Metóda počítania vo fotoaparáte. Odoberanie a riedenie krvi produkovanej skúmavkovou metódou. Do skúmavky sa zavedie 0,4 ml riediacej tekutiny a 0,02 ml kapilárnej krvi (výhodne Vidalevskaya). Výsledné riedenie je prakticky považované za 1:20 3-5% roztok kyseliny octovej tónovaný metylénovou modrou sa obyčajne používa ako riedidlo (kyselina octová lyzuje erytrocyty, metylénová modrá zafarbuje jadrá leukocytov). Pred naplnením komory sa skúmavka Goryaeva so zriedenou krvou dôkladne pretrepe. Komora sa plní rovnakým spôsobom ako počítanie červených krviniek.
Leukocyty sú omnoho menšie ako erytrocyty (1 - 2 na veľké štvorce), preto sa pre presnosť počítajú v 100 veľkých štvorcoch (netriedených). Výpočet: 100 veľkých štvorcov (1600 malých) sa spočítalo leukocytom.
Pamätajúc na to, že objem malého štvorca je 1/4000 mm3 a krv sa 20-násobne zriedi, vypočíta sa počet leukocytov v 1 μl krvi: 4000 20 a vydelí 1600 = a x 1/2. Na získanie skutočného obsahu leukocytov v 1 μl krvi postačuje rozdeliť na polovicu počet získaný vo výpočte a pridať 2 nuly. Priemerná chyba metódy je ± 7%.
Presnejšie (2-3% chyba) a perfektný je počet leukocytov pomocou elektronických zariadení. Počítanie leukocytov v počítadlách častíc sa uskutočňuje podľa rovnakého princípu ako erytrocyty. Pre-blood sa zriedi a zmieša s akýmkoľvek činidlom, ktoré lýzuje červené krvinky. V automatickom analyzátore „Technicon“ sa používa roztok kyseliny octovej ako taký, v zariadeniach „Culter“ a „Celloskop“ - saponín alebo sapoglobín, ktoré sa pridávajú zriedené (1: 500, 1: 700) v izotonickom roztoku chloridu sodného (6 kvapiek na 20 ml). riedenie).
Počítanie krvných leukocytov sa vykonáva na farbených periférnych krvných náteroch.
Je lepšie počítať v najtenšom mieste blízko konca steru, najmenej 200 buniek (s výnimkou výraznej leukopénie) a potom odvodiť percentuálny pomer určitých typov bielych krviniek. Počítanie sa odporúča v rovnakom poradí: polovica buniek by sa mala počítať v hornej časti, polovica v dolnej časti mŕtvice, bez toho, aby sa pohybovala až na okraj a stred, cik-cak (3-4 polia v smere zdvihu, 3-4 polia v pravom uhle k stredu mŕtvice, potom 3-4 polia na stranu rovnobežne s okrajom, opäť v pravom uhle smerom nahor a tak ďalej na jednej strane).
Príprava náterov. Opatrne umyté a odtučnené sklo (jeho okraj) sa dotýka kvapky krvi v mieste vpichu injekcie. Brúsenie skla sa vykonáva tak, že sa brúsne sklo umiestni pod uhlom 45 ° k sklzu pred kvapkou. Potom, čo priniesol sklo do tejto kvapky, čakajú, kým sa krv šíri pozdĺž jej okraja, potom rýchlym pohybom vykonajú brúsne sklo vpred, pričom ho neberú preč od objektu predtým, než vyschne celú kvapku.
Správne urobený náter má žltkastú farbu (tenkú), nedosahuje okraje skla a končí v stope (fúzy).
Farbenie suchých škvŕn po predbežnej fixácii. Najlepšia fixácia sa dosiahne v absolútnom metylén-alkohole (3-5 minút) alebo v zmesi Nikiforova s rovnakými dielmi absolútneho etanolu a éteru (30 minút).
Medzi hlavné hematologické farby patria metylénová modrá a jej derivát - azurová I (metylénová azúrová) a azurová II (zmes rovnakých častí azúrovej I a metylénovej modrej), kyslá - vo vode rozpustná žltá eozín.
● Maľba Romanovského-Giemsu. Farba Romanovsky-Giemsa (vyrobená z výroby) má nasledujúce zloženie: Azur II - 3 g, vo vode rozpustný žltý eozín - 0,8 g, metylalkohol - 250 ml a glycerín - 250 ml. Pracovný náterový roztok sa pripraví rýchlosťou 1,5-2 kvapiek hotového náteru na 1 ml destilovanej vody. Farba sa naleje na škvrnu s vyššou vrstvou; čas farbenia - 30-35 minút Po tomto čase sa tampóny premyjú vodou a vysušia na vzduchu. V tejto metóde je možné dobre rozlíšiť jadro, ale neutrofilná granularita cytoplazmy je oveľa horšia, takže sa široko používa na farbenie periférneho krvného náteru.
Kombinované farbenie May-Grunwald-Romanovsky-Giemsa podľa Pappenheima. Hotové farbivo, fixačné činidlo May-Grunwald, čo je roztok eozínometylénovej modrej v metylénalkohole, sa napipetuje na fixovaný náter počas 3 minút. Po 3 minútach sa do náteru, ktorý kryje roztok, pridá rovnaké množstvo destilovanej vody a farbenie pokračuje ďalšiu 1 minútu. Potom sa farba zmyje a rozter sa vysuší na vzduchu. Potom sa vysušený náter premaľuje čerstvo pripraveným vodným roztokom Romanovského farby po dobu 8-15 minút. Táto metóda je považovaná za najlepšiu, najmä pre šmuhy punkcií kostnej drene.
Zvýšenie počtu leukocytov v periférnej krvi nad normálnu hladinu sa nazýva leukocytóza, pokles sa nazýva leukopénia. Leukocytóza (leukopénia) je zriedkavo charakterizovaná proporcionálnym zvýšením (poklesom) počtu leukocytov všetkých druhov, napríklad leukocytózou so zhrubnutím krvi. Vo väčšine prípadov dochádza k zvýšeniu počtu (poklesu) akéhokoľvek typu buniek. Zvýšenie alebo zníženie počtu jednotlivých typov leukocytov v krvi môže byť relatívne alebo absolútne v závislosti od celkového počtu leukocytov - normálne, zvýšené alebo znížené. Zmena počtu, pomeru jednotlivých foriem a morfológie leukocytov závisí od typu a virulencie patogénu, povahy, priebehu a rozsahu patologického procesu, individuálnej reakcie organizmu.
Počítanie počtu leukocytov a krvných doštičiek
Faktory ovplyvňujúce správnosť štúdie bielych krviniek
- dlhodobé skladovanie krvi pri izbovej teplote
Normy obsahu leukocytov v krvi
Vek Počet leukocytov
- 1 deň 11,6 - 22,0
- 1 týždeň 8.1.- 14.3
- 1 mesiac 7.6 - 12.4
- Dospelí 4,0 - 9,0
Spôsoby stanovenia počtu leukocytov v krvi.
- Počítanie počtu leukocytov v počítacej komore
- Počítanie leukocytov v hematologických analyzátoroch
Stanovenie počtu leukocytov v počítacej komore.
- Počítanie leukocytov pod mikroskopom sa uskutočňuje po lýze červených krviniek v 100 veľkých štvorcoch počítacej mriežky a prepočítava sa na 1 liter krvi na základe objemu štvorcov a zriedenia krvi. Počet leukocytov sa má urobiť do 2-4 hodín po odbere krvi.
- Ak sú v periférnej krvi červené krvinky, nie sú lyzované a spočítané spolu s leukocytmi. V tomto prípade sa na stanovenie skutočného počtu leukocytov odčíta celkový počet buniek v červenom rade od celkového počtu spočítaných buniek.
- Napríklad: Celkový počet leukocytov vo výpočte v komore (alebo analyzátore) -45x109 / l. Pri výpočte vzorca leukocytov sa zistilo, že na 100 leukocytov je prítomných 50 erytroblastov (normoblastov).
Vypočítame skutočný počet leukocytov v krvi:
150 buniek - 45 x 109 / l
100 buniek (leukocyty) - X
X = 100 * 45 * 10 / l / 150 = 30 x 10 / l
Skutočný počet leukocytov v krvi je teda 30 x 109 / l.
Hlavné zdroje chýb pri výpočte leukocytov v komore:
- Nesprávny pomer objemu krvi a kyseliny octovej v skúmavke.
- Nesprávne pripravený roztok kyseliny octovej (v koncentrácii vyššej ako 5%, niektoré leukocyty môžu lýzovať, čo povedie k podhodnoteniu výsledku).
- Predĺžená expozícia vzorky pri teplotách nad 28 ° C, ktorá môže urýchliť lýzu leukocytov vo vzorke a viesť k podhodnoteniu výsledku.
- Nesprávne vyplnenie komory Goryaev. Rovnako ako pri výpočte červených krviniek, musí byť kamera ponechaná 1 minútu, aby sa bunky usadili.
- Kamera Goryaev nebola po predchádzajúcej definícii dostatočne umytá. Leukocyty zostávajúce v komore môžu nadhodnotiť výsledky analýzy.
Metódy počítania krvných doštičiek
- v počítacej komore
Každá skupina metód má svoje výhody a nevýhody.
- Počítanie krvných doštičiek v komore je dostatočne presné, nevyžaduje výpočet počtu červených krviniek. Na druhej strane je táto metóda pracnejšia, pretože doštičky v natívnej forme predstavujú malé a slabo kontrastné prvky. Nevýhodou tohto spôsobu je počítanie krvných doštičiek v nasledujúcich hodinách po užití krvi.
- Stanovenie počtu krvných doštičiek v krvných náteroch je výrazne nižšie v presnosti na komorovú metódu alebo automatické počítadlá. Chyby pri počítaní v krvných náteroch môžu byť spôsobené zlou kvalitou rozmazania a súvisiacou nerovnomernou distribúciou krvných doštičiek, nepresným určením počtu červených krviniek. Významnou nevýhodou tohto spôsobu je potreba súčasne počítať krvné doštičky a krvinky. Výhodou je schopnosť študovať krvné doštičky kedykoľvek, bez ohľadu na čas odberu krvi.
- Metóda stanovenia krvných doštičiek pomocou hematologického analyzátora umožňuje presne určiť počet krvných doštičiek, ich priemerný objem a distribúciu podľa objemu.
Spôsob počítania leukocytov v Goryaevovej komore
Biele krvinky - biele krvinky - hrajú hlavnú úlohu v antimikrobiálnej ochrane tela. Granulocyty fagocytujú mikróby a zničia ich pomocou enzýmov uzavretých v granulách, lymfocyty produkujú protilátky a poskytujú imunitnú odpoveď na telo.
Metóda stanovenia metódy skúmavky: nalejte do skúmavky 0,4 ml roztoku Trk (Türkova kvapalina obsahuje kyselinu octovú, aby sa zničili červené krvinky a metylénová modrá na farbenie jadier leukocytov). Použite kapilárnu pipetu na natiahnutie 0,02 ml krvi z čerstvej kvapky, jemne ju vyfúknite do skúmavky s činidlom a opláchnite pipetu. Dobre premiešajte. Súčasne je riedenie krvi 20-krát. Na konci kruhovej sklenenej tyčinky sa odoberie kvapka zriedenej krvi a aplikuje sa na okraj leštenej sklenenej komory.
Počítanie sa vykonáva na 100 veľkých neporušených štvorcoch, ktoré tvoria štyri. Použil sa malý nárast.
Odvodenie počítacieho vzorca číslo 1.
1. 100 štvorcov obsahuje 1600 malých štvorcov (16x 100)
2. Objem krvi nad malým štvorcom 1/4000 mm3
3. Zriedenie krvi 20-krát
Počet leukocytov v 1 μl krvi = pri -4000-20. = Ax 50
Napríklad: 100 leukocytov sa spočítalo na 100 veľkých štvorcoch mriežky Goryaev. V 1 μl krvi bude počet leukocytov 130 x 50 = 6500 alebo 6,5-103.
Na stanovenie obsahu leukocytov v 1 litri krvi sa musí počet leukocytov, vyjadrený v tisícoch, vynásobiť 10 9.
V našom príklade je počet leukocytov v 1 litri krvi 6,5-109.
194.48.155.245 © studopedia.ru nie je autorom materiálov, ktoré sú zverejnené. Ale poskytuje možnosť bezplatného použitia. Existuje porušenie autorských práv? Napíšte nám Kontaktujte nás.
Zakázať adBlock!
a obnoviť stránku (F5)
veľmi potrebné
Leukocyty (leukocytus)
Leukocyty. Kvantitatívne stanovenie leukocytov. Počítanie leukocytov pomocou kamery Goryaeva. Kvantitatívny obsah leukocytov. Leukocytóza.
Biele krvinky
Počet leukocytov v krvi závisí jednak od rýchlosti ich tvorby, jednak od ich mobilizácie z kostnej drene, ako aj od ich využitia a migrácie do tkanív (do lézií), odobratia pľúc a sleziny. Tieto procesy sú zase ovplyvnené množstvom fyziologických faktorov, a preto počet leukocytov v krvi zdravého človeka podlieha výkyvom: stúpa do konca dňa, počas fyzickej námahy, emocionálneho stresu, príjmu bielkovinových potravín a prudkých zmien teploty okolia.
Kvantitatívne stanovenie leukocytov
Leukocyty sa spočítajú pomocou kamery Goryaev a pomocou automatických počítadiel.
Počítanie leukocytov pomocou kamery Goryaeva
In vitro metódou odoberania krvi krvným leukocytom:
- Do skúmavky sa naleje 0,4 ml 3 až 5% roztoku kyseliny octovej s metylénovou modrou. Použite kapilárnu pipetu na odobratie 20 μl krvi z čerstvej kvapky (zriedenie 20-krát), opatrne ju vyfúknite do skúmavky s činidlom a opláchnite pipetu. Dobre premiešajte;
- čisté a suché krycie sklo sa vtiera do komory tak, aby sa v mieste dotyku vytvorili krúžky dúhy;
- krv zriedenú v skúmavke, dobre premiešajte. Koniec kruhovej sklenenej tyčinky berie kvapku krvi a privádza ju na okraj lešteného skla komory;
- po naplnení komory sa nechá 1 minútu v pokoji na sedimentáciu leukocytov;
- Leukocyty sa berú do úvahy pri malom zväčšení (cieľ × 8 alebo × 9, okuláre × 10 alebo × 15) so zatemneným zorným poľom (so zníženým kondenzátorom alebo zúženou membránou);
- pre uspokojivé výsledky sa leukocyty počítajú na 100 veľkých štvorcoch.
Poznajúc objem veľkého štvorca a stupeň riedenia krvi, nájdite počet leukocytov v 1 μl a 1 l krvi. Strana veľkého štvorca je 1/5 mm, plocha je 1/25 mm2, objem priestoru nad týmto štvorcom je 1/250 mm3.
Vzorec pre počítanie bielych krviniek:
kde B je počet leukocytov v 100 veľkých štvorcoch;
P - stupeň zriedenia (20).
Počet leukocytov
Norma: 4,0–9,0 × 10 9 / L
Zvýšenie počtu leukocytov nad 9,0 x 10 9 / l sa nazýva
leukocytóza, pokles ich počtu pod 4,0 × 10 9 / l - leukopénia. Normálne však môže byť dokonca 3,5 × 109 v 1 1 leukocytov pre množstvo jedincov. Podľa literatúry majú títo ľudia zvýšenú imunitnú odolnosť a je menej pravdepodobné, že ochorejú, čo sa zdá byť spôsobené potrebou imunitnej reakcie, ktorá má rezervu leukocytov v tkanivách, kde je 50-60 krát viac ako v krvnom obehu. Je zrejmé, že u zdravých jedincov s nízkym počtom bielych krviniek v periférnej krvi sa ich rezervy v tkanivách zodpovedajúcim spôsobom zvyšujú. Tento fenomén sa vysvetľuje dedičným a rodinným charakterom alebo zvýšením vplyvu parasympatického nervového systému.
Leukopénia môže byť funkčná a organická.
Funkčná leukopénia je spojená s dysreguláciou tvorby krvi a je pozorovaná:
- s niektorými bakteriálnymi a vírusovými infekciami (brušný týfus, chrípka, kiahne, rubeola, Botkinova choroba, osýpky);
- pôsobením liekov (sulfónamidov, analgetík, antikonvulzív, antitroidných, cytostatických a iných liekov);
- počas svalovej práce, zavedenie cudzieho proteínu, nervové a teplotné účinky, hladovanie, hypotonické stavy;
- falošná leukocytopénia môže byť spojená s agregáciou leukocytov počas dlhodobého skladovania krvi pri izbovej teplote (viac ako 4 hodiny).
Organická leukopénia vyplývajúca z aplázie kostnej drene a jej nahradenia tukovým tkanivom nastáva, keď: t
- aplastickú anémiu;
- agranulocytóza;
- leukopenická leukémia;
- niektoré formy Hodgkinovej choroby;
- ionizujúce žiarenie;
- hypersplenizmus (primárny a sekundárny);
- ochorenia kolagénu.
leukocytóza
Leukocytóza je reakcia hematopoetického systému na účinky
exogénne a endogénne faktory. Existujú fyziologické a patologické leukocytózy.
Fyziologická leukocytóza je:
- tráviace - po jedle, najmä s vysokým obsahom proteínov; počet leukocytov nepresahuje 10,0 - 12,0 × 10 9 / l a po 3 - 4 hodinách sa vracia do normálu;
- s emocionálnym stresom (adrenalínom), ťažkou fyzickou námahou, chladením, nadmerným slnečným žiarením (spálenie slnkom), podávaním množstva hormónov (katecholamínov, glukokortikosteroidov atď.), v druhej polovici tehotenstva, počas menštruácie a kvôli nerovnomernej distribúcii leukocytov v krvi v hlavnom prúde.
Patologická leukocytóza je rozdelená na absolútnu a relatívnu.
Absolútna leukocytóza - zvýšenie počtu leukocytov v krvi až na niekoľko sto tisíc (100,0–600,0 × 10 9 / l a viac).
- Najčastejšie pozorované pri leukémii: pri chronickej leukémii - v 98-100% prípadov, pri akútnej leukémii - v 50-60%. Zmena pomeru leukocytových buniek v kostnej dreni a vpichu krvi slúži ako základ pre diagnostiku leukémie.
Pozoruje sa relatívna leukocytóza:
- akútne zápalové a infekčné procesy, s výnimkou týfusovej horúčky, chrípky, kiahní, rubeoly, Botkinovej choroby, osýpok. Najväčšia leukocytóza (až do 70,0–80,0 × 10 9 / l) sa pozoruje pri sepse;
- pod vplyvom toxických látok (jedov hmyzu, endotoxínov), ionizujúceho žiarenia (bezprostredne po ožiarení);
- v dôsledku účinku kortikosteroidov, adrenalínu, histamínu, acetylcholínu a digitálisových prípravkov;
- s rozpadom tkaniva (nekróza), infarktom myokardu, trombózou periférnych artérií s rozvojom gangrény, popáleninami, pleurálnym výpotkom, perikarditídou, urémiou, hepatálnou kómou;
- významná strata krvi pri poraneniach, vnútornom, gynekologickom a inom krvácaní.
Zvýšenie počtu leukocytov pri infekčných ochoreniach je vo väčšine prípadov sprevádzané posunom vzorca leukocytov vľavo
Počet leukocytov
Počet leukocytov sa vypočíta pomocou automatického počítadla alebo v Goryaevovej komore. Na počítanie leukocytov v komore sa pripraví Turková kvapalina - roztok kyseliny octovej s vodným roztokom metylénovej modrej (0,1 ml 0,1% roztoku metylénovej modrej sa pridá do 9 ml 10% kyseliny octovej). V skúmavke zalejeme 0,4 ml tekutého Türku. Získať presne 0,02 ml krvi, opatrne pridať do riediacej tekutiny. Riedenie krvi je 1:20. Dobre premiešajte a nechajte 4 minúty. Naplňte komoru Goryaeva po dôkladnom pretrepaní skúmavky so zriedenou krvou. Kamera sa ponechá 1 minútu na plochom povrchu na sedimentáciu leukocytov. Potom sa leukocyty spočítajú pri nízkom zväčšení mikroskopu (šošovka 8, okulár 10 alebo 15) s tmavým zorným poľom (so zníženým kondenzátorom alebo zúženou membránou). Leukocyty sa považujú za 100 nezverejnených veľkých štvorcov, čo zodpovedá 1600 malým. Výsledky počítania buniek vo veľkých štvorcoch sumarizujú a vypočítajú ich počet v 1 μl krvi pomocou vzorca:
kde X je počet leukocytov v 1 μl krvi; A - počet buniek počítaných v 100 veľkých štvorcoch, 1600 - počet malých štvorcov; 20 - riedenie krvi; 4000 je multiplikátor, ktorého výsledkom je objem 1 μl krvi na základe objemu malého štvorca (1/4000 μl).
Počítanie leukocytovej receptúry Vyšetrujú sa farbené periférne krvné šmuhy. Nevyhnutnou podmienkou pre správne zváženie morfologických znakov krvných buniek je správne vykonaná a dobre zafarbená krv. Krémový náter sa pripravuje na suchých, čistých, dobre odmasťovaných podložných sklíčkach, starne v zmesi Nikiforov (etylalkohol 96 ° C a dietyléter 1: 1). Ak si vezmete sklenené podložné sklíčko na dlhé okraje, dotknite sa jeho povrchu kvapkou krvi (ale nie kožou) uvoľnenou z prepichnutia, alebo aplikujte kvapku krvi mikropipetou alebo kapilárou. Sklenená šmýkačka je držaná na stole alebo v ľavej ruke pre úzke hrany. Pravou rukou aplikujte mleté sklo s úzkym okrajom na sklo krvou vľavo od kvapky pod uhlom 45 ° a zatlačte ho doprava, kým sa nedotkne krvi. Čakajú, až sa krv rozprestrie po celom okraji brúseného skla, a potom rýchlym rýchlym pohybom ho odneste sprava doľava, až kým sa nevyčerpá celá kvapka. Kvapka krvi by mala byť malá a rozložená tak, aby celý náter bol položený na sklenenú podložku a nedosiahol 1-1,5 cm pred jej okrajom. Dobre spravený náter je tenký, má žltkastú farbu a končí v metle. Vzduchom sušené krvné nátery sa umiestnia do špeciálnych nádob na fixáciu alebo do bežných sklenených pohárov naplnených fixačnou kvapalinou (metylalkohol, doba fixácie 3-5 minút, etylalkohol, 30 minút; zmes Nikiforov, 20-30 minút). Fixované prípravky sa sušia na vzduchu a potom sa zafarbia farbivom Romanovsky-Giemsa. Hotový náterový roztok Romanovsky-Giemsa (azureosín) zriedený 1:10 v požadovanom objeme na farbenie. Pevné škvrny sa nalejú zriedenou farbou, ktorá sa naleje na škvrnu s možnou vyššou vrstvou. Farbenie trvá v závislosti od teploty vzduchu v miestnosti od 25 do 45 minút. Po dokončení náteru opláchnite farbu destilovanou vodou a ťahajte vertikálne v drevenom stojane na sušenie. Mikroskopia krvných náterov sa vykonáva s ponorením pri 100 x 10 zväčšení. Počítanie leukocytov sa uskutočňuje pozdĺž kľukatej línie („Meanderova línia“), počíta sa 100-200 buniek, pričom sa berie do úvahy počet jednotlivých foriem leukocytov: neutrofily bodné a segmentované, eozinofily, bazofily, monocyty, lymfocyty. Vypočítajte percento každého typu buniek.
Počítanie absolútneho počtu fagocytov a lymfocytov Absolútny počet fagocytov (neutrofilov a monocytov) a lymfocytov vyšších stavovcov sa vypočíta na základe údajov o počte leukocytov v periférnej krvi a vzorci leukocytov.
Test fagocytovej funkcie
Stanovenie fagocytového indexu a fagocytového čísla
Bolo vyvinutých veľké množstvo techník na hodnotenie absorpčnej a tráviacej aktivity leukocytov. Všetky sú založené na schopnosti fagocytov absorbovať cudzie častice, ktoré tvoria testovací systém (špecifický typ mikroorganizmu, zymosan, latex - objekt absorpcie). Zjavenie sa uskutočňuje in vitro alebo in vivo. Všeobecný priebeh stanovenia je nasledujúci: Heparinizovaná alebo citrátovaná čerstvá krv (alebo suspenzia fagocytov) sa zmieša s rovnakým objemom suspendovanej dennej mikrobiálnej suspenzie (Saccharomyces cerevisiae, Staphilococcus aureus, S. albus, E.coli, A. nydrophila) alebo iného absorpčného objektu. Zmes sa jemne premieša a umiestni do termostatu (37-40ºС - pre teplokrvné v závislosti od normálnej teploty tela, 26 ° C - pre teplomilné ryby a nižšie pre chladenie). Po 15, 30, 45, 60 a 90 minútach sa na sklíčkach pripravia šmuhy, vysušia, fixujú metylalkoholom alebo zmesou Nikiforov a zafarbia podľa Romanovského-Giemsa. Pozerajú sa na šmuhy pod ponorom a určujú fagocytovú aktivitu - percento fagocytov podieľajúcich sa na fagocytóze, fagocytový index - počet testovaných mikróbov zachytených jedným fagocytárnym leukocytom, fagocytové číslo - priemerný počet fagocytových objektov na 1 aktívny neutrofil. Hodnotenie indikátorov v rôznych časových intervaloch nám umožňuje odhadnúť dynamiku fagocytózy. Za normálnych okolností by mal byť po 90 minútach fagocytárny index nižší ako po 45 minútach a 60 minútach v dôsledku trávenia mikróbov. V prípade porušenia trávenia sa nezmení.
Hodnotenie funkčnej aktivity fagocytov redukčnou reakciou nitro-modrého tetrazolu (NBT-test) t
Tento test je indikátorom baktericídnej funkcie fagocytov a umožňuje vyhodnotiť ich schopnosť zabíjania závislého od kyslíka. Keď je tento mechanizmus zabíjania aktivovaný, aktivuje sa enzým NADPH oxidáza, čo vedie k vzniku reaktívnych foriem kyslíka vo fagocytoch. Uvoľňovanie takýchto látok v bunke sa nazýva explózia kyslíka (respiračné), ktorá môže byť registrovaná pomocou testu NBT. Vo formulácii tohto testu sa substancia nitrozíniumtetrazolium pridáva do fagocytov, je absorbovaná bunkou a v prítomnosti reaktívnych foriem kyslíka sa mení na tmavomodrú látku, diformazán. Čím viac tmavomodrých granúl je fixovaných na povrchu alebo vo vnútri fagocytov, tým viac aktívnych foriem kyslíka vzniká, tým viac je zabíjanie závislé od kyslíka.
Test NBT je nastavený v dvoch verziách: spontánne a indukované. Keď sa uskutočňuje spontánny NBT test, fagocyty sa kultivujú v prítomnosti NST bez predbežnej aktivácie buniek, pri uskutočňovaní indukovaného NBT testu sa do kultivačného média pridá aktivátor fagocytovej reakcie. Nastavenie NBT testu v dvoch variantoch umožňuje výpočet funkčnej rezervy buniek, čo je rozdiel medzi počtom (intenzitou) indukovaných buniek pozitívnych na diformazán a počtom (intenzitou) spontánnych buniek pozitívnych na diformazán. Hodnoty indukovaného NBT testu charakterizujú aktivitu fagocytových buniek v prítomnosti antigénneho stimulu a považujú sa za kritérium ich pripravenosti na úplnú fagocytózu. Spontánny NBT test umožňuje vyhodnotiť stupeň aktivácie mechanizmov zabíjania neaktivovaných fagocytov závislých od kyslíka. Charakterizuje stupeň aktivácie intracelulárnych mikrobicídnych systémov.
Na vytvorenie spontánneho testu NBT sa do 0,1 ml krvi pridá 0,05 ml 0,2% roztoku NBT v tlmivom roztoku fosforečnanu draselného (0,1, pH 7,3) a 0,05 ml rovnakého pufra. Súbežne sa umiestni vzorka, aby sa zohľadnila indukovaná skúška NBT, pri ktorej sa namiesto 0,05 ml pufra pridá rovnaký objem fagocytového aktivátora (napríklad pyrogénny pri koncentrácii 50 μg / ml). Reakčná zmes sa termostatuje vo vodnom kúpeli pri 37 ° C (30 až 60 minút). Pripravia sa škvrny so strednou hustotou, sušia sa na vzduchu a fixujú sa v etylalkohole alebo v zmesi Nikiforov (20 minút), potom sa natierajú vodným roztokom neutrálnej červene (0,1%, 1 min).
Po reakcii sa krvné škvrny podrobia mikroskopu pod ponorením (100x šošovka, 10x očko). Medzi 100 bunkami sa spočíta podiel aktivovaných neutrofilov (DAN,%) obsahujúcich granule diformazánu. Podľa množstva dipferformazanu uloženého v bunkách sa ich aktivita vyhodnocuje na ľubovoľných jednotkách a vypočíta sa index aktivácie neutrofilov (IAN, použité jednotky):
kde je Hneg. - počet buniek, ktoré neobsahujú diformazánové granule;
H1 - počet buniek, v ktorých je plocha diformazánových ložísk menšia ako 1/3 plochy jadra;
H2 - počet buniek, v ktorých sa usadzujú diformazány od 1/3 do celej veľkosti jadra;
H3 - počet buniek, v ktorých ložiská diformazánov zaberajú väčšiu plochu jadra.
Odvodenie koeficientu mobilizácie (KM) vykonaného podľa tohto vzorca: t
Stanovenie leukocytov v krvi
Obsah článku
- Stanovenie leukocytov v krvi
- Na čo sú leukocyty?
- Aká je miera celkovej analýzy krvi u žien
Počet leukocytov v krvi
Neexistuje pevný fixný počet leukocytov, ktorý by bol považovaný za normu pre všetkých ľudí. Toto číslo sa líši podľa veku osoby: čím staršia osoba, tým menší je počet leukocytov v krvi. Normálny počet leukocytov u novorodenca je 9-30x109 / l. U dospelých je toto číslo trikrát menšie - 4-9x109 / l. Ukazovateľ množstva týchto častíc v krvi sa môže mierne líšiť od normy v závislosti od funkčného stavu tela a dokonca aj od denného času.
Takže v krvi tehotných žien je zvýšený počet leukocytov. Norma sa prvýkrát zvyšuje po jedle, po cvičení, s prehriatím a chladením. Ale ak sa počet častíc zvýši trikrát viac ako norma, potom je to signál o vývoji choroby v tele.
Stav, pri ktorom má telo vysoký obsah leukocytov, sa nazýva leukocytóza a opačný stav sa nazýva leukopénia. Treba poznamenať, že kvalita odberu krvi na analýzu silne ovplyvňuje počet leukocytov: postup sa musí vždy vykonať nalačno.
Ako určiť počet leukocytov
Určiť hladinu krvných leukocytov niekoľkými spôsobmi: darovaním krvi, šmuhy, moču alebo spermy.
Počas tehotenstva je veľmi dôležité sledovať hladinu bielych krviniek v moči. Vysoká miera indikuje prítomnosť v tele ženy, ktorá nesie dieťa, zápalové procesy, napríklad pyelonefritídu alebo cystitídu.
Nezabudnite, že konečný výsledok analýzy závisí od jej správneho správania. Preto sú lekári pred predpísaním akýchkoľvek účinných liekov tehotnej žene reanalyzovaní.
Nasledujúci postup sa používa na odčítanie počtu leukocytov v krvi, spermiách alebo moči. Určitá časť kvapaliny sa umiestni do prístroja - odstredivky. Zrazenina sa aplikuje na sklo a skúma sa pod mikroskopom. Na stanovenie počtu leukocytov sa sediment zafarbí špeciálnym farbivom. Potom sa vypočíta zdanlivý počet leukocytov v zornom poli.
Ak analýza ukázala odchýlku od normálneho počtu bielych krviniek, je potrebné zistiť príčinu zvýšenia počtu častíc. Niektoré choroby sú diagnostikované kontrolou počtu bielych krviniek.
Leukocyty, ich počet a hlavné skupiny. Spôsoby stanovenia počtu leukocytov. Leykoformula a jeho hodnota.
Leukocyty Norm - (4 - 9) x 109 / l krvi. Ich počet závisí od miery tvorby v lymfatických uzlinách, slezine a kostnej dreni, mobilizácie z kostnej drene, využitia a migrácie v tkanive, zachytenia pľúc a sleziny a fyziologických faktorov. Hlavnou funkciou fagocytov granulocytov (primárne neutrofilných) je zachytávanie a štiepenie cudzieho materiálu pomocou hydrolytických enzýmov. Pri hodnotení počtu leukocytov v klinickom leukocytárnom vzorci sa používa percentuálny podiel jednotlivých foriem leukocytov. Normálne je táto hodnota konštantná.
Leukocytový vzorec
Zvýšenie počtu leukocytov na niekoľko desiatok tisíc indikuje leukocytózu a je pozorované pri akútnych zápalových a infekčných ochoreniach, sprevádzaných posunom vzorca leukocytov doľava. Zvýšenie počtu leukocytov na niekoľko sto tisíc poukazuje na leukémiu. U závažných infekčných ochorení sa pozorujú zmeny neutrofilnej morfológie: degranulácia, vakuolizácia atď. Zníženie počtu leukocytov pod 4000 znamená leukopéniu, častejšie agranulocytózu. Zníženie počtu bielych krviniek môže byť spojené s užívaním rôznych liekov, zvýšeného rádioaktívneho pozadia, urbanizácie atď. Neutropénia sa prejavuje pod vplyvom cytostatík, s lupusom, reumatoidnou artritídou, maláriou, salmonelózou, brucelózou, ako špecifickým syndrómom - s AIDS a žiarením.
Neutrofilné leukocyty. Obsah v krvi - 50–75% (2,2–4,2) x109 / l. Priemer –10–12 mikrónov.
Jadro je kompaktné, pozostáva zo 3 - 4 segmentov spojených mostami; cytoplazmy s bohatou zrnitosťou. Pri infekciách a zápaloch neutrofily vykonávajú funkciu makrofágov - buniek schopných fagocytózy.
Leukocyty sú eozinofilné. Miera je 1–5% leukocytov, (0,1–0,3) x 109 / l. Bunky väčšie ako neutrofily, priemer až 12 mikrónov. Jadro sa často skladá z 2 - 3 segmentov. Cytoplazma je mierne bazofilná, obsahuje veľké, jasne sfarbenie s eozínovou granularitou, čo poskytuje pozitívnu oxidázu, peroxidázu, reakcie cytochróm oxidázy, sukcinát dehydrogenázy, kyslé fosfatázy. Sú schopné fagocytózy, podieľajú sa na detoxikácii proteínových produktov a alergických reakciách organizmu, pričom eozinofília je charakteristická pre infekcie hlístami, je to možné v štádiu rekonvalescencie pri infekčných ochoreniach.
Basofilné leukocyty. Obsah v krvi - 0–1% (do 0,06 x 109 / l). Priemer je od 8 do 12 mikrónov. Jadro je široké, nepravidelne tvarované. Cytoplazma obsahuje veľké zrno, ktoré sa farbí metachromaticky vo fialovo čiernych odtieňoch. Podieľajte sa na alergických reakciách (okamžité a oneskorené typy): vzniká histamín a heparín (skupina heparinocytov).
Monocyty / makrofágy. Rýchlosť je 2-10% leukocytov, (0,2-0,55) x 109 / l. Veľkosti od 12 do 20 mikrónov. Jadro je veľké, voľné, s nerovnomerným rozdelením chromatínu. Dlhé necirkulujú v krvi, prechádzajú do tkanív, transformujú sa na makrofágy, ktoré sú schopné amoeboidného pohybu. Vedúce bunky imunitnej reakcie tela. Hlavnou funkciou je endocytóza. Sú centrálnym prepojením mononukleárneho fagocytového systému. Uskutočňuje sa množstvo cytokín-dependentných funkcií: hematopoetických, imunostimulačných, pro-zápalových, imunosupresívnych a protizápalových.
Produkty sekrécie makrofágov:
Proteázy: aktivátor plazminogénu, kolagenáza, elastáza, konvertáza angiotenzínu.
Mediátory zápalu a imunomodulácie: interleukín-1 (IL-1), faktor nekrózy nádoru a, interferón y, lyzozým, faktor aktivácie neutrofilov, zložky komplementu C1, C2, C3, C5, properdin, faktory B, D, IL-3, IL -6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-15.
Rastové faktory: CSF-GM, CSF-G, CSF-M, fibroblastový rastový faktor, transformujúci rastový faktor.
Koagulačný faktor a inhibítory fibrinolýzy: V, VII, IX, X, inhibítory plazminogénu, inhibítory plazmínu.
Lepiace látky: fibronektín, trombospondín, proteoglykány.
Metóda počítania kamery
Odoberanie a riedenie krvi produkovanej skúmavkovou metódou. Do skúmavky sa zavedie 0,4 ml riediacej tekutiny a 0,02 ml kapilárnej krvi (výhodne Vidalevskaya). Výsledné riedenie je prakticky považované za 1:20 3-5% roztok kyseliny octovej tónovaný metylénovou modrou sa obyčajne používa ako riedidlo (kyselina octová lyzuje erytrocyty, metylénová modrá zafarbuje jadrá leukocytov). Pred naplnením komory sa skúmavka Goryaeva so zriedenou krvou dôkladne pretrepe. Komora sa plní rovnakým spôsobom ako počítanie červených krviniek.
Leukocyty sú omnoho menšie ako erytrocyty (1 - 2 na veľké štvorce), preto sa pre presnosť počítajú v 100 veľkých štvorcoch (netriedených).
Výpočet: 100 veľkých štvorcov (1600 malých) sa spočítalo leukocytom. Pamätajúc na to, že objem malého štvorca je 1/4000 mm3 a krv sa 20-násobne zriedi, vypočíta sa počet leukocytov v 1 μl krvi: 4000 x 20 a vydelí sa 1600 = a * 1/2. Na získanie skutočného obsahu leukocytov v 1 μl krvi postačuje rozdeliť na polovicu počet získaný vo výpočte a pridať 2 nuly. Priemerná chyba metódy je ± 7%.
Presnejšie (2-3% chyba) a perfektný je počet leukocytov pomocou elektronických zariadení. Počítanie leukocytov v počítadlách častíc sa uskutočňuje podľa rovnakého princípu ako erytrocyty. Pre-blood sa zriedi a zmieša s akýmkoľvek činidlom, ktoré lýzuje červené krvinky. V analyzátore "Technicon" ako takom sa použije roztok kyseliny octovej, v prístroji "Culter" a "Celloskop" - saponín alebo sapoglobín, ktoré sa pridajú zriedené (1: 500, 1: 700) v izotonickom roztoku chloridu sodného (6 kvapiek na 20 ml). riedenie).
12. Funkcie granulocytov. Úloha T-a B-lymfocytov pri tvorbe špecifických mechanizmov imunity:
Hlavnými bunkami imunitného systému sú T-lymfocyty a B-lymfocyty, ktoré cirkulujú v krvnom riečišti a lymfatický systém, neustále sa pohybujú z jedného orgánu imunitného systému do druhého, majú schopnosť ísť von do tkanív na vykonávanie ochranných funkcií (Obr. 1).
V ochranných reakciách špecifickej imunity, okrem T a B buniek, interagujú s T a B bunkami fagocytárne bunky (granulocyty, monocyty, makrofágy), „prírodné zabíjače“, žírne bunky, endotelové a epitelové bunky, ktoré hrajú úlohu pomocných buniek. lymfocyty.
Imunitná reakcia pozostáva z komplexnej série bunkových interakcií, aktivovaných požitím cudzieho antigénneho materiálu. Po prvé, makrofág zachytáva telo nesúce antigény. Potom makrofág odstraňuje časť antigénu (peptidu) a zobrazuje ho na svojom povrchu, akoby ho prezentoval imunitným bunkám. Aktivácia lymfocytov antigénom vedie k proliferácii a transformácii lymfocytov.
Lymfocyty sú jediné bunky v tele, ktoré sú schopné špecificky rozpoznať svoje vlastné a cudzie antigény a reagovať aktiváciou na kontakt so špecifickým antigénom. S veľmi podobnou morfológiou sú lymfocyty rozdelené do dvoch populácií, ktoré majú rôzne funkcie a produkujú rôzne proteíny.
Jedna z populácií sa nazýva B-lymfocyty. U ľudí B-lymfocyty dozrievajú v kostnej dreni. B-lymfocyty rozpoznávajú antigény špecifickými imunoglobulínovými receptormi, ktoré, ako dozrievajú B-lymfocyty, sa objavujú na ich membránach. B-lymfocyty sú schopné rozpoznať a viazať antigény rozpustné v proteíne, polysacharide a lipoproteíne, pričom hlavnou funkciou B-lymfocytov je špecifické rozpoznanie antigénu. Rozpoznanie antigénu vedie k aktivácii, proliferácii a transformácii B-lymfocytov na plazmatické bunky - producentov špecifických protilátok - imunoglobulínov. Tak vzniká humorálna imunitná reakcia. B-lymfocyty najčastejšie potrebujú T-lymfocyty vo forme aktivačných cytokínových produktov na rozvoj humorálnej imunitnej reakcie.
Ďalšia populácia sa nazýva T-lymfocyty kvôli diferenciácii ich prekurzorov v týmuse. T-lymfocyty majú najdôležitejšiu funkciu špecifického rozpoznávania a viazania antigénu. T-lymfocyty aktivované antigénmi proliferujú a transformujú sa do rôznych subpopulácií, ktoré sa ďalej podieľajú na všetkých formách imunitnej reakcie. Aktivovaný T-lymfocyt tiež produkuje a vylučuje cytokíny, ktoré zlepšujú proces zvyšovania počtu T-lymfocytov, B-lymfocytov a samotných makrofágov.
Medzi zrelými T-lymfocytmi sú dve hlavné subpopulácie: T-pomocné bunky (CD4 +) a T-zabíjačské bunky - cytotoxické T-lymfocyty (CD8 +). Označenie „CD“ je vlastnosťou „fenotypu bunkového povrchu“ - „diferenciačného klastra“ (z anglických zoskupení diferenciácie - CD).
Existuje aj iný typ lymfocytov - veľké granulované lymfocyty, ktoré sa líšia od menších T-buniek a B-lymfocytov nielen štruktúrnymi vlastnosťami, ale aj neprítomnosťou receptora na rozpoznávanie antigénu. Tieto bunky sa nazývajú "prirodzené zabíjače": sú schopné zabíjať cieľové bunky alebo nádorové bunky infikované rôznymi vírusmi (pozri tabuľku 1).
Tabuľka 1. Klasifikácia ľudských lymfocytov
T bunky deštruktívne ovplyvňujú nasledujúce objekty:
1. Malígne bunky.
2. Bunky infikované mikroorganizmami.
3. Transplantované orgány a tkanivá.
Celá bunka je zapojená do útoku, takže odpoveď sa nazýva bunková imunita.
Existujú teda dva hlavné typy imunitnej reakcie:
Bunková imunita je funkciou T lymfocytov.
· Humorálna imunita - za účasti B-lymfocytov.
Existuje ďalšia subpopulácia T-lymfocytov: regulačné T-lymfocyty, T-regulačné bunky Treg), T-supresory sú centrálnymi regulátormi imunitnej reakcie. Ich hlavnou funkciou je kontrola sily a trvania imunitnej reakcie prostredníctvom regulácie funkcie T-efektorových buniek (T-pomocné bunky a T-cytotoxické bunky).
Obr. 2. Všeobecná schéma imunitnej reakcie
Fenomén supresie imunitnej reakcie bol známy už dlho, ale jeho mechanizmy neboli známe. Preto bola navrhnutá existencia špecifických T-supresorových buniek, ale existencia týchto buniek nebola dlhodobo potvrdená experimentálne. Až na konci deväťdesiatych rokov a začiatkom 2000s bola preukázaná existencia určitých T buniek, ktoré boli charakterizované fenotypom CD25 + FOXP3 + a účinne potláčali imunitnú odpoveď.
13. imunita, jej nešpecifické a špecifické mechanizmy:
Adaptívna (zastaraná, získaná, špecifická) imunita má schopnosť rozpoznať a reagovať na jednotlivé antigény, je charakterizovaná klonálnou odpoveďou, lymfoidné bunky sú zapojené do reakcie, je tu imunologická pamäť, auto-agresia je možná.
Zaradené do aktívnych a pasívnych.
- Získaná aktívna imunita nastáva po utrpení ochorenia alebo po podaní vakcíny.
- Získaná pasívna imunita sa vyvíja, keď sú hotové protilátky zavedené do tela vo forme séra alebo prenesené na novorodenca s kolostrom matky alebo prenatálne.
Ďalšia klasifikácia rozdeľuje imunitu na prirodzené a umelé.
- Prirodzená imunita zahŕňa vrodenú imunitu a získanú aktívnu (po chorobe), ako aj pasívnu imunitu pri prenose protilátok na dieťa z matky.
- Umelá imunita zahŕňa získané aktívne po očkovaní (podanie vakcíny) a získané pasívne (podávanie séra).
Vrodená (nešpecifická) imunita je spôsobená schopnosťou identifikovať a neutralizovať rôzne patogény podľa najkonzervatívnejšieho, spoločného, rozsahu evolučnej príbuznosti pred prvým stretnutím s nimi. V roku 2011 bola udelená Nobelova cena za medicínu a fyziológiu za štúdium nových mechanizmov vrodenej imunity (Ralph Steinman, Jules Hoffman a Bruce Byotler).
Vykonáva sa väčšinou bunkami myeloidnej série, nemá striktnú špecificitu pre antigény, nemá klonálnu odozvu, nemá pamäť primárneho kontaktu s mimozemskou látkou.
14. Mononukleárny fagocytový systém: t
Systém mononukleárnych fagocytov (grécky monox jeden + lat. Nukleové jadro: grécke pohany pohlcujúce, absorbujúce + bunka gistol sutus; synonymum: makrofágový systém, monocyt-makrofágový systém) - fyziologický obranný systém buniek so schopnosťou absorbovať a stráviť cudzí materiál. Bunky, ktoré tvoria tento systém majú spoločný pôvod, sú charakterizované morfologickou a funkčnou podobnosťou a sú prítomné vo všetkých tkanivách tela.
Základom modernej koncepcie systému mononukleárnych fagocytov je fagocytová teória vyvinutá I.I. Mechnikov na konci 19. storočia a učenie nemeckého patológa Aschoffa (K.A.L. Aschoff) o retikuloendotelovom systéme (RES). Pôvodne bol OZE izolovaný morfologicky ako systém telesných buniek schopný akumulácie vitálneho farbiva. Na tomto základe boli do RES priradené histiocyty spojivového tkaniva, krvné monocyty, Kupfferove bunky pečene, ako aj retikulárne bunky krvotvorných orgánov, endotelových buniek kapilár, sinusov kostnej drene a lymfatických uzlín. S nahromadením nových poznatkov a zlepšením morfologických výskumných metód bolo jasné, že myšlienky o retikuloendotelovom systéme sú nejasné, nie špecifické a v mnohých ustanoveniach jednoducho chybné. Napríklad dlhodobo sa úloha zdroja fagocytových buniek pripisovala retikulárnym bunkám a endotelu sinusov kostnej drene a lymfatických uzlín, čo sa ukázalo byť nesprávne.
Teraz sa zistilo, že mononukleárne fagocyty pochádzajú z cirkulujúcich krvných monocytov. Monocyty dozrievajú v kostnej dreni, potom vstupujú do krvného obehu, odkiaľ migrujú do tkanív a seróznych dutín a stávajú sa makrofágmi. Retikulárne bunky vykonávajú podpornú funkciu a vytvárajú tzv. Mikroprostredie pre hematopoetické a lymfoidné bunky. Endotelové bunky transportujú látky cez kapilárne steny. Retikulárne bunky a vaskulárny endotel nie sú priamo spojené s ochranným systémom buniek. V roku 1969 sa na konferencii v Leidene venovanej problému REC považoval pojem „retikuloendotelový systém“ za zastaraný. Namiesto toho prijala koncepciu systému mononukleárnych fagocytov. Podľa tohto systému obsahujú histiocyty spojivového tkaniva, Kupfferove bunky pečene (hviezdicovito retikuloendoteliotsity), alveolárna makrofágy, pľúcne makrofágy lymfatických uzlín, sleziny, kostnej drene, pleurálna a peritoneálnej makrofágy, osteoklasty v kosti, mikroglie nervového tkaniva synoviocytmi synoviálnej membrány, kožných buniek Langergaisa, pigmentovaných dendrocytov. Sú voľné, t. pohybujú sa cez tkanivá a pevné (rezidentné) makrofágy, ktoré majú relatívne trvalé miesto.
Makrofágy tkanív a seróznych dutín podľa skenovacej elektrónovej mikroskopie majú tvar blízky guľovitému tvaru, s nerovnomerným prehnutým povrchom tvoreným plazmatickou membránou (cytolémou). Za kultivačných podmienok sa makrofágy rozprestierajú na povrchu substrátu a získavajú sploštený tvar a počas pohybu vytvárajú viacnásobnú polymorfnú pseudopódiu.
Charakteristickým ultraštrukturálnym znakom makrofágu je prítomnosť mnohých lyzozómov a fagolysozómov alebo tráviacich vakuol vo svojej cytoplazme. Lyzozómy obsahujú rôzne hydrolytické enzýmy, ktoré zabezpečujú trávenie absorbovaného materiálu. Makrofágy sú aktívne sekrečné bunky, ktoré uvoľňujú enzýmy, inhibítory a zložky komplementu do životného prostredia. Hlavným sekrečným produktom makrofágov je lyzozým. Aktivované makrofágy vylučujú neutrálne proteinázy (elastáza, kolagenáza), aktivátory plazminogénu, faktory komplementu, ako sú C2, C3, C4, C5, rovnako ako interferón.
Bunky systému mononukleárnych fagocytov majú množstvo funkcií založených na ich schopnosti endocytózy, t.j. absorpcie a trávenia cudzích častíc a koloidných kvapalín. Vďaka tejto schopnosti vykonávajú ochrannú funkciu. Prostredníctvom chemotaxie migrujú makrofágy do ohnísk infekcie a zápalu, kde vykonávajú fagocytózu mikroorganizmov, ich zabíjanie a trávenie. V podmienkach chronického zápalu sa môžu objaviť špeciálne formy fagocytov - epiteliálne bunky (napríklad v infekčnom granulome) a obrovské multinukleárne bunky typu Pirogov-Langkhansovej bunky a typ buniek cudzích telies. ktoré sú tvorené fúziou jednotlivých fagocytov do polykaryónu - viacjadrovej bunky. V granulómoch makrofágy produkujú glykoproteín fibronektín, ktorý priťahuje fibroblasky a prispieva k rozvoju sklerózy.
Bunky Mononukleárny fagocytový systém je zapojený do imunitných procesov.
Predpokladom pre rozvoj riadenej imunitnej reakcie je teda primárna interakcia makrofágu s antigénom. Antigén sa súčasne absorbuje a spracováva makrofágom do imunogénnej formy. K imunitnej stimulácii lymfocytov dochádza priamym kontaktom s makrofágmi nesúcimi transformovaný antigén. Imunitná reakcia sa všeobecne uskutočňuje ako komplexná viacstupňová interakcia lymfocytov G a B s makrofágmi.
Makrofágy majú protinádorovú aktivitu a vykazujú cytotoxické vlastnosti proti nádorovým bunkám. Táto aktivita je obzvlášť výrazná v takzvaných imunitných makrofágoch, ktoré uskutočňujú lýzu nádorových cieľových buniek pri kontakte so senzitizovanými T lymfocytmi nesúcimi cytofilné protilátky (lymfokíny).
Bunky mononukleárneho fagocytového systému sa podieľajú na regulácii myeloidnej a lymfoidnej hematopoézy. Teda krvinky v červenej kostnej dreni, slezine, pečeni a žĺtkovom vaku embrya sa tvoria okolo určitej bunky - centrálneho makrofágu, ktorý organizuje erytropoézu erytroblastických ostrovčekov. Kupfferove bunky pečene sa podieľajú na regulácii krvi produkciou erytropoetínu. Monocyty a makrofágy produkujú faktory, ktoré stimulujú produkciu monocytov, neutrofilov a eozinofilov. V tymusovej žľaze (týmusová žľaza) av zónach lymfatických orgánov závislých od týmusu sa nachádzajú tzv. Interdigitujúce bunky - špecifické stromálne elementy, ktoré tiež patria do systémov mononukleárnych fagocytov, ktoré sú zodpovedné za migráciu a diferenciáciu lymfocytov.
Výmennou funkciou makrofágov je ich účasť na metabolizme železa.
V slezine a kostnej dreni makrofágy uskutočňujú erytrofagocytózu, zatiaľ čo v nich dochádza k akumulácii železa vo forme hemosiderínu a feritínu, ktorý môže sestra znovu použiť s erytroblastmi.
15. Leukocyto a jeho typy. leukopénia:
Leukocytárny vzorec je percento určitých typov leukocytov v periférnej krvi. Vzorec leukocytov je modifikovaný určitým spôsobom, typickým pre každé špecifické ochorenie. Leukocyty s rôznymi chorobami, často s infekciami, sa menia z kvantitatívneho hľadiska.
Zvýšenie počtu leukocytov - leukocytóza, pokles - leukopénia.
Leukocytóza môže byť fyziologická a patologická, prvá sa vyskytuje u zdravých ľudí, druhá - s niektorými bolestivými stavmi. Leukocytóza je zmena v bunkovom zložení krvi, vyznačujúca sa zvýšením počtu leukocytov. Rýchlosť leukocytov v krvi je 3,5–8,8 × 109 / l, ale tento indikátor sa môže líšiť v závislosti od laboratória a použitých metód.
Leukocytóza môže byť fyziologická a patologická, prvá sa vyskytuje u zdravých ľudí, druhá - s niektorými bolestivými stavmi. Medzi fyziologické patrí alimentárna leukocytóza (po jedle), myogénna (po fyzickom strese), leukocytóza u tehotných žien a iné, patologická leukocytóza je spôsobená reakciou krvotvorných orgánov na podráždenie spôsobené infekčnými, toxickými, zápalovými, radiačnými a inými látkami. Pozoruje sa aj pri nekróze tkaniva (infarkt myokardu, dezintegrácia nádoru), po závažnom krvácaní, poraneniach, poraneniach hlavy atď. Leukocytóza spolu s príčinou, ktorá ju spôsobila. Prechodná leukocytóza, ktorá sa vyznačuje výskytom nezrelých leukocytov v krvi, sa nazýva leukemoidná reakcia.
Leukopénia je pokles počtu leukocytov v krvi pri niektorých infekčných a iných ochoreniach, ako aj v dôsledku radiačného poškodenia, medikácie alebo reflexných účinkov na kostnú dreň.
Poškodenie žiarenia, kontakt s mnohými chemikáliami (benzén, arzén, DDT atď.) Vedú k leukopénii; užívanie liekov (cytostatiká, niektoré typy antibiotík, sulfónamidy atď.). Leukopénia sa vyskytuje vtedy, keď vírusové a ťažko tečúce bakteriálne infekcie, ochorenia krvného systému.
Keď je leukopénia potrebná na presné určenie príčiny ochorenia. Vedľajšie účinky alopatických liečiv spolu s vírusovými infekciami a chorobami krvotvorných orgánov môžu spôsobiť leukopéniu, pretože množstvo liekov má toxický účinok na kostnú dreň a môže prostredníctvom alergických mechanizmov spôsobiť leukopéniu a agranulocytózu.
Liečba spočíva v predpisovaní liekov, ktoré stimulujú vývoj nových leukocytov alebo stimulujú uvoľňovanie bielych krviniek.
16. Regulácia leukopoézy:
Regulácia leukopoézy. Produkcia leukocytov je stimulovaná leukopoetínmi, ktoré sa objavujú po rýchlom odstránení veľkého počtu leukocytov z krvi. Chemická povaha a miesto vzniku leukopoetínov v tele zatiaľ neboli študované. Nukleové kyseliny, produkty rozkladu tkanív, ktoré sa objavujú počas poškodenia a zápalu, a niektoré hormóny majú stimulačný účinok na leukopoézu. Pod vplyvom hormónov hypofýzy - adrenokortikotropného hormónu a rastového hormónu - sa zvyšuje počet neutrofilov a znižuje sa počet eozinofilov v krvi.
Nervový systém hrá dôležitú úlohu pri stimulácii leukopoézy. Podráždenie sympatických nervov spôsobuje zvýšenie neutrofilných leukocytov v krvi. Dlhodobé podráždenie nervu vagus spôsobuje redistribúciu leukocytov v krvi: ich obsah sa zvyšuje v krvi mezenterických ciev a znižuje krv v periférnych cievach; podráždenie a citová agitácia zvyšujú počet leukocytov v krvi. Po jedle sa zvyšuje obsah leukocytov v krvi cirkulujúcej v cievach. Za týchto podmienok, ako aj počas svalovej práce a bolestivých podnetov vstupujú do krvi leukocyty v slezine a v dutinách kostnej drene.