ELISA na vírusovú hepatitídu

9. marec 2017, 16:25 Odborné články: Nová Vladislavovna Izvochkova 0 3,608

Na detekciu vírusovej hepatitídy v tele liek široko využíva enzýmový imunotest na základe zistenia koncentrácie a typu antigénov pomocou protilátok a enzýmov. Vykonáva sa postupne, laboratórnym výskumom, s vysokou presnosťou indikácií. V závislosti od množstva a triedy protilátok, farba a koncentrácia enzýmu, ktorý používa test ELISA, a teda aj lekár diagnostikujú ochorenie, zmeny.

Čo je ELISA?

Prítomnosť vírusovej hepatitídy v tele pacienta sa stanoví sérologickou metódou analýzy krvi na prítomnosť vírusu HCV a markerov (tiel a protilátok), ktoré ho označujú. Enzymovo viazaný imunosorbentný test (ELISA) skúma rôzne vírusy, zlúčeniny s nízkou molekulovou hmotnosťou, makromolekuly, ich kvalitatívne a kvantitatívne ukazovatele, s použitím prejavu reakcie na ich antigény. Na tento účel použite enzým ako značku na registráciu signálu. Čoraz viac sa používa v medicíne, pretože ELISA jasne zistí, že dobre definované antigény, bez toho, aby ich zamieňali s inými, majú vysokú citlivosť na prítomnosť invázie do vírusovej hepatitídy.

Nevýhodou takejto diagnózy je neschopnosť identifikovať príčinu ochorenia, pretože táto metóda len indikuje reakciu imunitného systému organizmu. Výsledky analýzy sú ovplyvnené očkovaním vykonaným skôr. 8 hodín pred analýzou sa odporúča zdržať sa jedla, nikotínu a alkoholu. Základom testu ELISA je enzymatická a imunitná reakcia organizmu na vírus. Biologické molekuly sa viažu na bunku a jej elementy, mikroorganizmy, detekujú vírus, potom pracujú enzýmy, ktoré vám umožňujú vyjadriť imunitnú reakciu viditeľným a merateľným parametrom.

Indikácie pre analýzu

Vírusová hepatitída v tele môže spôsobiť rakovinu a cirhózu pečene. Dôležitosť včasnej diagnózy je nesporná. Primárnou metódou diagnostiky je test ELISA, ktorý s vysokou presnosťou určuje prítomnosť HCV vírusu (IgM a IgG) a aktivity jeho stopových prvkov. Povinné testy na vírusovú hepatitídu prejdú:

  1. Ľudia s rizikovými skupinami (narkomani, ľudia s AIDS, zamestnanci zdravotníckych a orgánov činných v trestnom konaní).
  2. Ľudia s akútnou alebo chronickou hepatitídou.
  3. Tehotné a plánovanie tehotenstva ženy.

ELISA rozpoznáva chorobu v akomkoľvek štádiu. Výsledky analýzy sú v priemere pripravené za 2 dni.

Kritériá, ktoré určujú dôležitosť analýzy

Test ELISA určuje prítomnosť protilátok triedy IgG, IgM, IgA. Pri diagnostike vírusovej hepatitídy lekár nevenuje pozornosť ich typu, pretože prítomnosť akéhokoľvek takéhoto prejavu vírusu HCV už indikuje akútne alebo chronické štádium ochorenia. V počiatočných štádiách ochorenia sa hladina IgM zvyšuje (5 dní po infekcii); 15. - 20. deň sa objavia IgG protilátky a môžu zostať v ľudskej krvi po dlhom čase aj po vyliečení; IgA - objaví sa po 10-14 dňoch, po liečbe klesá.

Ak sú IgG a IgA zistené po použití liekov a ich hladina zostáva rovnaká - nosič má chronickú formu hepatitídy. Dôležitým kritériom testu bude jasné vymedzenie triedy dostupných protilátok a ich množstvo. Na základe toho môžete vedieť nielen o prítomnosti choroby, ale aj o štádiu jej vývoja. Detekcia takýchto prvkov v krvi pacienta umožňuje predpísať správnu a včasnú liečbu, aby sa zabránilo vážnejším následkom.

Ako sa to robí?

Prideľte priamy a nie priamy test ELISA. Fázy priame:

  1. Zber biologického materiálu a jeho umiestnenie do špeciálnych dier.
  2. Počas 15-30 minút antigény sú pripojené na povrch jamiek.
  3. Pridanie protilátok do jamiek na nájdený antigén. Všetko sa nechalo 1-5 hodín.
  4. Odstráňte nepripojené antigény (vylejte obsah jamiek).
  5. Jamky opláchnite špeciálnym roztokom.
  6. Do jamiek sa pridá roztok enzýmu. Nechajte pôsobiť 30 minút - 1 hodinu.
  7. Použitie kolorimetrie (detekcia farby a koncentrácia farby obsahu jamky, porovnanie s indikátormi, ktoré sú priamo úmerné koncentrácii vírusu).
Použitie na diagnostiku nepriameho testu ELISA poskytne presnejší výsledok.

Nepriama metóda ELISA sa uskutočňuje s použitím neoznačených protilátok na nájdené antigény a následné pridanie značených protilátok. Najprv sa pacientovi odoberie krv a rozprestrie sa v jamkách počas 15-30 minút. (protilátky sú fixované otvormi). Potom sa do nich zavedú neznačené protilátky po dobu 1 - 5 hodín (vytvorí sa spojenie protilátok s antigénmi - imunitný komplex). Potom sa z jamiek nalejú nepripevnené mikroelementy a premyjú sa špeciálnym roztokom. V ďalšom štádiu laboratórny technik pridáva značené stopové prvky do jamiek počas 15-30 minút. (Toto sa viaže na neoznačenú značku s tvorbou komplexu "protilátka-protilátka-antigén"). Extra (voľné) sa počas odčerpávania a prania roztokom odstránia. Ďalej je enzým, ktorý mení farbu 5-30 minút. zostávajú v dierach a farebné údaje porovnané s údajmi tabuľkových ukazovateľov. Nepriama ELISA je presnejšia.

Čo ukazuje ELISA na vírusovú hepatitídu?

Imunoanalýza umožňuje zistiť prítomnosť infekcie (vírus hepatitídy všetkých druhov, HIV, herpes, syfilis, cytomegalovírus, osýpky, rubeola, vírus mumpsu, vírus Epstein-Barrovej), je markerom autoimunitných ochorení, rakovinových buniek. Označuje porušenie reprodukčných funkcií (zmeny testosterónu, prolaktínu, estradiolu a progesterónu), poruchy štítnej žľazy, zamorenie hlístami, chlamýdie. Účinný na detekciu ureaplazmózy, čierneho kašľa, vírusu Dange, vírusu West Nile, Borrelia. Zoznam definícií je vysoký, obsahuje mnoho položiek.

Potvrdenie výsledkov

Stanovenie antigénu HCV vírusu pomocou ELISA poskytuje 98% presnosť. Používa sa aj na retestovanie biologického materiálu s fuzzy predchádzajúcimi indikátormi. Prítomnosť antigénov IgM nie je indikátorom akútnej hepatitídy a vyžaduje si ďalší výskum. Keď sa test ELISA opakuje, výsledky sa zhodujú s 90 - 100%. V prípade minimálneho rozdielu sa priemerná hodnota berie ako ukazovateľ. Pre maximálnu presnosť z hľadiska lekárov odporúčame paralelne vykonávať biochemickú analýzu krvi. Na testovanie výsledkov po enzýmovom imunoanalýze môžete použiť iné diagnostické metódy.

Výskum vírusovej hepatitídy metódou ife

ELISA pri diagnostike vírusovej hepatitídy. Možnosti imunotestu enzýmu

Špecifická laboratórna diagnostika vírusovej hepatitídy je založená na použití imunochemických a molekulárno-biologických výskumných metód. Hlavnými imunochemickými metódami sú rádioizotopy alebo rádioimunitné (RIA) a imunoanalýzy (ELISA). Imunochemické diagnostické metódy sú založené na špecifickej interakcii antigénu - protilátky s následnou identifikáciou komplexu pomocou špeciálnych značiek. Najbežnejší enzýmový imunotest.

Prvé správy o používaní enzýmového imunotestu. ako metóda na stanovenie akýchkoľvek látok boli v roku 1971 publikované súčasne dvomi výskumnými skupinami - V. Van Weemen, A. Schuurs a E. Engvall, P. Perlmann. Enzýmová imunoanalýza je založená na nasledujúcom princípe: na pevnej fáze, ktorá využíva hlavne povrch jamiek polystyrénovej tablety, je fixovaný antigén infekčného agens alebo protilátky (často zmes protilátok) na antigény, ktoré majú byť detegované. Tento antigén alebo protilátky, ktoré sú fixované na pevnej fáze, sa nazývajú imunosorbent.

V dôsledku inkubácie imunosorbentu a testovaného séra v prítomnosti detegovateľného činidla sú naviazané na komplex antigén - protilátka. Po premývacom postupe, počas ktorého sa odstránia neviazané antigény a protilátky, sa uskutoční inkubácia s konjugátom. Ako konjugát na detekciu HBsAg sa používajú anti-HBs, na detekciu protilátok proti vírusu hepatitídy C - protilátky proti ľudským imunoglobulínom (konjugát s vírusom) značený chrenovou peroxidázou. Výsledkom tejto inkubácie je naviazanie na už existujúce antigénové komplexy - protilátka dodatočne zavedeného konjugátu. Po odstránení neviazaného konjugátu (premytie) sa substrát zavedie do jamiek. Pri použití peroxidázového konjugátu sa peroxid vodíka používa ako substrát v kombinácii s indikátorom, ktorý sa najčastejšie používa ako orto-fenyléndiamín (OPD) alebo tetrametylbenzidín (TMB). Výsledok sa odhaduje fotometricky.

Kvalita a spoľahlivosť analytických schopností metódy enzýmového imunotestu je charakterizovaná množstvom kritérií, medzi ktoré patrí citlivosť, špecifickosť, presnosť a reprodukovateľnosť.

Citlivosť je minimálne množstvo látky, ktoré možno zistiť enzýmovým imunotestom. V tomto prípade je dolnou hranicou citlivosti tejto metódy koncentrácia testovanej látky vo vzorke, ktorá zodpovedá najmenšiemu pozitívnemu výsledku stanovenia, ktorý je štatisticky významne odlišný od ukazovateľov zámerne negatívnych vzoriek. Citlivosť IFTS závisí od mnohých okolností súvisiacich s návrhom testovacieho systému (afinita imunosorbentu, kvalita extrakčných a pufrových systémov) a rozlíšenie a presnosť registračnej metódy.

Špecifickosť - schopnosť presne identifikovať zložky, na ktorých určenie je tento enzýmový imunotest určený. Špecificita ELISA je do značnej miery determinovaná skríženou reakciou protilátok alebo antigénov (to znamená kompozície použitej ako imunosorbent) s blízkymi zlúčeninami, ako aj zložením inkubačného média (matricový efekt).

Správnosť - zhoda priemernej hodnoty výsledkov opakovaných stanovení tej istej kontrolnej vzorky so skutočnou hodnotou meraného parametra. Presnosť stanovenia v teste ELISA závisí od kvality testovacieho systému a kontrolnej vzorky. U dobrých testovacích systémov s imunoanalýzou sú indikátory správnosti v rozsahu 90-110%. Zvláštnosťou biomedicínskeho výskumu v ELISA je nemožnosť stanoviť presnú hodnotu, a preto sa za skutočnú hodnotu berie priemer niekoľkých odborných laboratórií. Štatistickým kritériom pre správnosť je aritmetický priemer a stupeň jeho odchýlky od skutočnej hodnoty vyjadrenej v percentách.

Reprodukovateľnosť - schopnosť testovacieho systému ukázať rovnaké hodnoty pri opakovaných štúdiách tej istej vzorky. Reprodukovateľnosť závisí jednak od náhodných chýb (chýb) počas postupu reakcie, ako aj od kvality testovacích systémov a presnosti spôsobu zaznamenávania výsledkov. Predpokladá sa, že reprodukovateľnosť rovnakých kontrolných vzoriek tej istej spoločnosti v rôznych laboratóriách by nemala prekročiť hodnotu variačného koeficientu 15%.

Existuje niekoľko špecifických schém ELISA na stanovenie markerov vírusovej hepatitídy: a) priamy enzýmový imunotest; b) nepriamy enzýmový imunotest; c) kompetitívna inhibícia; c) metóda „trap“ alebo „capture“.

Z molekulárno-biologických metód na diagnostiku vírusovej hepatitídy sa bežne používa polymerázová reťazová reakcia a hybridizácia. Tieto metódy, najmä PCR, umožňujú detekciu veľmi malých množstiev špecifickej vírusovej DNA alebo RNA, a teda replikáciu sudcu a v niektorých prípadoch replikačnú aktivitu.

Krvný test hepatitídy C

Hepatitída C je jedným z najčastejších ochorení pečene, ktoré sa vyskytuje pri infikovaní vírusom hepatitídy C (HCV), ktorý vstupuje do tela predovšetkým vtedy, keď prichádza do styku s krvou infikovanej osoby. Vyskytuje sa chronická a akútna hepatitída C. U 70-80% pacientov s akútnou hepatitídou C nie sú príznaky ochorenia, iba v niektorých prípadoch po určitom čase po infekcii sa prejavujú prejavy ochorenia, ktoré sa prejavujú únavou, bolesťou brucha, stratou chuti do jedla, stmavnutím. moč, zvracanie, nevoľnosť, zosvetlenie výkalov, žltačka, bolesť v kĺboch. Spravidla sa príznaky vyskytujú 6-7 týždňov po infekcii, ale trvanie nástupu príznakov ochorenia sa pohybuje od 2 týždňov do šiestich mesiacov. Ak sa objavia vyššie uvedené príznaky, musíte sa poradiť s lekárom infekčných chorôb a mať krvný test na hepatitídu C. Diagnóza hepatitídy, ktorá sa vykonáva včas, môže odhaliť ochorenie v jeho raných štádiách a výrazne zvýšiť šance na zotavenie.

Keď je naplánovaný test hepatitídy C

Situácie, keď sa vyžaduje test na hepatitídu C:

  • počas plánovaného tehotenstva a rodiny;
  • pacientov so symptómami chronickej alebo akútnej hepatitídy;
  • osoba je ohrozená. Sú to zdravotnícki pracovníci, osoby vo väzení, policajti, ľudia, ktorí užívajú drogy, majú veľký počet sexuálnych partnerov, majú AIDS, sú na hemodialýze a iní.

Príprava na analýzu hepatitídy C

Špeciálna príprava na analýzu hepatitídy C sa nevyžaduje. Na analýzu sa odoberá krv zo žily na lačný žalúdok a súčasne musí uplynúť najmenej osem hodín po poslednom jedle.

Testy ELISA na hepatitídu C

Prvá analýza, zvyčajne predpísaná na diagnostiku hepatitídy C - ELISA test (enzým-spojený imunosorbent test). Testy ELISA na hepatitídu C umožňujú detekciu prítomnosti protilátok proti vírusu hepatitídy C (anti-HCVAb) v krvi. Ak je výsledok testu ELISA pozitívny, indikuje prítomnosť kontaktu tela s vírusom hepatitídy C. 40% ľudí, ktorí majú pozitívny test ELISA, však vírus nerozpoznáva v krvi. Tento jav sa nazýva falošne pozitívny výsledok. Pomocou ELISA sa tiež kontroluje krv darcu.

RIBA pre hepatitídu C

RIBA analýza hepatitídy C sa používa na potvrdenie pozitívneho výsledku ELISA. Metóda rekombinantnej imunoblotingu (RIBA) je presnejšia štúdia prítomnosti protilátok proti vírusu hepatitídy C. Prítomnosť vírusu hepatitídy C v tele tiež neurčuje pozitívny výsledok, ale iba potvrdzuje prítomnosť protilátok.

Testy PCR na hepatitídu C

Na zistenie prítomnosti vírusov hepatitídy C v krvi (HCV RNA) a na stanovenie diagnózy najčastejšie používajú analýzu metódou polymerázovej reťazovej reakcie (PCR). Táto štúdia umožňuje s vysokou presnosťou zistiť prítomnosť malého množstva vírusu v krvi. PCR analýza hepatitídy C môže odhaliť prítomnosť vírusu už 5 dní po infekcii, dlho pred objavením sa protilátok. Ak je výsledok PCR analýzy pozitívny, znamená to prítomnosť aktívnej infekcie.

Existujú také variácie PCR analýzy:

  • kvantitatívna PCR, ktorá umožňuje určiť nielen prítomnosť vírusu, ale aj vírusovú záťaž (množstvo vírusu). Tento ukazovateľ má veľký význam pre určenie účinnosti liečby;
  • genotyp, ktorý stanovuje genotyp vírusu hepatitídy C, ktorý je dôležitý na určenie trvania a taktiky liečby. Existuje viac ako 10 genotypov vírusu hepatitídy C, ale pre klinickú prax stačí definovať päť najbežnejších typov: 1a, 1b, 2,3a / 3b.

Vykonáva sa kvantitatívna analýza PCR:

  • s kvalitatívnym pozitívnym testom na prítomnosť RNA vírusu hepatitídy C v sére;
  • na presné posúdenie účinnosti liečby;
  • určiť taktiku liečby pacienta.

Neexistuje priamy vzťah medzi závažnosťou hepatitídy C a množstvom vírusu v krvi. Koncentrácia vírusu ovplyvňuje infekčnosť ochorenia, to znamená, že čím väčšie je množstvo vírusu v krvi pacienta, tým väčšie je riziko prenosu vírusu, napríklad pohlavným stykom alebo z matky na dieťa. Účinnosť liečby závisí aj od koncentrácie vírusu. Počas terapie je priaznivým faktorom nízka vírusová záťaž a veľmi vysoká je nepriaznivá.

Analýza genotypov sa vykonáva:

  • s kvalitatívnym pozitívnym testom na prítomnosť RNA vírusu hepatitídy C v sére;
  • na presné posúdenie účinnosti liečby;
  • určiť taktiku liečby pacienta;
  • predpovedať chronizáciu infekčného procesu;
  • na určenie progresie ochorenia.

Detekcia genotypu vírusu má veľký význam pre stanovenie trvania liečby, čo je dôležité, pretože interferón má široké spektrum vedľajších účinkov a nízku toleranciu pacienta.

Dekódovacia analýza hepatitídy C

Normálne vírusová RNA, protilátky proti nim a antigény úplne chýbajú. Prítomnosť protilátok v krvi indikuje prítomnosť chronickej alebo akútnej hepatitídy C alebo doby zotavenia. Ak je HCV RNA prítomná v krvi, ktorá sa stanoví pomocou PCR analýzy, znamená to prítomnosť vírusu v krvi.

Pri nesprávnej testovacej technike, prevoze a abnormalitách krvi môže analýza PCR niekedy vykazovať falošne pozitívne výsledky. Analýzy ELISA a RIBA v skorých štádiách ochorenia, keď telo ešte nevyprodukovalo dostatočné množstvo protilátok, môžu vykazovať falošne negatívny výsledok.

Ak sa pri dešifrovaní testu na hepatitídu C získajú pozitívne výsledky, je potrebné kontaktovať lekára a gastroenterológa na ďalšiu diagnostiku a liečbu.

Segmentované neutrofily sa znížili

Detské doštičky sú normálne, zvýšené, znížené

Hormón stimulujúci štítnu žľazu TGT

Diagnóza hepatitídy

Nie je možné okamžite zistiť prítomnosť hepatitídy v tele, pretože inkubačná doba ochorenia môže trvať až štyri týždne. Keď sa objavia prvé príznaky choroby, radikálne zmeny v zložení krvi sa vyskytujú v postihnutom organizme: biochemická analýza uvádza závažný zdravotný problém a prítomnosť patogénneho vírusu. Aby sme však urobili konečnú diagnózu, nestačí darovať krv na hepatitídu, ako aj podrobnú diagnózu hepatitídy.

Laboratórna diagnostika hepatitídy

Je žiaduce vykonať ju po skončení inkubačnej doby, aby lekár s maximálnou presnosťou mohol určiť ochorenie pečene prítomné v tele. V opačnom prípade predpísaná liečba neposkytne požadovaný terapeutický účinok a dokonca zhorší prevládajúci klinický obraz.

Diagnóza hepatitídy A

Typicky diagnóza hepatitídy A začína podrobným vypočúvaním pacienta a vymenovaním niekoľkých testov, ktoré sa musia vykonať čo najskôr. Toto je:

  • biochemický krvný test;
  • úplný krvný obraz;
  • PCR metóda;
  • ELISA;
  • koagulácie.

Ak postupuje Botkinova choroba, potom sa podľa výsledkov biochemickej analýzy krvi pozoruje abnormálny skok bilirubínu, AlAT a AsAT, vzorky tymolu. Okrem toho sa produkujú špecifické anti-HAV IgM, ktoré sú nezvratnou skutočnosťou prítomnosti hepatitídy A.
Všeobecne je analýza krvi určená poklesom leukocytov, skokom v ESR a lymfocytózou. A napriek tomu je najspoľahlivejšia metóda PCR, ktorá určuje indikátor RNA patogénneho vírusu.
Okrem toho lekár skúma príznaky ochorenia, po ktorých môže urobiť konečnú diagnózu a preraziť na najúčinnejšiu liečbu. Potreba inštrumentálneho vyšetrenia je veľmi zriedkavá. Po úspešnej konzervatívnej liečbe v podmienkach hospitalizácie a karantény pacienta čaká konečné uzdravenie a hepatitída A sa už nevráti.

Diagnóza hepatitídy B

Stanovenie prítomnosti vírusu hepatitídy B je možné aj podľa výsledkov laboratórnych testov, a preto je prvá vec potrebná na darovanie krvi na hepatitídu. Patogénny vírus má prirodzene tri hlavné antigény - HBsAg, HBcAg a HBeAg, na ktoré sa v tele produkujú protilátky. Hlavným znakom tohto klinického obrazu je ELISA - ELISA, ktorá len odhalila špecifické markery hepatitídy B.
Ihneď by sa malo objasniť, že antigén HBsAg sa objavuje v krvi ešte pred prvými príznakmi hepatitídy a je spoľahlivo stanovený v ikterickom období. Negatívny test však nevylučuje prítomnosť hepatitídy B, a preto vyžaduje použitie rovnako účinnej metódy polymerázovej reťazovej reakcie (PCR).
Ak máte podozrenie, že hepatitída B je povinná, je biochemický krvný test, ktorý sa odporúča prejsť na prvé miesto. Uskutočňovanie biopsie pečene a ultrazvuku peritoneálnych orgánov je diskutované individuálne, ale keď je história ochorenia veľmi jasná, nie sú potrebné klinické vyšetrovacie metódy.

Pečeňový echogram pri autoimunitnej hepatitíde v štádiu chronickej hepatitídy

Diagnóza hepatitídy C

Aby sa táto diagnóza, nestačí darovať krv na hepatitídu, pretože vírus môže prevládať v tele v latentnej forme. Hlavnými laboratórnymi testami sú však všetky uvedené analýzy, ako aj dodatočný výkon biopsie pečene. Toto mikroskopické vyšetrenie biologického materiálu (v našom prípade kúsok tkaniva pečene) určuje rozsah patologického procesu a fibrózy tkaniva. Odber vzoriek sa vykonáva v lokálnom anestetiku, komplikácie takéhoto postupu sú v lekárskej praxi mimoriadne zriedkavé.
Ak je podozrenie na hepatitídu C, hlavnou metódou klinického vyšetrenia je ultrazvuk peritoneálnych orgánov. Dôvod je jednoduchý: choroba sa často prejavuje vizuálnou zmenou v postihnutej pečeni, zmenami v jej štruktúre a veľkosti. Týmto spôsobom môžete určiť:

  • veľkosť pečene, sleziny, pankreasu a žlčníka;
  • patologické zmeny v týchto orgánoch;
  • celkový prietok krvi v peritoneálnych orgánoch;
  • optimálnu oblasť na vykonávanie biopsie pečene.

Táto metóda klinického vyšetrenia určuje všetky fokálne patologické stavy orgánu na mikroskopickej úrovni. Ak je pečeň na obrazovke zobrazená v šedej škále, je potrebná okamžitá biopsia, pretože sivá farba zobrazuje postihnuté tkanivá „ľudského filtra“.

Prevencia hepatitídy

Keďže sa choroba neprejavuje okamžite, je ďaleko od všetkých klinických obrázkov, ktoré sa dostanú k okamžitej liečbe. Pacient si jednoducho nemôže byť vedomý existencie patogénneho vírusu v tele, ktorý sa rýchlo šíri do krvného obehu a infikuje zdravé pečeňové bunky.
Aby sa zabránilo takémuto tragickému osudu, odporúča sa dodržiavať všetky preventívne opatrenia. Takáto ostražitosť výrazne zníži riziko chorobnosti a zachráni vás pred vážnymi zdravotnými problémami v budúcnosti. Základné pravidlá prevencie sú uvedené nižšie:

  • umyte si ruky po ulici;
  • podliehať vysokokvalitnej spracovateľskej čerstvej zelenine a ovocím;
  • vykonávať všetky preventívne očkovania uvedené v ročnom kalendárnom pláne;
  • selektívny prístup k sexuálnym partnerom;
  • vyhnúť sa kontaktu s chorými ľuďmi;
  • používajte len jednorazové striekačky a buďte obzvlášť ostražití na staniciach na transfúziu krvi.

Odporúča sa tiež pravidelne (raz za šesť mesiacov) darovať krv na hepatitídu, aby sa zabezpečilo, že vírus neprenikne do tela a neinfikuje raz zdravé pečeňové bunky. Ak je stanovená diagnóza, je potrebné okamžite sa stať výdajným účtom a dodržiavať všetky odporúčania špecialistu.

Autor publikácie:
Syropyatov Sergej Nikolajevič
Vzdelanie: Štátna zdravotnícka univerzita v Rostove (Štátna zdravotnícka univerzita v Rostove), Katedra gastroenterológie a endoskopie.
gastroenterológ
Lekár lekárskych vied

ELISA metóda na detekciu hepatitídy

Moderná medicína je známa mnohými chorobami pečene. HCV (vírusová hepatitída C) patrí medzi najčastejšie a najnebezpečnejšie, pretože táto infekcia sa často vyvíja asymptomaticky a vedie ku kritickým komplikáciám, dokonca k smrti. Preto je mimoriadne dôležitá včasná diagnostika ochorenia, ktorá sa vykonáva pomocou rôznych metód, vrátane enzýmového imunosorbentného testu (ELISA) na detekciu protilátok proti vírusu v krvi.

Vyhlásenie HCV infekcie na diagnostiku hepatitídy

V laboratórnej diagnostike na detekciu hepatitídy C (HCV infekcia) sa používajú dva typy metód: t

  1. Sérologické, založené na detekcii protilátok proti vírusu hepatitídy C (anti-HCV), tiež nazývané ELISA (enzým-spojený imunosorbent test). Je zameraný na detekciu anti-HCV (IgM a IgG markerov) používaných na skríning a na diagnostiku hepatitídy C. Oba tieto markery môžu byť detegované v krvi (plazme) v rôznych kombináciách, čo si vyžaduje náležitú klinickú interpretáciu. Na potvrdenie prítomnosti anti-HCV sa vykoná test RIBA (rekombinantný imunoblot).
  2. Molekulárne biologické, zamerané na detekciu RNA vírusu. HCV RNA test je predpísaný pre nasledujúce kategórie pacientov: t
    • s identifikovanou anti-HCV;
    • bez zistenej anti-HCV, ale so zavedenými epidemiologickými a klinickými údajmi, ktoré vyžadujú vylúčenie akútnej formy HCV.

RNA vírusu môže byť detegovaná v krvi už 14 dní po infekcii, to znamená pred objavením sa anti-HCV, ku ktorému dochádza počas prvých 2-3 mesiacov.

Na konečné potvrdenie diagnózy (najmä ak je zistený iba jeden z dvoch markerov HCV infekcie) odborníci odporúčajú, aby sa po určitom čase vykonali opakované testy anti-HCV a HCV RNA.

Detekcia hepatitídy metódou ELISA

Na implementáciu včasnej diagnózy vírusovej hepatitídy, najmä asymptomatických, anekterických foriem, v sére, sa deteguje prítomnosť vírusových proteínov (antigénov) alebo protilátok proti nim (produkovaných imunitným systémom, keď vírusy vstupujú do tela) pomocou enzýmovej imunoanalýzy (ELISA). Toto je univerzálna metóda imunologickej diagnostiky, jej podstata spočíva v štúdiu interakcie "antigén-protilátka". Je široko používaný v mnohých krajinách sveta.

Stanovenie hepatitídy metódou ELISA umožňuje nielen stanoviť presnú diagnózu, ale aj posúdiť charakter ochorenia, ako aj vybrať si vhodnú a účinnú liečbu pomocou tradičných liekov (interferón, ribavirín), liekov s priamym účinkom (Sofosbuvir, Daclatasvir) a ich generík indickej a čínskej produkcie.

Vždy, keď je to možné, je diagnostika vírusovej hepatitídy pomocou ELISA doplnená PCR (polymerázová reťazová reakcia), ktorá umožňuje stanoviť prítomnosť vírusov hepatitídy v RNA.

Ako presná je metóda enzýmového imunotestu

Podľa expertných odhadov je presnosť metódy ELISA 95%, to znamená, že u 95 zo 100 pacientov, ktorí používajú enzýmový imunotest, možno v krvi zistiť prítomnosť a množstvo HCV protilátok - IgM a IgG. Ak je výsledok pozitívny, je možné diagnostikovať HCV kontakt s telom (nie samotný vírus, a to prítomnosť protilátok v krvi, ktoré môžu byť výsledkom už prenesenej choroby).

Napriek vysokej citlivosti enzýmového imunosorbentného testu (ELISA) však u 40% pacientov s pozitívnym výsledkom vírus nemusí byť detegovaný, čo naznačuje pochybný alebo falošne pozitívny výsledok.

Na potvrdenie správnosti výsledkov ELISA sa na presnejšie štúdium detekcie protilátok proti HCV použije metóda RIBA (rekombinantný imunoblot).

Anti NCV jadrový test

Účinné štúdie na stanovenie prítomnosti protilátok proti vírusom hepatitídy zahŕňajú jadro anti-HCV, ktoré sa používa ako potvrdzujúci test, keď sa získajú „neisté“ výsledky.

Ak je v sére detegované jadro anti-HCV v riedení 1: 1000, pravdepodobne bude diagnostikovaný pozitívny výsledok, to znamená, že ochorenie je prítomné.

Ak sú vzorky v riedení 1: 1000 negatívne, v riedení 1: 200 sú pozitívne, je potrebný výskum na prítomnosť vírusovej RNA. V tomto prípade s najväčšou pravdepodobnosťou neexistuje HCV infekcia.

Je dôležité pochopiť, že pri chronických formách HCV sú protilátky neustále detegované a počas eliminácie (odstránenie z buniek tela) vírusu pretrvávajú 4 - 8 rokov alebo viac. Prítomnosť anti-HCV teda nie vždy indikuje infekciu tela a neumožňuje objektívne závery o aktivite procesu, aby sa získali presné údaje o vírusovej záťaži, stupni poškodenia pečene, trvaní infekcie a rozdiele medzi akútnymi a chronickými formami ochorenia sa odporúča použiť definíciu spektra protilátok proti rôznym HCV. peptidy. Je tiež dôležité pozorovať ich kvantitatívnu a kvalitatívnu dynamiku.

Analýza ELISA - od skríningu HbsAg po komplexnú diagnostiku

So zavedením moderných technológií v medicíne rastú možnosti imunochemických diagnostických metód, ktoré sú schopné rýchlo a presne rozpoznať ochorenie, keď sú iné metódy bezmocné. Pochopenie, že vírus hepatitídy B je schopný byť v tele vo veľmi nízkej koncentrácii, pri ktorej sa nedá detegovať ani takou spoľahlivou metódou, ako je PCR, si vyžaduje, aby sa znovu pozrel na problém diagnostiky tohto ochorenia a na zhodnotenie možností imunotestu.

V tomto materiáli budeme podrobne analyzovať všetko, čo sa týka tohto typu laboratórneho výskumu. Dozviete sa, čo je enzýmový imunotest a ako sa vykonáva, čo je austrálsky antigén a ako sa určuje, čo sú nezrozumiteľné skratky Hbs ag.

Obsah článku:

Všeobecné informácie o ELISA

ELISA (skrátená ELISA) je laboratórna diagnostická metóda, ktorá dokáže detegovať antigény aj protilátky zo širokej škály infekcií, vrátane hepatitídy B. Súčasná znalosť vlastností vírusu a charakteristík imunitnej odpovede organizmu umožňuje nielen detekciu infekcie, ale aj jej identifikáciu. účinnosti očkovania a vyhodnotiť účinnosť liečby.

Podstata enzýmového imunotestu

ELISA je založená na reakcii „antigén-protilátka“ alebo skôr na jej vlastnostiach.

V reakcii na inváziu cudzej látky (antigénu), ktorá je najmä proteínmi vírusu, produkuje telo proteíny proteíny - protilátky. Protilátky vstupujú do komplexnej reakcie s antigénom, čo blokuje jeho aktivitu.

Nižšie budeme hovoriť o antigénoch a protilátkach, ale teraz si všimneme, že pre každý antigén sú prísne individuálne alebo ako hovoria lekári homologické protilátky. Ak teda chceme detekovať špecifický antigén v krvi, použijeme diagnostickú tabletu s protilátkami. Ak je v krvi antigén, bude reagovať s protilátkami, ktoré môžu byť detegované rôznymi spôsobmi. A naopak. Ak chceme nájsť nejaké protilátky, potom potrebujeme tabletu s príslušným antigénom.

Diagnostická hodnota medveďov je najčastejšie iba protilátok, s ktorými môžete diagnostikovať takmer akúkoľvek infekciu. Zvláštnosťou vírusu hepatitídy B je však to, že hlavnú úlohu v diagnostike hrá jeden z antigénov - austrálsky antigén.

Ako je IFA

Zvážte typický postup ELISA pre konkrétny príklad, ak chcete identifikovať protilátky proti patogénu.

Na diagnostiku sa použije tableta s 96 jamkami, ktoré sú vopred nasýtené zodpovedajúcim antigénom. Ďalej je postup nasledovný:

sérum sa aplikuje na všetky bunky;

homológne protilátky reagujú s antigénom a viažu sa na platňu;

tablety sa premyjú, odstránia sa nepripojené protilátky;

potom sa do buniek zavedie enzymatická značka - látka, ktorá reaguje s protilátkami a spôsobuje farbenie obsahu bunky.

Toto je štandardný postup ELISA s farbením, ktorý sa používa napríklad v imunochromatografických testovacích prúžkoch.

ELISA sa neobmedzuje na kvalitatívne stanovenie protilátok alebo antigénov patogénu. Čím viac protilátok je obsiahnutých v bunkách tablety, tým intenzívnejší je zafarbený roztok. Pri porovnaní jeho optickej hustoty s kontrolou, moderné zariadenie môže celkom presne vypočítať koncentráciu protilátok na jednotku objemu. Uskutočňuje sa teda kvantitatívna ELISA, miera merania, pri ktorej sú najčastejšie jednotky optickej hustoty (EOP).

Imunochemiluminiscenčná analýza

V súčasnosti existuje niekoľko desiatok typov ELISA, z ktorých každá má preferovaný rozsah. Najobľúbenejšou v diagnostike hepatitídy B je imunochemiluminiscenčná analýza.

Enzymatická značka pre túto analýzu nie je chromatín, ako v štandardnej ELISA, ale špeciálne látky - fosfory, ktoré spôsobujú, že komplex svieti v ultrafialovom svetle.

Pomocou špeciálneho zariadenia - luminometra môžete presne určiť úroveň emisií av dôsledku toho aj koncentráciu požadovanej látky.

Použitím metód ELISA stanovte takmer všetky existujúce antigény vírusu hepatitídy B a protilátky proti nim.

Antigény vírusu hepatitídy B: Hbs, Hbe a Hbc

Termín antigén (antigén) pochádza z dvoch anglických slov: protilátka - protilátka a generátor - výrobca. Pod antigénom teda rozumieme akúkoľvek látku, ktorá jej spôsobuje tvorbu protilátok v tele. Najbežnejšími antigénmi sú proteínové zlúčeniny.

Dnes sú známe tri antigény vírusu hepatitídy B: hbsag, hbc a hbe.

Austrálsky antigén

Proteín, ktorý je súčasťou vonkajšieho obalu patogénovej hepatitídy B, bol detegovaný dlho pred objavením samotného vírusu. Tento antigén dostal svoj názov, pretože bol prvýkrát identifikovaný z domorodých obyvateľov Austrálie. Prvé však proteín nebol považovaný za antigén, ale úplne prirodzený prvok krvi medzi domorodcami a uvedomenie si jeho spojenia s ochoreniami pečene o niečo neskôr.

Dlhodobé uchovávanie antigénu v krvi a neprítomnosť protilátok poukazuje na možnosť tvorby chronickej hepatitídy B pozitívnej na HBeAg.

V odbornej literatúre sa v súčasnosti názov „austrálsky antigén“ prakticky nenašiel a bol nahradený medzinárodnou skratkou - HbsAg (povrchový antigén hepatitídy b - povrchový antigén hepatitídy B). Okrem toho môžete nájsť skratky hbs antigén alebo len hbs. Ktorákoľvek z týchto skratiek je prijateľná a môže byť doplnená záznamom HBV alebo HBV - vírusu hepatitídy B (vírus hepatitídy b).

Povrchový antigén vírusu hepatitídy B má jednu pozoruhodnú vlastnosť, ktorá z neho robí nepostrádateľný diagnostický marker - jeho koncentrácia v krvi môže dosiahnuť veľmi vysoké hladiny až do polovice miligramu na mililiter krvi. Je to preto, že len malá časť nových HBsAg, ktoré sa tvoria počas reprodukcie vírusu hepatitídy B, ide do konštrukcie membrán nových vírusových častíc a zvyšok - voľne cirkuluje v krvi. Výsledkom je, že počet častíc hbs v krvi môže prekročiť počet viriónov stovky tisíckrát.

Táto vlastnosť robí z austrálskeho antigénu hlavný marker pri skríningu diagnózy hepatitídy B, ktorá sa nachádza v krvi už 4-6 týždňov po infekcii. Ako protilátky tvoria povrchový antigén postupne nahradený. Ak HBsAg pretrváva aj po 6 mesiacoch, znamená to prechod infekcie na chronickú formu.

V poslednej dobe, keď bolo možné určiť koncentráciu hbs hbv, jeho úloha v diagnóze ešte vzrástla, pretože spoliehanie sa na hladinu antigénu môže rozlíšiť chronickú hepatitídu B (HBV) od zdravého stavu nositeľa, ako aj monitorovať účinnosť liečby.

Core antigény

V jadre vírusu - nukleokapsid - sú proteíny, ktoré riadia reprodukciu vírusu HBcoreAg a HBeAg.

HBcoreAg, ktorý sa môže tiež nazývať HBCore-antigén, hbc alebo jadrový antigén, možno nájsť len v tkanivách pečene, priamo v jadrách hepatocytov. Tento antigén nie je detegovaný v krvi a nemá diagnostickú hodnotu.

Štruktúra vírusu hepatitídy

HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - naopak, hrá dôležitú úlohu v diagnostike. HBeAg a HBcoreAg sú blízki príbuzní. Majú veľkú podobnosť štruktúry a líšia sa hlavne v priestorovej polohe molekúl. Na rozdiel od HBcore HBe nie je súčasťou nukleokapsidovej steny a voľne cirkuluje v krvi.

Úloha HBe v infekčnom procese ešte nie je dostatočne jasná, avšak zvláštnosti jej správania a ich vzťah s priebehom infekčného procesu už boli dostatočne preskúmané. HBeAg indikuje aktívnu reprodukciu vírusu a umožňuje spoľahlivo určiť fázu chronickej CHB - HBeAg-pozitívnej alebo HBeAg-negatívnej.

HBe je možné detegovať v krvi už v inkubačnej dobe akútneho vírusu hepatitídy B (HBV), zatiaľ čo vysoká koncentrácia HBeAg po dobu 3 týždňov s najväčšou pravdepodobnosťou indikuje hrozbu chronického procesu. Koncentrácia HBe priamo súvisí s obsahom častíc Dane (tzv. Častice vírusu hepatitídy B) - čím vyššie množstvo HBe, tým vyššia je koncentrácia HBV DNA v krvi.

HBeAg je hlavným markerom infekčnosti ochorenia. Krv HBeAg-pozitívnych pacientov je oveľa nákazlivejšia ako HBeAg-negatívna. Napríklad u tehotných žien pozitívnych na HBe a Hbs pravdepodobnosť prenosu infekcie na dieťa dosahuje 50%, zatiaľ čo pravdepodobnosť takejto udalosti u HBe-negatívnych, ale Hb pozitívnych matiek je 10-30%.

Hbe určuje priebeh chronickej hepatitídy. HBeAg-pozitívna chronická hepatitída B má oveľa nepriaznivejšiu prognózu z hľadiska vývoja cirhózy.

To je pravdepodobne všetko, čo potrebujete vedieť o HBV antigénoch a prejdeme na druhú skupinu markerov hepatitídy B - protilátky.

Čo znamená pozitívny alebo negatívny výsledok EIA pre hepatitídu C?

S cieľom presne určiť typ hepatitídy po predbežnej diagnóze, predpovedať priebeh ochorenia, stanoviť štádium jeho vývoja, sa používajú rôzne sérologické štúdie. Najpresnejšie údaje sa získajú po enzýmovom imunoanalýze. Použitím ELISA hepatitídy C, diagnostikovanej v 95% prípadov. Je to práve táto analýza, ktorá umožňuje detegovať protilátky antivírusu hepatitídy C (HCV antivírus) a hodnotiť nielen stupeň aktivity patologického procesu, ale aj úroveň účinnosti antivírusovej liečby predpísanej ošetrujúcim lekárom a vykonávanú pod jeho kontrolou.

Keď je potrebný výskum a jeho vlastnosti

Hepatitída C je najnebezpečnejší typ tohto ochorenia, pretože má dlhý latentný (latentný) čas a nebezpečné následky. Aby sa zabránilo vzniku a rozvoju správnej a včasnej diagnózy, je jednou z najinformatívnejších metód, pri ktorých je rozpoznaný imunologický test.

Je možné potvrdiť prítomnosť HCV infekcie v krvi pacienta pomocou sérologických markerov a analýza, ktorá je založená na komplexe štrukturálnych a neštrukturálnych vírusových peptidov, umožňuje získať najkomplexnejšie a najspoľahlivejšie údaje o existencii protilátok. U zdravých ľudí chýbajú protilátky proti vírusu hepatitídy C v krvi pacienta a ich detekcia indikuje prítomnosť patogénu a rozvoj patologického procesu.

V priebehu štúdie odborníci identifikujú celkové protilátky IgM a IgG, ktoré priamo súvisia so štrukturálnymi a neštrukturálnymi proteínmi HCV. Uskutočnenie tejto štúdie nám umožňuje identifikovať pacientov infikovaných vírusom hepatitídy C v počiatočnom štádiu ochorenia, pričom prítomnosť celkových protilátok v krvi pacienta indikuje nástup ochorenia alebo predchádzajúcu infekciu.

Nástup ochorenia je indikovaný prítomnosťou protilátok triedy IgM a hepatitída typu C môže byť posudzovaná detegovanými protilátkami triedy IgG. Stávajú sa potvrdením rekonvalescencie (konečné štádium ochorenia), pre ktoré je charakteristické anatomické a funkčné zotavenie postihnutých orgánov.

Včasná ELISA (ELISA) vám umožňuje identifikovať patologický proces v ranom štádiu vývoja, diagnostikovať ochorenie s vysokou presnosťou a zvýšiť šance na rýchle zotavenie. Test ELISA umožňuje určiť nielen prítomnosť vírusu, ale aj počet špecifických celkových antivírusových protilátok.

  1. Ženy v stave tehotenstva pri registrácii na pôrodnej klinike.
  2. Pacienti, ktorí majú príznaky akútnej alebo chronickej hepatitídy.
  3. Zdravotníci, ktorí sú neustále v kontakte s biologickými materiálmi.
  4. Pacienti s diagnózou AIDS.
  5. Občania závislí od drog.
  6. Pacienti s alkoholizmom a tí, ktorí vedú asociálny životný štýl.

Odvolať sa na test ELISA (enzýmový imunotest) a prijímať úradníkov činných v trestnom konaní alebo zamestnancov verejných služieb. Potreba ELISA sa vyskytuje, ak máte podozrenie, že došlo k porušeniu funkcie pečene alebo pri prijímaní sporných údajov o stave orgánu po ultrazvuku. Lekár môže poskytnúť pacientovi odporúčanie na krvný test ELISA, ak má podstúpiť komplexný chirurgický zákrok. Ak žena (najmä staršia ako 30 rokov) plánuje tehotenstvo, v krvnom teste sa zistia zvýšené hodnoty bilirubínu alebo transferázy (ALT, AST).

Špecifické anti-vírusové IgG protilátky boli detegované niekoľko rokov. Ich koncentrácia sa postupne znižuje, čo potvrdzuje pozitívnu dynamiku. Pokiaľ ide o chronickú hepatitídu C, v tomto prípade sa počet celkových protilátok proti HCV nemení. Presná diagnóza je založená na stanovení hladiny IgM protilátok.

Priebeh hepatitídy C závisí od genotypu vírusu, ktorý spôsobil vývoj ochorenia. Je známych 11 moderných odrôd liekov. V najťažších situáciách je možná infekcia s niekoľkými genotypmi vírusu a jedna z nich je vždy dominantná. Iba presná diagnóza pomôže vybrať najúčinnejšie lieky na účinnú liečbu, zvoliť ich dávkovanie a nastaviť trvanie terapeutických zákrokov.

Hodnotenie výsledkov výskumu

Na stanovenie diagnózy podozrenia na hepatitídu C a na získanie indikatívnych informácií o množstve a kvalite patogénu sa vykoná enzýmová imunoanalýza (ELISA), počas ktorej odborníci dostanú potvrdenie o prítomnosti vírusu v tele a môžu posúdiť jeho aktivitu.

Pomocou tejto štúdie môžeme vyvodiť závery o:

  • vírusová záťaž;
  • riziko vzniku chronického procesu;
  • aktivitu reprodukcie (replikácie) molekuly HCV RNA;
  • trvanie patologického procesu;
  • stupňa poškodenia pečene.

Vyhodnocuje sa aj úroveň rizika chronického ochorenia. Identifikované pomocou ELISA antivírusového HCV protilátok indikujú vírusovú replikáciu. Konečné výsledky vyžadujú potvrdenie s presnejším výskumom.

Kvalitatívne hodnotenie výsledku enzýmového imunotestu je vyjadrené ako pozitívny alebo negatívny výsledok. ELISA umožňuje detegovať hepatitídu C v skorom štádiu vývoja ochorenia, ako aj v priebehu ochorenia v anikternej forme.

Analýza má určité výhody, vrátane:

  1. Presnosť kvalitatívnych a kvantitatívnych ukazovateľov.
  2. Minimálny čas štúdia.
  3. Fázový test.

Enzymový imunotest je jedným z prieskumov, ktoré sa vyznačujú vysokou presnosťou, ale napriek všetkým výhodám, v niektorých prípadoch neumožňuje identifikovať patogén prítomný v ľudskom tele.

Laboratórny asistent vezme na vyšetrenie venóznu krv pacienta a umiestni ju do špeciálnych nádob. Po určitom čase sa antigény (cudzie mikroorganizmy) pripoja na steny cievy. Odborník vloží imunoglobulíny (protilátky) do cievy a hľadá imunitnú odpoveď.

Získané výsledky sú porovnané s údajmi špeciálne zostavenej tabuľky. Výsledok sa vyhodnotí ako:

Pozitívne, indikujúce prítomnosť akútnej formy ochorenia, ak sa počas krvného testu zistí prítomnosť protilátok triedy IgA, IgG, IgM.

Negatívne - všetky tri typy protilátok neboli detegované, chýbajú.

Falošne pozitívny výsledok ELISA je pozitívny, ale nie je potvrdený po PCR (polymerázová reťazová reakcia).

Pochybné - markery v krvi nie sú zistené v prítomnosti hepatitídy C. To je možné s príliš skorou diagnózou. Vyžaduje sa opakovaná analýza po 2-3 týždňoch. Pre presnú diagnózu vykonajte PCR analýzu.

Falošne negatívny výsledok analýzy je možný u pacientov užívajúcich lieky, ktoré majú inhibičný účinok na obranný systém tela.

Falošne pozitívne aj falošne negatívne výsledky analýzy sú možné z niekoľkých dôvodov. V prvom rade je to minimálna vírusová záťaž vo veľmi skorom štádiu vývoja ochorenia. Rovnako dôležitý je stav imunitného systému pacienta a individuálne charakteristiky jeho tela. Výsledky štúdie významne ovplyvňujú podávanie liekov z imunosupresív.

Nie je možné byť úplne presvedčený o presnosti výsledku enzýmového imunotestu, ak je pacientka v tehotenstve. Falošné výsledky sú možné v prípadoch, keď sa analýza vykonáva u pacientov s autoimunitnými ochoreniami, onkologickými ochoreniami s benígnymi nádormi.

Ďalší výskum sa vykonáva, ak pacient nedávno utrpel závažné infekčné ochorenie, bol diagnostikovaný metabolickou poruchou alebo poruchou endokrinného systému. Ak je zloženie krvi zvýšené hladiny heparínu alebo významne znížené hladiny stopových prvkov.

Presnosť analýzy možno zvýšiť dodržiavaním existujúcich pravidiel na prípravu jej dodania:

  1. Krv sa daruje len na prázdny žalúdok. Posledné jedlo je povolené najmenej 8-10 hodín pred zberom materiálu.
  2. Vo večerných hodinách, pred analýzou, je potrebné odmietnuť jesť mastné, vyprážané, korenené, údené výrobky a jedlá.
  3. Nie je možné hovoriť o pití alkoholu.
  4. Je lepšie prestať fajčiť deň pred darovaním krvi.

Enzymovo viazaný imunosorbentný test sa môže uskutočniť len pre tých pacientov, ktorí v súčasnosti netrpia katarálnymi, zápalovými alebo infekčnými chorobami a nesťažujú sa na indispozíciu.

Porušenie uvedených pravidiel a požiadaviek vedie k tomu, že výsledok analýzy je hodnotený ako falošne pozitívny. Táto situácia sa vyvíja v 15 - 20% prípadov. Pre úplnú dôveru však lekári odporúčajú pacientov na ďalšie vyšetrenie, počas ktorých potrebujú darovať krv na PCR.

Polymerázová reťazová reakcia

Diagnóza nie je možná len na základe výsledkov analýzy ELISA. Prítomnosť protilátok nie je dôkazom prítomnosti patogénneho vírusu v tele v čase štúdie. Chybné testovanie môže vyvolať nervové zlyhanie alebo dokonca akútnejšiu reakciu pacienta. Diagnóza založená na výsledkoch ELISA nie je presná. Je potrebný ďalší výskum, ktorého výsledkom bude konečný verdikt lekárov.

Je dôležité si uvedomiť, že výsledok falošne pozitívneho testu je možný u ľudí, ktorí v súčasnosti trpia inými infekčnými ochoreniami, ale ich imunitný systém nereagoval správne na prenikanie patogénov alebo vírusov do tela.

Diagnostikovať hepatitídu C umožňuje množstvo laboratórnych testov, čo je osobitné miesto, medzi ktoré patrí enzýmová imunoanalýza (ELISA). Kvalitatívne hodnotenie ukazovateľov je definované ako kladný alebo záporný výsledok. Neprítomnosť vírusu hepatitídy B v krvi pacienta je normou, ale v niektorých prípadoch po štúdii odborníci konštatujú, že v biologickom materiáli sa zistili nevýznamné koncentrácie niektorých fragmentov RNA (kyselina ribonukleová). Identifikujte ich pomocou PCR (polymerázová reťazová reakcia).

Tento krvný test umožňuje identifikovať pôvodcu hepatitídy C v ranom štádiu vývoja ochorenia a stanoviť diagnózu s vysokou presnosťou. Štúdia je založená na skutočnosti, že vírusy majú vo svojej štruktúre molekuly DNA (hepatitída B) alebo RNA (hepatitída C).

Počas analýzy PCR pomocou špeciálnej liečby vzoriek krvi pacienta:

  • zvýšenie koncentrácie molekúl nukleovej kyseliny;
  • určiť ich typ;
  • stanoviť typ patogénu.

Ak je v ľudskej krvi malé množstvo fragmentov patogénovej RNA, všetky z nich budú detegované pomocou PCR. To umožňuje presné stanovenie diagnózy. Hlavným rozdielom tejto analýzy od všetkých ostatných výskumných metód je 100% presná diagnostika.

Táto analýza sa uskutočňuje v štúdii krvi tehotných žien, ktoré sa prihlásili na pred pôrodnú kliniku na registráciu, s podozrením na hepatitídu C s dlhým latentným (latentným) obdobím, s ťažkosťami s presnou diagnózou pomocou ELISA. PCR je nevyhnutná v prípadoch, keď sa po enzýmovom imunoanalýze dosiahol pochybný výsledok.

V tejto situácii je vírus hepatitídy C v tele pacienta, ale zatiaľ nevyvolala rýchly rozvoj ochorenia. Toto je latentný priebeh ochorenia. Analýza sa vykonáva pomerne rýchlo, pretože nie je potrebné pestovať patogén pomocou živného média, aby sa dosiahol výsledok. Hlavným rozdielom medzi PCR a enzýmovou imunoanalýzou (ELISA) je, že v tejto štúdii neexistuje žiadna falošne pozitívna alebo pochybná výsledok.