad týmto štvorcom je 1/250 mm3.
Vzorec pre počítanie bielych krviniek:
kde B je počet leukocytov v 100 veľkých štvorcoch;
P - stupeň zriedenia (20).
Počet leukocytov
Norma: 4,0–9,0 × 10 9 / L
Zvýšenie počtu leukocytov nad 9,0 x 10 9 / l sa nazýva
leukocytóza, pokles ich počtu pod 4,0 × 10 9 / l - leukopénia. Normálne však môže byť dokonca 3,5 × 109 v 1 1 leukocytov pre množstvo jedincov. Podľa literatúry majú títo ľudia zvýšenú imunitnú odolnosť a je menej pravdepodobné, že ochorejú, čo sa zdá byť spôsobené potrebou imunitnej reakcie, ktorá má rezervu leukocytov v tkanivách, kde je 50-60 krát viac ako v krvnom obehu. Je zrejmé, že u zdravých jedincov s nízkym počtom bielych krviniek v periférnej krvi sa ich rezervy v tkanivách zodpovedajúcim spôsobom zvyšujú. Tento fenomén sa vysvetľuje dedičným a rodinným charakterom alebo zvýšením vplyvu parasympatického nervového systému.
Leukopénia môže byť funkčná a organická.
Funkčná leukopénia je spojená s dysreguláciou tvorby krvi a je pozorovaná:
- s niektorými bakteriálnymi a vírusovými infekciami (brušný týfus, chrípka, kiahne, rubeola, Botkinova choroba, osýpky);
- pôsobením liekov (sulfónamidov, analgetík, antikonvulzív, antitroidných, cytostatických a iných liekov);
- počas svalovej práce, zavedenie cudzieho proteínu, nervové a teplotné účinky, hladovanie, hypotonické stavy;
- falošná leukocytopénia môže byť spojená s agregáciou leukocytov počas dlhodobého skladovania krvi pri izbovej teplote (viac ako 4 hodiny).
Organická leukopénia vyplývajúca z aplázie kostnej drene a jej nahradenia tukovým tkanivom nastáva, keď: t
- aplastickú anémiu;
- agranulocytóza;
- leukopenická leukémia;
- niektoré formy Hodgkinovej choroby;
- ionizujúce žiarenie;
- hypersplenizmus (primárny a sekundárny);
- ochorenia kolagénu.
leukocytóza
Leukocytóza je reakcia hematopoetického systému na účinky
exogénne a endogénne faktory. Existujú fyziologické a patologické leukocytózy.
Fyziologická leukocytóza je:
- tráviace - po jedle, najmä s vysokým obsahom proteínov; počet leukocytov nepresahuje 10,0 - 12,0 × 10 9 / l a po 3 - 4 hodinách sa vracia do normálu;
- s emocionálnym stresom (adrenalínom), ťažkou fyzickou námahou, chladením, nadmerným slnečným žiarením (spálenie slnkom), podávaním množstva hormónov (katecholamínov, glukokortikosteroidov atď.), v druhej polovici tehotenstva, počas menštruácie a kvôli nerovnomernej distribúcii leukocytov v krvi v hlavnom prúde.
Patologická leukocytóza je rozdelená na absolútnu a relatívnu.
Absolútna leukocytóza - zvýšenie počtu leukocytov v krvi až na niekoľko sto tisíc (100,0–600,0 × 10 9 / l a viac).
- Najčastejšie pozorované pri leukémii: pri chronickej leukémii - v 98-100% prípadov, pri akútnej leukémii - v 50-60%. Zmena pomeru leukocytových buniek v kostnej dreni a vpichu krvi slúži ako základ pre diagnostiku leukémie.
Pozoruje sa relatívna leukocytóza:
- akútne zápalové a infekčné procesy, s výnimkou týfusovej horúčky, chrípky, kiahní, rubeoly, Botkinovej choroby, osýpok. Najväčšia leukocytóza (až do 70,0–80,0 × 10 9 / l) sa pozoruje pri sepse;
- pod vplyvom toxických látok (jedov hmyzu, endotoxínov), ionizujúceho žiarenia (bezprostredne po ožiarení);
- v dôsledku účinku kortikosteroidov, adrenalínu, histamínu, acetylcholínu a digitálisových prípravkov;
- s rozpadom tkaniva (nekróza), infarktom myokardu, trombózou periférnych artérií s rozvojom gangrény, popáleninami, pleurálnym výpotkom, perikarditídou, urémiou, hepatálnou kómou;
- významná strata krvi pri poraneniach, vnútornom, gynekologickom a inom krvácaní.
Zvýšenie počtu leukocytov pri infekčných ochoreniach je vo väčšine prípadov sprevádzané posunom vzorca leukocytov vľavo
Počet leukocytov a počet leukocytov.
Na počítanie leukocytov sa krv zriedi v mixéri alebo v skúmavkách. Na tento účel sa použije 3-5% roztok kyseliny octovej (na zničenie červených krviniek), sfarbený akýmkoľvek farbivom anilínu (na farbenie jadier leukocytov). Počítadlo sa naplní rovnakým spôsobom ako pri počítaní červených krviniek. Leukocyty sa počítajú na 100 veľkých štvorcoch. V mriežke Goryaev je vhodné počítať ich v neprerušených štvorcoch (na nich je 100). Vzhľadom na riedenie krvi a objemu tekutiny nad štvorcami vypočítajte konštantný násobiteľ. Pri plemene 20 krát to je 50.
Keď pracujete s testovacími skúmavkami, nalejte do nich 0,38 ml tekutiny a do nej uvoľnite 0,02 ml krvi. Na výpočet automatického počítania v skúmavkách sa červené krvinky hemolyzujú saponínom. Normálny počet bielych krviniek je 4,3 • 109-11,3 • 10 9 / l alebo 4300-11 300 v 1 μl krvi.
Počet leukocytov počítaný v zafarbených škvrnách.
Dobrý náter spĺňa nasledujúce požiadavky: je tenký a tvarované prvky v ňom ležia v jednej vrstve; v tomto prípade je škvrna žltá a priesvitná. Dobrý rozter je jednotný a bunky nie sú poškodené rozmazaním. Aby mohla krv rovnomerne ležať na skle, je odmasťovaná spaľovaním plynového horáka nad plameňom alebo uchovávaná v zmesi alkoholu a éteru. S koncom pohára sa dotýkajú čerstvo uvoľnenej malej kvapky krvi a bez meškania ju rozprestierajú na pohári. Pred farbením sa rozter fixuje ponorením do metanolu počas 3 minút, v etanole alebo jeho zmesi s éterom počas 30 minút. Existuje mnoho ďalších fixátorov. Tampón vysušený po fixácii sa naplní farbivom.
Na rozlíšenie krvných buniek (definície vzorca leukocytov) sa uchyľujú k diferenciálnemu farbeniu. Najrozšírenejšie farbivo Romanovsky-Giemsa. Toto farbivo je zmesou slabo kyslých (eozínových) a slabo alkalických (azure II) farieb. Bunky a ich časti v závislosti od reakcie média vnímajú jednu alebo inú zložku farbiva v nich: kyslé (bazofilné) látky sú zafarbené azúrovo modré, alkalické (oxyfilné) farebné eozíny červené; Neutrálne vnímanie oboch farieb a fialová.
Vzorec leukocytov označuje percento jednotlivých foriem krvných leukocytov.
Pozn.: Pre dostatočne presný výpočet je potrebné vidieť najmenej 200 bielych krviniek.
Počítanie sa vykonáva ponorným systémom. Vzhľadom k tomu, že bunky sú nerovnomerne umiestnené v stere (väčšie idú na hrany), je dôležité dodržiavať taký poriadok pohybu na stere, v ktorom by sa jeho hrany a stredná oblasť zobrazovali rovnako. Použije sa jedna z dvoch metód pohybu: jedna z nich posúva ťah od horného okraja k spodnému, posunie ho o 2 až 3 zorné polia pozdĺž okraja, potom ide opačným smerom k hornému okraju atď. V druhej metóde sa pohybujú od okraja o 5 - 6 políčok do stredu mŕtvice, potom rovnaké množstvo do strany, potom späť na okraj, odsunúť niekoľko políčok nabok a opakovať pohyb znova, kým sa nepočíta 50 buniek. Zobraziť 4 z týchto miest v 4 rohoch šmuhy. Počet 200 buniek, počet je rozdelený na polovicu a určí sa počet každého typu bielych krviniek.
Leukocyty sú prvkami krvi, ktoré rýchlo reagujú na rôzne vonkajšie vplyvy a zmeny v tele. Stanovenie celkového počtu leukocytov môže mať veľkú diagnostickú hodnotu, pretože odhaľuje stav orgánov tvoriacich krv alebo ich reakciu na škodlivé účinky. Zvýšenie počtu leukocytov - leukocytóza - je výsledkom aktivácie leukopoézy, pokles ich počtu - leukopénia - môže závisieť od inhibície orgánov tvoriacich krv, ich deplécie a zvýšeného rozpadu leukocytov pôsobením protilátok proti leukocytom 1. Neutrofily. Najviac variabilnou skupinou leukocytov sú neutrofily, ktorých počet sa zvyšuje s mnohými infekciami, intoxikáciou a rozpadom tkaniva.
Charakteristickým znakom aktívnej neutropozície nie je len zvýšenie celkového počtu neutrofilov v krvi, ale aj objavenie sa nezrelých foriem v ňom: zvyšuje sa počet buniek nesúcich bodnutie, objavujú sa mladé neutrofily, niekedy dokonca aj myelocyty. Toto "omladenie" neutrofilnej kompozície sa nazýva posun leukocytov doľava. Ochranná úloha neutrofilov je určená ich fagocytárnou funkciou, baktericídnym účinkom a uvoľňovaním proteolytických enzýmov, ktoré podporujú resorpciu nekrotického tkaniva a hojenie rán.
Najčastejšie dochádza k regeneračnému posunu v prítomnosti akéhokoľvek zápalového procesu alebo zamerania nekrózy. Veľmi ostrý ľavý posun na promyelocyty a dokonca myeloblasty s významnou leukocytózou sa nazývajú leukemoidná reakcia. Pokles počtu neutrofilov - absolútna neutropénia - nastáva, keď kostná dreň inhibuje expozíciu toxínov niektorými mikroorganizmami (pôvodcami tyfusovej horúčky, brucelózy atď.) A vírusmi, ionizujúcim žiarením, radom liekov.
2. Lymfocyty. Lymfocytóza sa pozoruje v období zotavovania sa z akútnych infekčných ochorení, infekčnej mononukleózy, infekčnej lymfocytózy, lymfocytovej leukémie, rubeoly, brucelózy, tyreotoxikózy.
Absolútna lymfopénia sa vyskytuje pri radiačnej chorobe, systémových léziách lymfatického systému: lymfóme, lymfosarkóme.
3. Eozinofily. Nachádzajú sa v krvi v relatívne malých množstvách (vyskytujú sa najmä v tkanivách), ale ich počet sa zvyšuje, niekedy výrazne, pri alergických procesoch (sérová choroba, bronchiálna astma), helmintické invázie a svrbivé dermatózy.
Pokles počtu eozinofilov - eozinopénie - až do ich úplného vymiznutia sa pozoruje pri sepsi, ťažkých formách tuberkulózy, týfusu a ťažkej intoxikácii.
4. Basofily. Sú nosičmi dôležitých mediátorov tkanivového metabolizmu (krvné ekvivalenty buniek tukového tkaniva). Keď je organizmus senzibilizovaný, ich počet sa zvyšuje a keď sa alergén znovu zavádza, v dôsledku ich rozpadu prudko klesá.
5. Monocyty. Zvýšenie počtu monocytov - monocytózy - je indikátorom vývoja imunitných procesov. Monocyty sa rozpoznávajú ako analógy tkanivových makrofágov. Monocyt sa nachádza v rade chronických ochorení (chroniosepsa, tuberkulóza, syfilis). Monocytopénia sa niekedy pozoruje pri ťažkých septických, hypertoxických formách týfovej horúčky.
AGranulocyty. Charakteristickým znakom agranulocytov sú nesegmentované jadro a bazofilná (modrá) cytoplazma.
Lymfocyty sú najmenšie veľkosti leukocytov. Jadro je okrúhle, oválne alebo v tvare fazule; zaberá väčšinu bunky, intenzívne sfarbenej. Cytoplazma väčšiny lymfocytov s úzkym okrajom obklopuje jadro, je sfarbená vo svetlomodrej farbe a je vyčerená do jadra.
Monocyte je najväčší z krvných buniek. Veľké jadro nepravidelného tvaru a relatívne svetlej farby. Cytoplazma je sivohnedá, dymovo sfarbená farba, nie je vyčerená do jadra
Okrem týchto buniek je zriedkavá aj v normálnej krvi a pri ochoreniach sa často môžu vyskytnúť plazmatické bunky. Vyznačujú sa excentricky umiestneným hustým jadrom, často s kolesovou štruktúrou. Počet týchto buniek sa zvyšuje s určitými infekčnými chorobami, sepsou rán a mnohopočetným myelómom.
Pri výpočte vzorca leukocytov sa nevenuje pozornosť len kvantitatívnym posunom v ňom, ale aj kvalitatívnym zmenám prvkov formy. Predtým boli zaznamenané degeneratívne zmeny v leukocytoch. Pri ťažkej intoxikácii sa granularita neutrofilov stáva hojnou, veľkou, intenzívne sfarbenou a nazýva sa toxická (alebo toxogénna). Niekedy sa v krvných náteroch nachádzajú krvné škvrny, ktoré sú natreté ako jadrová látka leukocytov. Jedná sa o tzv. Botkinove - Humprechtove tiene - zvyšky jadrového chromatínu, čo poukazuje na zvýšenú krehkosť leukocytov, čo vedie k ich rozpadu - leukocytolýza
99. Metódy stanovenia krvnej skupiny, koncepcia Rh faktora.
1. Stanovenie krvnej skupiny podľa štandardných sér: t
Vyžaduje sa nasledujúce vybavenie:
o dve skupiny štandardných skupín hemaglutinačných sérov I (0), II (A), III (B) dvoch rôznych sérií a jednej liekovky séra IV (AB)
o fľašu s izotonickým roztokom chloridu sodného pipetou
o Umyte čistú, suchú platňu
o sklíčka
o sterilné ihly na oštepy na prepichnutie mäsa prsta
o sterilné gázové guličky,
Štandardné séra na stanovenie krvnej skupiny podľa systému ABO sa vyrábajú so špecifickým farebným označením.: I (0) - bezfarebný, II (A) - modrá, III (B) - červená, IV (AB) - žltá. Sérum skladované pri teplote 4 až 10 ° C. Sérum by malo byť ľahké a transparentné. Prítomnosť vločiek, sedimentu, zakalenia sú príznakmi nevhodné pre sérum. Prvé príznaky aglutinácie by sa mali objaviť najneskôr do 30 sekúnd.
Platňa je rozdelená na 4 štvorce farebnou ceruzkou a v smere hodinových ručičiek sú označené štvorce I (0), II (A), III (B). Veľká kvapka séra dvoch skupín I (0), II (A), W (B) sa vloží do zodpovedajúceho štvorca doštičky pipetou. Podložka na prst je ošetrená alkoholom a na koži sa prepichne ihla. Prvá kvapka krvi sa odstráni gázovou guľôčkou, následné kvapky v rôznych častiach sklíčka sa postupne aplikujú na kvapky séra a dôkladne sa premiešajú. Kvapka krvi by mala byť 5-10 krát menšia ako kvapka séra. Potom sa doska dôkladne premieša krv so sérom. Predbežné výsledky sa vyhodnotia po 3 minútach, po ktorých sa pridá kvapka izotonického roztoku chloridu sodného, znovu sa premieša trepaním doštičky a po 5 minútach sa vykoná konečné vyhodnotenie aglutinačnej reakcie.
S pozitívnym izohemaglutinačným testom sa vločky a jadrá z prilepených červených krviniek nerozlišujú pri pridávaní izotonického roztoku chloridu sodného a miešaní.
Keď negatívne reakcie kvapky séra na doske transparentné, rovnomerne ružové, neobsahujú vločky a zrná.
Sú možné nasledujúce 4 kombinácie aglutinačných reakcií so štandardnými sérami skupín I (0), II (A), III (B).
v Všetky 3 séra v oboch sériách aglutinujú. Krvný test -
Skupina I.
v Izohemaglutinačná reakcia negatívna so sérovými skupinami P (A) oboch sérií a pozitívnych so skupinami I (0) a III (B) v sére. Krvný test -
II (A).
v Izohemagglutinačná reakcia je negatívna so sérom skupiny III (B) v sére aj pozitívnom sére skupín I (0) a II (A). Krvný test -
III (B).
v Skupiny séra I (0), II (A), III (B) vykazujú pozitívnu reakciu v oboch sériách. Krv patrí do skupiny IV (AB). Predtým, než sa takýto záver urobí, je však potrebné vykonať isohemaglutinačnú reakciu so štandardným sérom IV (AB) skupiny použitím rovnakého postupu. Negatívny negatívny test umožňuje konečne priradiť testovanú krv skupine IV (AB).
2. Koncepcia faktora Rh.
V erytrocytoch sa našiel ďalší antigén (aglutinogén), ktorý sa nazýval Rh faktor. Všetci ľudia sú rozdelení do jedincov s Rh-pozitívnou (Rh +) a Rh-negatívnou (Rh) krvou. Bolo zistené, že 85% ľudí v erytrocytoch obsahuje Rh faktor, t.j. ich krv je Rh-pozitívna a 15% ju neobsahuje, t.j. krv týchto ľudí je Rh-negatívna. Na Rh faktor (Rh-antigén) sa normálne v krvi nenachádza žiadny anti-Rh-aglutinín (hotové protilátky). Takéto protilátky sa objavujú v krvnom sére len ako výsledok imunizácie osoby s Rh-negatívnou krvou Rh-pozitívnymi červenými krvinkami. K takejto imunizácii dochádza v dôsledku opakovaných transfúzií Rh-pozitívnej krvi Rh-negatívnemu príjemcovi alebo počas tehotenstva ženy s Rh-negatívnou Rh-pozitívnou krvou. Takýmto spôsobom imunizovaní sa ľudia stávajú senzibilizovanými: keď sa transfúzia Rh-pozitívnou krvou vyvinie vážna komplikácia - krvný transfúzny šok.
Počítanie počtu leukocytov a krvných doštičiek
Faktory ovplyvňujúce správnosť štúdie bielych krviniek
- dlhodobé skladovanie krvi pri izbovej teplote
Normy obsahu leukocytov v krvi
Vek Počet leukocytov
- 1 deň 11,6 - 22,0
- 1 týždeň 8.1.- 14.3
- 1 mesiac 7.6 - 12.4
- Dospelí 4,0 - 9,0
Spôsoby stanovenia počtu leukocytov v krvi.
- Počítanie počtu leukocytov v počítacej komore
- Počítanie leukocytov v hematologických analyzátoroch
Stanovenie počtu leukocytov v počítacej komore.
- Počítanie leukocytov pod mikroskopom sa uskutočňuje po lýze červených krviniek v 100 veľkých štvorcoch počítacej mriežky a prepočítava sa na 1 liter krvi na základe objemu štvorcov a zriedenia krvi. Počet leukocytov sa má urobiť do 2-4 hodín po odbere krvi.
- Ak sú v periférnej krvi červené krvinky, nie sú lyzované a spočítané spolu s leukocytmi. V tomto prípade sa na stanovenie skutočného počtu leukocytov odčíta celkový počet buniek v červenom rade od celkového počtu spočítaných buniek.
- Napríklad: Celkový počet leukocytov vo výpočte v komore (alebo analyzátore) -45x109 / l. Pri výpočte vzorca leukocytov sa zistilo, že na 100 leukocytov je prítomných 50 erytroblastov (normoblastov).
Vypočítame skutočný počet leukocytov v krvi:
150 buniek - 45 x 109 / l
100 buniek (leukocyty) - X
X = 100 * 45 * 10 / l / 150 = 30 x 10 / l
Skutočný počet leukocytov v krvi je teda 30 x 109 / l.
Hlavné zdroje chýb pri výpočte leukocytov v komore:
- Nesprávny pomer objemu krvi a kyseliny octovej v skúmavke.
- Nesprávne pripravený roztok kyseliny octovej (v koncentrácii vyššej ako 5%, niektoré leukocyty môžu lýzovať, čo povedie k podhodnoteniu výsledku).
- Predĺžená expozícia vzorky pri teplotách nad 28 ° C, ktorá môže urýchliť lýzu leukocytov vo vzorke a viesť k podhodnoteniu výsledku.
- Nesprávne vyplnenie komory Goryaev. Rovnako ako pri výpočte červených krviniek, musí byť kamera ponechaná 1 minútu, aby sa bunky usadili.
- Kamera Goryaev nebola po predchádzajúcej definícii dostatočne umytá. Leukocyty zostávajúce v komore môžu nadhodnotiť výsledky analýzy.
Metódy počítania krvných doštičiek
- v počítacej komore
Každá skupina metód má svoje výhody a nevýhody.
- Počítanie krvných doštičiek v komore je dostatočne presné, nevyžaduje výpočet počtu červených krviniek. Na druhej strane je táto metóda pracnejšia, pretože doštičky v natívnej forme predstavujú malé a slabo kontrastné prvky. Nevýhodou tohto spôsobu je počítanie krvných doštičiek v nasledujúcich hodinách po užití krvi.
- Stanovenie počtu krvných doštičiek v krvných náteroch je výrazne nižšie v presnosti na komorovú metódu alebo automatické počítadlá. Chyby pri počítaní v krvných náteroch môžu byť spôsobené zlou kvalitou rozmazania a súvisiacou nerovnomernou distribúciou krvných doštičiek, nepresným určením počtu červených krviniek. Významnou nevýhodou tohto spôsobu je potreba súčasne počítať krvné doštičky a krvinky. Výhodou je schopnosť študovať krvné doštičky kedykoľvek, bez ohľadu na čas odberu krvi.
- Metóda stanovenia krvných doštičiek pomocou hematologického analyzátora umožňuje presne určiť počet krvných doštičiek, ich priemerný objem a distribúciu podľa objemu.
Jednotný spôsob počítania počtu krvných leukocytov v počítacej komore;
Spôsoby počítania počtu leukocytov v krvi
Zjednotené 2 metódy na stanovenie počtu leukocytov v krvi:
- v počítacej komore;
- pomocou hematologických analyzátorov.
Princíp Leukocyty sa počítajú pod mikroskopom v určitom objeme počítacej komory s konštantným riedením krvi po zničení červených krviniek.
Činidlo: 3-5% roztok kyseliny octovej, sfarbený vodným roztokom metylénovej modrej na zafarbenie jadier leukocytov a uľahčenie ich počítania. Roztok je modro sfarbený, stabilný pri skladovaní.
Špeciálne vybavenie: mikroskop, počítacia komora Goryaeva.
Priebeh odhodlania. Pomocou meracej pipety alebo automatického dávkovača sa presne naleje 0,4 ml roztoku kyseliny octovej do skúmavky na aglutináciu a pridá sa 0,02 ml (kapilára Sali) krvi. Opláchnite kapiláru niekoľkokrát roztokom kyseliny a premiešajte obsah skúmavky. To má za následok 20-násobné zriedenie krvi. Nechajte až do počítania, ale nie viac ako 2-4 hodiny po odbere krvi. Komora Goryaev je pripravená na prácu utieraním krycieho skla tak, aby sa objavili prstence dúhy. Opäť dôkladne pretrepte obsah skúmavky a naplňte Goryevovu komoru touto zmesou pomocou Pasteurovej pipety alebo sklenenej tyčinky s roztaveným koncom. Naplnenú počítaciu komoru nechajte 1 minútu v horizontálnej polohe na sedimentáciu leukocytov. Leukocyty sa spočítajú v 100 veľkých negrafovaných štvorcoch počítacej komory za podmienok: kondenzátor sa zníži, okulár 10x alebo 15x, šošovka 8x. Počítanie začína od ľavého horného rohu mriežky kamery Goryaev. Pri počítaní leukocytov sa riadia pravidlom: všetky bunky vo vnútri štvorca a na deliacich čiarách sa počítajú, ak väčšinou idú dovnútra námestia. Bunky prelínajúce deliacu čiaru presne na polovicu sa počítajú len na dvoch stranách štvorca (napríklad vľavo a hore).
Výpočet. Pri výpočte počtu leukocytov v 1 μl krvi použite vzorec: t
- počet leukocytov v 1 ml krvi;
a - počet leukocytov vypočítaný na 100 veľkých štvorcoch;
4000 - objemový konverzný faktor na 1 µl, založený na objeme malého štvorca, ktorým je µl;
1600 - počet počítaných malých štvorcov;
20 - riedenie krvi.
Na prevod počtu leukocytov v jednotkách SI (v 1 l krvi) sa výsledná hodnota vynásobí číslom 106.
Prakticky na stanovenie obsahu leukocytov v 1 1 krvi sa počet leukocytov, vypočítaný v 100 veľkých štvorcoch počítacej komory, vynásobí 50, vydelený 1000 (to znamená, že sa prenesie na čiarku 3 znamienkami vľavo) a vynásobí 10,9.
Metódy počítania leukocytov v Goryaevovej komore, normy indikátorov a odchýlky
Komora Goryaev je zariadenie na meranie počtu buniek a častíc v určitom objeme tekutiny (krv, moč), pozostávajúce zo špeciálneho hrubého predmetu a krycieho skla.
Sklenená šmýkačka má v strede zapustenú oblasť, na ktorej je nanesená mriežka z 225 veľkých štvorcov. Z týchto štvorcov je 25 rovnomerne rozdelených na 16 menších štvorcov. Vďaka tomuto objemu siete sa výpočet vykonáva presnejšie ako v iných ručných počítacích zariadeniach.
Služba Fotoaparát
Po použití nástroja sa sklíčko dezinfikuje ponorením do 4% roztoku formalínu na jednu hodinu alebo do 70% roztoku etanolu na pol hodiny. Potom sa komora dôkladne premyje destilovanou vodou. Prebytočná kvapalina sa odstráni mäkkou handričkou. Stojí za to venovať pozornosť tomu, že fotoaparát nemôže byť utretý vatovým tampónom kvôli vláknam, ktoré sa na ňom prilepia. Skladované sklo na suchom mieste.
Počas používania kamery sa vypočítajú PE, ktoré sa nachádzajú vo vnútri štvorca mriežky a na hornom a ľavom okraji jeho obvodu. V tomto prípade nie sú zahrnuté častice, ktoré sa pri výpočte tejto bunky dotýkajú pravého a spodného riadku obvodu.
Stanovenie leukocytov v krvi
Spôsob počítania leukocytov
Výpočet počtu leukocytov začína zriedením krvi v 3 až 5% roztoku kyseliny etanoovej metylovou modrou 20-krát. Pred použitím utrite materiál utrite gázou.
Sklo musí byť utreté skôr, ako sa objavia Newtonove farebné krúžky. Potom sa komora naplní zriedenou krvou, zatiaľ čo prvé dve kvapky sa uvoľnia na filtračný papier. Kvapalina vstupuje do komory v dôsledku kapilárnej vlastnosti vody. Pri plnení je dôležité dbať na to, aby sa do drážok nedostalo nič. Ak k tomu dôjde, kvapalina sa jemne odstráni filtračným papierom. Potom nechávajte jednu minútu na mriežke a počkajte, kým FE zastaví svoj pohyb.
Počet bielych krviniek sa vykonáva v rámci sto veľkých štvorcov pri malom zväčšení, to znamená s okulárom 10x a objektívom 8x, podľa Egorovovho pravidla. Výsledná hodnota sa použije vo vzorci.
X = (n × 250 × 20) / 100 alebo X = n × 50
X - počet leukocytov.
n je číslo získané počítaním v komore.
Stanoví sa počet leukocytov, pričom sa berie do úvahy počet veľkých štvorcov mriežky - 100 a riedenie krvi - 20.
Ako je počet leukocytov
Rýchlosť a abnormality leukocytov
Rýchlosť leukocytov u ľudí je 4,0 - 9,0 × 10⁹ / l. Alebo, inak, približne 6 000 bielych krviniek sa nachádza v 1 kubických mm krvi.
Vonkajšie fyziologické faktory môžu ovplyvniť odchýlky od normy:
- príjem potravy pred darovaním krvi;
- stres;
- tehotenstva alebo menštruácie u žien;
- hypotermia alebo prehriatie;
- veľká fyzická námaha pred testovaním.
Ak počet bielych krviniek prekročí 9,0 × 10⁹ / l (leukocyty sú zvýšené), tento stav sa nazýva leukocytóza. Podobný obraz možno pozorovať pri malígnych ochoreniach krvi, infekciách, poškodení ožarovaním a otrave.
Lieky môžu tiež zvýšiť počet leukocytov. Nekróza tkanív, silné krvácanie, vrátane následkov operácií, kóma obličiek, srdcové ochorenia - to všetko môže viesť k leukocytóze.
Pokles počtu leukocytov pod 3,9 × 10⁹ / l sa nazýva leukopénia. U niektorých ľudí je však fixný počet leukocytov stanovený na 3,5 × 10⁹ / l. Predpokladá sa, že títo ľudia si udržujú rezervu týchto buniek v tkanivách 50 krát viac ako v krvi. Existuje tiež funkčná leukopénia po podaní analgetík, sulfónamidov a iných liečiv, po dlhej svalovej práci, v dôsledku infekcie a vírusov (týfus, chrípka a osýpky).
Leukocytový vzorec
Všetky typy leukocytov predstavujú leukocytárny vzorec. Na ňom môžete identifikovať určité patológie. Normy vzorca sa líšia vekom a obdobím života človeka. Tento posun je jasne viditeľný u žien počas tehotenstva alebo po pôrode.
Na výpočet pomeru typov týchto buniek sa používajú rôzne metódy, všetky však súvisia so skutočnosťou, že ťažšie bunky (napríklad bazofily) sa nachádzajú bližšie k okraju steru a lymfocyty, ako napríklad svetelné bunky, zostávajú v strede.
- Metóda Filipchenko. Pri tejto metóde sa výpočet vykonáva pozdĺž priečnej priamky hranice od jedného konca k druhému. Mŕtvica je psychicky rozdelená do troch častí.
- Schillingova metóda. Leukocyty sa počítajú v štyroch oblastiach šmuhy.
Získané údaje sú zaznamenané v tabuľke. Jednotlivo sa vypočíta počet každého typu bielych krviniek podľa vzorca. Označili sa tie prvky, ktoré sa zobrazili. Skóre sa uchováva až do okamihu, kým súčet všetkých počítaných buniek nie je 100.
Spôsoby počítania leukocytov v moči
V moči sa vypočíta počet leukocytov v bunke Goryaeva Nechiporenko. Táto analýza je potrebná na monitorovanie ochorenia obličiek. Periodické vyšetrenie moču pomáha monitorovať správnosť liečby a účinnosť predpísanej liečby.
Odber moču
V štúdii je iba prvá ranná moč v moči. Pre pacienta je dôležité dodržiavať základné pravidlá zberu tohto biomateriálu. Špeciálny dodatočný výcvik pre štúdium sa nevyžaduje.
Metóda výpočtu
10 ml čerstvo odobratého moču sa odstreďuje tri minúty pri 2,5 tisíc otáčkach za minútu. Pred tým je potrebné zabezpečiť, aby moč, aby sa zabránilo čiastočnému rozpadu buniek, mal mierne kyslú reakciu.
Pomocou pipety s úzkym, ťahaným koncom odstráňte vrchnú vrstvu. In vitro ponechajte 0,5 ml moču na 1 ml v závislosti od objemu sedimentu.
Zrazenina sa jemne zmieša so supernatantom. Výsledný roztok sa používa na vyplnenie počítadla Goryaev podľa podobného princípu, ktorý sa používa pri výpočte PV krvi. Fotoaparát sa ponechá na 3 až 5 minút.
Biele krvinky sa musia spočítať na veľkých štvorcoch po celej mriežke so 7x okulárom a 40x objektívom.
Výsledná hodnota sa používa vo vzorci:
X = (a / 0,9) × (1000 / V)
X - počet leukocytov v 1 ml moču.
a - vypočítané množstvo delené objemom komory v 1 μl močového sedimentu.
v - Množstvo moču odobratého pre štúdiu.
1000 - množstvo sedimentu.
To je dôležité! Norma pre leukocyty: v 1 ml moču najviac 2 × 10³ bielych krviniek.
Počet leukocytov v krvi
Laboratórny personál na detekciu krvného obrazu leukocytov najčastejšie používa komoru Goryaev. Počítanie leukocytov v komore Goryaev je menej presnou metódou ako stanovenie leukocytov pomocou elektronických zariadení. Veľkosť chyby je ± 7%.
Ako sa robí počítanie
- Do skúmavky nalejte 0,4 mililitra riediacej tekutiny, ako aj 0,02 mililitra kapilárnej krvi. Pripravený chov sa považuje za rovný 1:20.
- Ako riediaca kvapalina sa zvyčajne používa 3 alebo 5% roztok kyseliny octovej. Je predfarbená metylénovou modrou, ktorá v priebehu reakcie farbí jadrá leukocytov.
- Pred naplnením komory sa Goryaevova trubica pretrepe čo najúplnejšie. Naplnenie kamery je rovnaké ako pri počítaní červených krviniek.
Vlastnosti výpočtu
Tým, že počet leukocytov je významne nižší ako počet červených krviniek, je tento výpočet uskutočnený na 100 veľkých štvorcoch. Na 100 štvorcoch sa vypočítal počet leukocytov.
S objemom malého štvorca 14 000 kubických milimetrov a 20-násobným riedením krvi sa počet leukocytov vypočíta nasledovne: 4000 x 20 a potom sa vydelí 1600. Ukazuje sa 1/2 x a.
Na získanie počtu bielych krviniek v 1 µl sa vypočítaná hodnota vydelí 2 a pridajú sa ďalšie dve nuly.
Odchýlka leukocytov od hladiny indikuje leukocytózu a leukopéniu a vyžaduje okamžité podrobné vyšetrenie, pretože je vysoká pravdepodobnosť výskytu tuberkulózy, pneumónie, sepsy, týfusovej horúčky, radiačnej choroby.