PCR analýza pre hepatitídu B

DNA vírus rodiny Hepadnaviridae je priamym pôvodcom hepatitídy B. Analýza hepatitídy B pomocou PCR umožňuje detekciu vírusu infikovanej DNA v krvi pacienta. Výsledok pozitívneho typu na HBV DNA dokazuje prítomnosť infekcie v krvi pacienta. Je potrebné poznamenať, že diagnóza pomocou PCR analýzy umožňuje nielen určiť prítomnosť infekcie, ale aj jej kvantitatívne zaťaženie a aktivitu. Táto metóda je spoľahlivá, presná a reprodukovateľná. Kvantifikácia HBV DNA pomocou qPCR sa môže použiť na monitorovanie účinnosti HBV terapie a je užitočná na pochopenie prirodzenej histórie HBV v endemickej oblasti.

K infekcii hepatitídou B dochádza prostredníctvom domáceho alebo sexuálneho kontaktu - priamym kontaktom s infikovanou krvou. Po infekcii vírus vstupuje do pečeňových buniek, v ktorých pokračuje v aktívnej reprodukcii. Cez krvný obeh sa patogénne bunky rozšírili po celom tele. Stojí za zmienku, že bunky hepatitídy B sú vysoko odolné voči kyselinám a vysokým teplotám. Je schopný udržať svoje škodlivé vlastnosti po dobu šiestich mesiacov.

Typy PCR pre hepatitídu B

K dnešnému dňu existujú dva typy diagnostiky, ktoré sú predpísané, ak máte podozrenie na prítomnosť vírusu hepatitídy B: kvalitatívna PCR (umožňuje určiť so 100% presnosťou prítomnosť vírusu v krvi) a kvantitatívnu PCR (umožňuje určiť stupeň vírusovej aktivity).

Ak existuje podozrenie na infekciu HBV alebo ak iné diagnostické metódy nepriniesli jasné výsledky, predpíše sa vysokokvalitná PCR. Tento typ PCR analýzy je veľmi ľahko dešifrovateľný: negatívny (žiadny vírus nebol detegovaný v krvi), pozitívny (vírus detegovaný v krvi). Hlavnou úlohou kvalitatívnej analýzy je zistiť prítomnosť infikovaných buniek v skorých štádiách ochorenia. Ak bol vírus diagnostikovaný dva týždne po údajnej infekcii, účinnosť liečby bude oveľa vyššia. Ak je vírus v krvi asi dva mesiace, ochorenie sa stáva chronickým, preto sa nedá úplne vyliečiť.

Ak kvalitatívna diagnóza potvrdí prítomnosť HBV v krvi, lekár Vám predpíše kvantitatívnu analýzu.

Kvantitatívna analýza umožňuje určiť aktivitu vývoja vírusu v tele pacienta. Tento typ PCR analýzy je priradený:

• určiť štádium ochorenia;
• monitorovať účinnosť aplikovanej terapie;
• na stanovenie úrovne rezistencie vírusu na konkrétny liek;
• na výber liekov.

Kvantitatívne ukazovatele vírusu v krvi sa merajú v IU na mililiter alebo DNA na mililiter.

Ak lekár predpíše kvantitatívnu diagnózu okamžite, bez kontroly kvality, potom sa za normu považuje 75 IU na mililiter. Ak sa zistí menej medzinárodných jednotiek, výsledkom je, že HBV sa nezistí, keď sú hodnoty nad normálne, pričom sa diagnostikuje prítomnosť vírusovej hepatitídy B.

Interpretácia kvantitatívnej diagnostiky

Nasledujúce ukazovatele (v kópiách / mililitroch) sa považujú za normu CRP pri hepatitíde B: menej ako 10 3 - inaktívny vírus; od 10 4 do 10 5 - vírus je zvyčajne neaktívny; - aktívny vírus; 10 - vírus vo vysokom štádiu aktivity.

Na základe kvantitatívnych ukazovateľov je možné určiť so 100% presnosťou formu ochorenia (nosič, akútna alebo chronická), reakciu vírusu na liečbu, potrebu ďalšej diagnostiky.

Chronická forma hepatitídy B je stanovená, ak je aktivita vírusu 105 kópií na mililiter. Dopravca je diagnostikovaný v prípade, že skóre je nižšie ako 10 kópií na mililiter.

Počas obdobia liečby je potrebné pravidelne (raz za tri mesiace) opakovať kvantitatívnu diagnostiku, aby sa včas zvážilo obdobie, kedy sa vírus vyvíja imunitu voči použitým liekom a mení sa metóda. Ak boli všetky štúdie vykonané správne a bola zvolená účinná liečba, opakovaná analýza (po troch dňoch liečby) ukáže pokles aktivity patogénnych buniek aspoň o osemdesiatpäť percent.

Biopsia pečene sa uskutočňuje len v prípade, keď šesť mesiacov liečby preukázalo, že hladiny ALT sú dvakrát vyššie ako normálne a PCR diagnostika ukazuje rýchlosť nižšiu ako 105 kópií na mililiter krvi.

Príprava na prieskum

Na analýzu je potrebná venózna krv. Aby sa dosiahli čo najpresnejšie výsledky, je potrebné pripraviť sa na postup: odmietnuť prijať potravu najmenej osem hodín pred odberom krvi; na dva dni odmietnuť liečbu drogami (je nevyhnutné upozorniť lekára na užívanie liekov); pred darovaním krvi musíte stráviť dvadsať minút v režime pokoja; Dvanásť hodín pred zákrokom sa vzdávajte športových cvičení, alkoholických nápojov, fajčenia a jesť tučné jedlá.

Je dôležité: ak je diagnóza potrebná pre dieťa mladšie ako päť mesiacov, potom musí každých desať minút šesťdesiat minút pred odberom krvi podať pohár prevarenej vody.

Zhrnutie

PCR analýza hepatitídy B je dnes najpresnejšou metódou na diagnostiku vírusu. Metóda umožňuje určiť mutované a skryté formy ochorenia, diagnostikovať ochorenie v prvých dňoch infekcie, preto zvoliť najúčinnejšiu liečbu. Laboratórny asistent porovnáva výsledky analýzy s normou a potom ich privádza k záveru. Údaje sa spracujú do dvoch týždňov. Aby sme získali odporúčanie pre PCR analýzu, je potrebné kontaktovať hepatológa, špecialistu na infekčné ochorenia alebo virologa. Je dôležité si uvedomiť, že čím skôr sa dostanete k lekárovi, tým rýchlejšie výsledky dosiahnete, a preto bude liečba efektívnejšia.

Náklady na krvné testy a PCR na hepatitídu C

Hepatitída C je zápalová patológia, v ktorej sú postihnuté pečeňové bunky. Choroba sa vyvíja v dôsledku prenikania vírusu hepatitídy C (HVC) do ľudského tela.

Forma ochorenia môže byť akútna alebo chronická.

Najčastejšie chýbajú príznaky akútnej formy patológie u väčšiny pacientov, niekedy je choroba sprevádzaná bolestivými pocitmi v bruchu, zníženým výkonom, zvýšenou únavou, stratou chuti do jedla, tmavým nádychom moču, sfarbením stolice, žltnutím kože a slizníc, bolesťami kĺbov. Takéto príznaky sa zvyčajne vyskytujú 6-8 týždňov po infekcii, ale môžu sa objaviť po šiestich mesiacoch.

S rozvojom takýchto javov je potrebné kontaktovať zdravotnícke zariadenie a podrobiť sa komplexnému vyšetreniu celého organizmu. V rámci lekárskeho vyšetrenia sa vykoná krvný test na hepatitídu C.

Dnes, s pomocou moderných diagnostických techník, môže byť táto patológia identifikovaná v počiatočnom štádiu vývoja, čo výrazne zvyšuje šance na úplné vyliečenie ochorenia.

Na testovanie na hepatitídu C sú potrebné tieto skupiny ľudí:

• ženy v období nosenia dieťaťa;
• osoby so známkami hepatitídy;
• zdravotnícky personál;
• potenciálnych darcov orgánov a krvi;
• narkomani, osoby infikované HIV, promiskuitný intímny život.

Zoznam požadovaných štúdií

Aké testy mám užívať na hepatitídu C? Na presné diagnostikovanie ochorenia, identifikáciu jeho príčin a určenie stavu parenchýmu pečene sú potrebné nasledujúce štúdie:

• všeobecné testy moču a krvi;
• biochemická analýza krvi;
• PCR analýza;
• krvný test na detekciu protilátok proti HVC;
• krvný test dostupných protilátok proti vlastným pečeňovým bunkám;
• biopsia pečene.

Rozlúštenie krvného testu na hepatitídu C vykonáva odborník. Podrobnejšie zvážte každú metódu výskumu a pochopíme, ktorá analýza hepatitídy C je najpresnejšia.

Všeobecná analýza

Pri vykonávaní kompletného krvného obrazu na hepatitídu C môžete zhodnotiť stav pacienta. Zmeny krvných parametrov nie sú vnímané ako špecifické príznaky hepatitídy, avšak pri tejto chorobe existujú také poruchy, ako sú:

• koncentrácia hemoglobínu, trombocytov a leukocytov klesá;
• zvyšuje obsah lymfocytov;
• je porušená zrážanlivosť krvi;
• zvyšuje rýchlosť sedimentácie erytrocytov (ESR).

Všeobecná analýza moču umožňuje vo svojom zložení odhaliť urobelín - žlčový pigment, ktorý sa vyskytuje v moči v dôsledku zhoršenej funkcie pečene.

Biochemická analýza

Biochemická analýza krvi pri hepatitíde C umožňuje identifikovať takéto poruchy ako:

• zvýšené hladiny pečeňových enzýmov (alanín transamináza - ALT a aspartátaminotransferáza - AST), ktoré vstupujú do krvi, keď sú poškodené hepatocyty. V normálnom stave by tieto ukazovatele pre mužov nemali byť vyššie ako 37 IU / l, pre ženy - nie vyššie ako 31 IU / l. Zvýšená koncentrácia ALT a AST pri asymptomatickej hepatitíde C je často jediným príznakom tohto ochorenia. Okrem toho sa zvyšuje hladina alkalickej fosfatázy glutamyltranspeptidázy (zvyčajne nie vyššia ako 150 IU / l).
• prekračuje sa obsah bilirubínu (všeobecného aj priameho) v krvi. Ak hladina žltého pigmentu v sére presiahne 27-34 µmol / l, objaví sa žltačka (až 80 µmol / lv miernej forme, 86-169 µmol / lv stredne ťažkej forme, nad 170 µmol / lv ťažkej forme).
• Hladina albumínu sa znižuje, naopak koncentrácia gama globulínov sa zvyšuje. Gama globulíny sú tvorené imunoglobulínmi - protilátkami, ktoré chránia telo pred látkami spôsobujúcimi ochorenie.
• zvýšená koncentrácia triglyceridov v krvi.

PCR test

Pomocou PCR techniky je možné diagnostikovať pôvodcu. Vykonanie tejto analýzy umožňuje odhaliť vírus v krvi, aj keď je jeho množstvo minimálne. PCR analýza hepatitídy C umožňuje stanoviť existujúcu infekciu v krvi už po 5 dňoch od okamihu infekcie, teda dlho predtým, ako sa objavia protilátky.

Ak je výsledok krvného testu na hepatitídu C PCR pozitívny, znamená to prítomnosť aktívnej infekcie v tele. Pomocou tejto metódy môžete vykonať kvalitatívnu a kvantitatívnu štúdiu HVC RNA.

Počas kvalitatívnej analýzy PCR na hepatitídu C je možné detegovať existujúci vírus v ľudskom tele.

Tento diagnostický postup sa vykonáva, ak sa v krvi zistí anti-HVC.

Rozlúštenie analýzy hepatitídy C obsahuje informácie, že infekcia bola zistená alebo nebola zistená v tele. Normálne sa v krvi nenachádzajú žiadne patologické látky.

Ak je test hepatitídy C pozitívny, znamená to, že patogén sa nepretržite delí a infikuje pečeňové bunky.

Výsledky tejto analýzy môžu byť nespoľahlivé, je to možné v nasledujúcich prípadoch:

• použitý kontaminovaný biomateriál;
• v prítomnosti heparínu v krvi;
• v prítomnosti chemických alebo proteínových látok (inhibítorov) v skúmanom biomateriáli, ktoré ovplyvňujú prvky PCR.

Kvantitatívna analýza hepatitídy C poskytuje informácie o množstve vírusu obsiahnutého v krvi, to znamená určuje vírusovú záťaž. Týmto pojmom sa myslí objem HVC RNA prítomnej v krvi (napríklad v 1 ml). Pri interpretácii kvantitatívnej analýzy hepatitídy C je táto hodnota vyjadrená v digitálnom ekvivalente meranom v IU / ml.

Krv pre PCR na hepatitídu C sa odoberá pred terapeutickými opatreniami. Po analýze sa uskutoční 1, 4, 12 a 24 týždňov. Štúdia v 12. týždni je indikatívna a vykonáva sa na posúdenie účinnosti terapeutických postupov.

Ak je test na hepatitídu C počas tehotenstva pozitívny a hodnoty vírusovej záťaže sú prekročené, riziko prenosu patogénov z chorej matky na dieťa sa niekoľkokrát zvyšuje. Aj pri zvýšenej vírusovej záťaži je vykonávanie terapeutických opatrení ťažké.

Podľa prepisu testov na hepatitídu C, ak hodnoty vírusovej záťaže presiahnu 800 000 IU / ml, potom sú vysoké. Ak sú hodnoty nižšie ako 400 000 IU / ml, hladina vírusovej záťaže sa považuje za nízku.

Analýza hepatitídy C pomocou PCR sa považuje za najpresnejšiu a má niekoľko výhod oproti iným možnostiam výskumu, a to:

• priamu diagnózu pôvodcu ochorenia. Pri vykonávaní tradičných štúdií sa určuje prítomnosť proteínových markerov, ktoré sú odpadovými produktmi patogénov. To len naznačuje, že infekcia je prítomná v krvi. Pri testovaní na hepatitídu C pomocou PCR je možné určiť typ patogénu nebezpečnej patológie.
• špecifickosť techniky. Počas tohto postupu sa v biomateriále stanoví jedinečná oblasť DNA, ktorá zodpovedá iba jednému typu patogénu. Tým sa minimalizuje pravdepodobnosť falošných výsledkov.
• vysoká citlivosť. Pri vykonávaní analýzy PCR môžete zistiť minimálne množstvo vírusu. Je to dôležité, ak sa identifikujú podmienečne patogénne látky, ktoré predstavujú hrozbu len vtedy, ak sa ich úroveň zvyšuje.
• Pri použití tejto techniky v jednej vzorke biomateriálu možno naraz detegovať niekoľko patogénov.
• môže odhaliť skryté infekcie. Okrem toho analýza umožňuje diagnostikovať patogénne mikroorganizmy, ktoré žijú v bunkách a majú vysokú antigénnu variabilitu.

Ak sú výsledky testov pozitívne, potom sa v biomateriáli nachádzajú stopy vírusu, potom má sieť infekciu v tele.

Negatívna PCR analýza hepatitídy C znamená, že v biomateriále nie sú žiadne stopy infekcie.

Imunologická štúdia

Táto metóda vám umožňuje identifikovať protilátky proti všetkým typom vírusu hepatitídy, ako aj protilátky proti pečeňovým bunkám vlastného tela, ktorých vzhľad prispieva k rozvoju autoimunitnej hepatitídy.

Výsledky získané počas štúdie sú relevantné počas 3 mesiacov, potom by ste mali znovu darovať krv na hepatitídu C.

Expresnú štúdiu je možné vykonať aj pomocou špeciálnych testovacích prúžkov. Táto analýza umožňuje stanovenie protilátok proti vírusu C v zložení krvi a slín, tento postup sa môže vykonávať samostatne, doma.

Biopsia pečene

Na vykonanie tejto analýzy sa použije prvok parenchýmu pečene a vykoná sa histologické vyšetrenie získaného biomateriálu. To vám umožní posúdiť stav tela: identifikovať zápalové, nekrotické ložiská, štádium fibrózy a tak ďalej.

V súčasnosti sa používajú testy, ktoré nahrádzajú histologickú analýzu pečeňového parenchýmu.

Na posúdenie štádia poškodenia pečene a intenzity zápalového procesu sa používajú špecifické biomarkery venóznej krvi. Pomocou Fibrotestu môžete odhadnúť stupeň rastu fibrózneho tkaniva.

Pri vykonávaní Actitestu môžete získať informácie o intenzite patologických procesov v pečeňovom parenchýme. Použitie Steatototesta môže diagnostikovať tukové tkanivo pečene a vyhodnotiť rozsah tohto procesu. Fibromax pozostáva zo všetkých vyššie uvedených testov a môže zahŕňať niektoré ďalšie štúdie.

Príprava na štúdium

Aké testy sa vykonávajú na hepatitídu C a ako sme zistili tento alebo takýto typ výskumu. Rovnako dôležité je vedieť, ako sa pripraviť na analýzu.

Na získanie spoľahlivých výsledkov sa odporúča dodržiavať nasledujúce požiadavky:

• Testy hepatitídy C sa musia vykonávať ráno, nalačno. Jedlo by sa malo konzumovať najmenej 8 hodín pred štúdiou.
• Biomateriál sa môže zbierať vo dne alebo vo večerných hodinách. V tomto prípade je dôležité, aby medzi posledným jedlom a analýzou uplynulo aspoň 5-6 hodín.
• pred darovaním krvi na hepatitídu C by sa mal zlikvidovať čaj, káva, džús alebo iné nápoje, povolená je len voda.
• 48 hodín pred štúdiou je potrebné vylúčiť použitie mastných, vyprážaných potravín a nápojov obsahujúcich alkohol.
• aspoň hodinu pred analýzou sa musíte zdržať fajčenia.
• analýza sa nemá vykonať bezprostredne po ultrazvuku, inštrumentálnom vyšetrení, röntgenovom vyšetrení, masáži alebo fyzioterapii.
• jeden deň pred realizáciou štúdie je potrebné vylúčiť používanie liekov a intenzívnu fyzickú aktivitu. Kontraindikovaný je aj emocionálny stres.
• Odporúča sa stráviť 15 minút pred vykonaním štúdie v pokojnom stave.

Vykonanie postupu odberu krvi

Kde sa dá testovať na hepatitídu C? Biomateriál sa používa na ďalšie vyšetrenie v laboratóriu zdravotníckeho zariadenia alebo u pacienta doma.

Krv zo žily sa berie nasledovne:

• pomocou špeciálnej škrtiacej kocky omotanej okolo predlaktia pacienta sa zastaví prietok žily. Vďaka takýmto manipuláciám sa žily naplnia krvou a budú viditeľnejšie, čo značne uľahčí proces vkladania ihly.
• oblasť kože, do ktorej sa ihla vloží, sa opatrne spracuje alkoholom alebo kvapalinou obsahujúcou alkohol.
• Ihla sa jemne vloží do žily, potom sa k nej pripojí skúmavka, špeciálne navrhnutá na odber krvi.
• Ihneď po zavedení ihly do žily sa z paže pacienta vytiahne stláčací postroj.
• po odobratí objemu krvi potrebnej na analýzu sa ihla jemne vyberie zo žily.
• Na miesto vpichu injekcie sa musí aplikovať sterilný vatový tampón alebo gázová vložka navlhčená alkoholom.
• aby sa zabránilo výskytu hematómu, tampón by mal byť stlačený s určitým úsilím proti oblasti vpichu ihly, ohnúť rameno pri lakte a držať ho v tejto polohe niekoľko minút. Takéto akcie tiež pomôžu zastaviť krv rýchlejšie.

Za predpokladu, že technika vnútorného podávania je dobrá, tento postup je absolútne bezpečný a nespôsobuje bolestivé pocity.

V zriedkavých prípadoch po odbere krvi môžu žily napučiavať. Tento jav sa nazýva "flebitída". Kompresia (nie horúca) pomôže vyriešiť problém, mal by sa aplikovať na opuchnuté oblasti kože niekoľkokrát denne.

Určité problémy sa môžu vyskytnúť aj v prípade poruchy krvácania. Užívanie aspirínu, warfarínu a iných riedidiel krvi môže spôsobiť krvácanie. Preto je pred vykonaním analýzy potrebné odmietnuť akékoľvek lieky. Ak sa liečba nedá zrušiť, informujte o tom odborníka.

Termíny a ceny

Koľko sa testuje na hepatitídu C? Výsledky krvného testu na hepatitídu môžu byť pripravené v priebehu niekoľkých hodín a za niekoľko dní (zvyčajne nie viac ako 8 dní). Trvanie prípravy výsledkov závisí od typu vírusu a zvolenej metódy analýzy. Rýchlejšia je štúdia uskutočnená metódou PCR. Výsledky v tomto prípade budú pripravené v priebehu niekoľkých hodín.

Koľko stojí test na hepatitídu C? V závislosti na klinike a zložitosti štúdie sa cena zákroku môže pohybovať od 400 do 11 000 rubľov.

Mali by ste vedieť, že vytvorenie dostatočného množstva protilátok proti HVC môže trvať niekoľko týždňov. Preto v počiatočnom štádiu vývoja patológie môže byť výsledok štúdie falošne negatívny.

Získavanie nespoľahlivých údajov je možné aj pri nekvalitnej analýze a porušovaní podmienok prepravy získaného biomateriálu (vzorky musia byť dodané do laboratória maximálne 2 hodiny po odbere krvi).

Ak je výsledok štúdie pozitívny, mali by ste okamžite kontaktovať lekára infekčných chorôb. Odborník vykoná ďalšie vyšetrenie a predpíše vhodnú liečbu.

Podstata analýzy PCR pre hepatitídu B a jej výsledky

Vírusová hepatitída B sa úspešne lieči, ak je včas detegovaná a počet protilátok a antigénov v krvi pacienta je správne stanovený. Pomocou enzýmového imunotestu na hepatitídu je možné detegovať prítomnosť vírusových markerov, ale nemôžu určiť presný stupeň procesu.

Na kvantitatívne hodnotenie sa použila PCR diagnostika. Pomocou testu je možné pomocou antivírusových liekov spočítať počet markerov, predpovedať priebeh ochorenia a pravdepodobnosť vyliečenia.

Hlavnou výhodou štúdie je schopnosť detegovať aj minimálne koncentrácie vírusu, identifikovať patogén v štádiu druhu.

Diagnóza hepatitídy B

Vírus hepatitídy B je vysoko nákazlivý a odolný voči vonkajším vplyvom. Zostáva aktívny v krvi pacienta niekoľko týždňov. Preto je každá osoba vystavená riziku infekcie, aj keď je pozorovaná profylaxia.

Ak chcete diagnostikovať ochorenie, predpíšte nasledujúce štúdie:

Podstata metódy PCR

Americký chemik K.Mullis dostal Nobelovu cenu a jeho diagnostická metóda sa stále používa.

Predchodca PCR metódy (polymerázová reťazová reakcia) je považovaný za vedca z Nórska H. Kleppe. Najprv začal vykonávať amplifikáciu (regeneráciu) DNA s použitím krátkeho reťazca DNA, to znamená syntetického priméru (druh kópie).

Vedec si však svoju myšlienku neuvedomil. Podobné štúdie vykonal americký chemik K.Mullis, ktorý v roku 1993 získal Nobelovu cenu za svoj vynález. Odvtedy bola PCR použitá na stanovenie otcovstva, diagnostikovanie genetických ochorení a detekciu vírusov.

Podstatou reakcie je, že pomocou enzýmov sa skopíruje určitá časť DNA. Môžete kopírovať iba oblasť, ktorá zodpovedá zadaným parametrom a ak je v predloženej vzorke. Na začatie reakcie sa používajú nasledujúce zložky:

1. Matrix DNA s miestom, ktoré sa má kopírovať.
2. Priméry podobné štruktúre ako DNA.
3. Polymeráza, to znamená enzým, ktorý spúšťa reakciu. Mala by byť termostabilná, to znamená, aby odolala teplotným extrémom.
4. Roztok s určitými parametrami, zabezpečujúci priechod reakcie.

Reakcia sa uskutočňuje v niekoľkých stupňoch:

Na detekciu hepatitídy B sa používajú dva typy reakcií: kvantitatívne a kvalitatívne.

Kvantitatívna PCR

Kvantitatívna metóda určuje množstvo genómu HBV

Kvantitatívna PCR zahŕňa simultánnu tvorbu kópií fragmentov DNA a stanovenie počtu molekúl. Meranie sa vykonáva po každom stupni, to znamená v reálnom čase. To sa dosahuje použitím fluorescenčných sond, ktoré sú obsiahnuté v reťazci molekúl a žiarenia v určitom období štúdie.

Táto metóda sa používa na detekciu fragmentov DNA, ktoré sú markermi vírusu hepatitídy. Pomocou kvantitatívnej metódy je možné presne izolovať genotyp vírusu. Inými slovami, vypočíta sa počet kópií genómu HBV na počet buniek pacienta.

Kvantitatívna analýza poskytuje odpovede na nasledujúce otázky:

1. S akou intenzitou choroba postupuje.
2. Ako účinná je liečba.
3. Vyvinula sa rezistencia voči liekom?

Kvantitatívne meranie je tiež nevyhnutné pre diagnostiku chronického štádia infekcie. Ak je množstvo DNA nižšie ako 100 ks / ml na normálnej úrovni transaminázy, potom je osoba nositeľom vírusu.

V akútnej fáze je množstvo protilátok omnoho vyššie, pri antivírusovej terapii zvýšenie počtu protilátok indikuje vývoj rezistencie na liečivo, čo je signál na úpravu liečby.

Vysoko kvalitná PCR

Vysoko kvalitná PCR poskytuje menej informácií, ale dokáže eliminovať infekciu.

Vysoko kvalitná PCR môže iba potvrdiť prítomnosť patogénu v krvi. Ak sú neprítomní, pacient nie je infikovaný, ak patogén vstúpi do krvi, výsledok bude pozitívny.

S pomocou kvalitatívnej reakcie však nie je možné objasniť genóm vírusu, štádium ochorenia. Preto pre diagnózu HBV vykonali kvantitatívne aj kvalitatívne merania.

Príprava na prieskum

Na analýzu PCR sa vyžaduje venózna krv. To sa musí urobiť ráno nalačno.

Pacient by sa mal na štúdiu riadne pripraviť:

1. Na 10 hodín odmietnuť jedlo, môžete piť len čistú vodu.
2. V predvečer prestať užívať alkohol, po dobu 4 hodín nefajčiť.
3. Pred vyšetrením sa treba vyvarovať fyzického a emocionálneho stresu.
4. Ak to nie je možné, prestaňte užívať lieky počas 2 dní, je potrebné informovať laboratórneho technika. Niektoré lieky majú vplyv na konečný výsledok.

Interpretácia údajov

V kvantitatívnej reakcii sa získané indikátory hodnotia v závislosti od počtu kópií DNA.

Je ľahké interpretovať údaje merania kvality. On dáva buď pozitívnu alebo negatívnu odpoveď.

V kvantitatívnej reakcii je možné vyhodnotiť získané indikátory v závislosti od počtu kópií DNA. Mernou jednotkou sú kópie / ml.

Dáta sa dekódujú nasledovne:

1. Ak je množstvo DNA HBV menšie ako 90, potom infekcia chýba. U pacienta sa vyvinula imunita po očkovaní alebo sa vyliečil z choroby.
2. Keď sa počet kópií 2x100 hovorí o nosiči vírusu.
3. Počet 2x106 označuje chronické štádium ochorenia.
4. S DNA viac ako 2x109 má pacient akútne štádium hepatitídy.

Chybné výsledky

Výhody diagnostickej metódy pri použití polymerázových reakcií sú nasledovné: t

1. Priama detekcia patogénov. Naproti tomu test ELISA poskytuje informácie o prítomnosti protilátok proti vírusu.
2. Špecifickosť. To znamená, že je to DNA oblasť, ktorá je prítomná vo vzorke biomateriálu, ktorá sa kopíruje.
3. Precitlivenosť. Spôsob môže dokonca detekovať fragmenty jednotlivých buniek.
4. Diagnostika chorôb v akútnom a latentnom štádiu. To znamená, že ochorenie je možné diagnostikovať v štádiu predklinických prejavov.

Metóda má nedostatky, ktoré vedú k falošným výsledkom. Najvýznamnejšou nevýhodou je pravdepodobnosť kontaminácie materiálu. Hlavným zdrojom kontaminácie sú zle spracované skúmavky, laboratórne ruky, reagencie.

Časť DNA z predchádzajúcej reakcie môže vstúpiť do krvi. Preto sa na laboratóriá kladú zvýšené hygienické požiadavky: oddelené miestnosti, plastové rúrky, ultrafialové spracovanie laboratórií atď.

Falošne negatívne výsledky môžu byť spôsobené zníženou citlivosťou reakcie. To sa deje v nasledujúcich situáciách:

• pacient užíva lieky, napríklad antikoagulanciá;
• osoba bola pred analýzou vystavená fyzickému stresu (šport, tvrdá práca);
• nedávno sa vyskytla infekcia.

Ak má pacient vysokú pravdepodobnosť infekcie a výsledok štúdie je negatívny, musí byť znovu vyšetrený.

Pozri tiež:

záver

Metóda polymerázovej reťazovej reakcie je hlavnou a najviac informatívnou pre diagnostiku HBV. To umožňuje nielen stanoviť stav dopravcu infekcie, ale aj objasniť štádium ochorenia, vyhodnotiť výsledky liečby.

Pre presnejšiu diagnostiku sa používa kvalitatívne a kvantitatívne meranie. Nevýhodou metódy je pravdepodobnosť kontaminácie, znížená citlivosť a pomerne vysoká cena.

Aby boli výsledky čo najspoľahlivejšie, mali by sme sa riadne pripraviť na štúdiu a vykonávať ju na klinike s príslušnou licenciou a dobrou povesťou.

Vykonanie PCR analýzy hepatitídy C a dekódovanie výsledkov

Analýza PCR hepatitídy C je štúdia, ktorej hlavným účelom je identifikovať genetický materiál pôvodcu. Analýza odhalila pôvodcu ochorenia pomocou polymerázovej reťazovej reakcie. Táto diagnóza má vysoký stupeň presnosti, špecifickosti na detekciu neprítomnosti alebo prítomnosti vírusovej infekcie.

Podstata diagnózy

Aby sa uskutočnila PCR analýza na stanovenie vírusu hepatitídy C od pacienta, odoberie sa venózna krv, ktorá potenciálne obsahuje HCV (ribonukleová kyselina) požadovaného vírusu.

Test PCR na hepatitídu C zahŕňa postup pridania do krvných častíc pacienta:

• priméry (krátke umelo syntetizované oblasti potrebného génu);
• špeciálny enzým (RNA polymeráza).

Po odbere vzoriek sa biologický materiál posiela na výskum do laboratória. Jedna časť krvi je potrebná na priamu PCR analýzu, druhá na testovanie pomocou ELISA. Enzým je schopný v krátkom čase zvýšiť počet genetického materiálu vírusu patogénu. V špeciálnom zariadení sa vykonáva niekoľko cyklov tepelných a chladiacich procesov. V poslednom štádiu sa získaný materiál porovná s génmi vírusu a urobí sa záver o prítomnosti alebo neprítomnosti patológie v tele pacienta.

Podstata a priebeh PCR analýzy v laboratóriu. Natočené SiberianMedicalLaboratory.

Typy výskumu

Existujú 3 typy diagnostiky, ktoré umožňujú určiť prítomnosť vírusu hepatitídy C v ľudskom tele:

• genotypu;
• kvalita;
• kvantitatívne.

Kvalitatívna metóda

Diagnóza hepatitídy C s kvalitatívnou metódou je použiteľná u pacientov, u ktorých sa v krvnom teste detegujú protilátky proti vírusu. V prípade prítomnosti akútnej fázy HCV RNA takéto diagnostické opatrenia môžu určiť prítomnosť ochorenia v priebehu 1-2 týždňov po infekcii. Počas tohto obdobia sa ešte nemusia vyvinúť protilátky proti hepatitíde C.

Kvantitatívna metóda

Na stanovenie koncentrácie vírusu vo vzorkách krvi sa používa kvantitatívna diagnostická metóda. Takýto test na virémiu (stupeň koncentrácie) umožňuje presne určiť počet jednotiek vírusovej RNA. Konečný výsledok je vyjadrený v príslušnom objeme. Ak hovoríme o kvantitatívnej analýze, potom sa indikátory merajú v 1 ml (1 m 3).

Parameter vírusovej záťaže znamená úroveň infekčnosti ochorenia, to znamená, že odráža stupeň "infekčnosti" pacienta. V praxi to znamená, že čím vyššia je koncentrácia vírusu v krvi, tým väčšia je šanca pre pacienta infikovať iných hepatitídou C. Kvantitatívna výskumná metóda vám tiež umožňuje stanoviť kvalitu a účinnosť liečby.

genotypu

Genotypizácia odhalila mutácie pôvodcu ochorenia. Pred predpísaním plánu liečby sa stanoví genotyp vírusu: závisí od neho kvalita a trvanie liečby. Napríklad pri liečení ochorenia typu I je účinnosť 60%, v prípade typu II, typu III - približne 80%.

Výhody analýzy hepatitídy PCR

Medzi hlavné výhody postupu patrí:

1. Možnosť včasnej diagnostiky. PCR analýza je schopná detekovať prítomnosť vírusu v skorých štádiách infekcie.
2. Nízke výsledky chýb. Študovaný biologický zdroj vám umožňuje diagnostikovať časť genetického materiálu, ktorá je charakteristická len pre jeden typ vírusovej infekcie. Táto okolnosť umožňuje zabrániť falošným diagnostickým výsledkom.
3. Vysoká citlivosť. PCR analýza je schopná detekovať RNA vírusu v malých množstvách, čo tiež umožňuje sledovať latentné infekcie v čase.

Indikácie pre

Testovanie na PCR na hepatitídu C je nevyhnutné, ak je k dispozícii:

• kontakt s chorými ľuďmi, čo by mohlo viesť k infekcii;
• príznaky cirhózy pečene (zväčšenie sleziny, nezvyčajné zmeny veľkosti pečene, detekcia venózneho plexu na bruchu pod kožou);
• pozitívne výsledky ELISA;
• zvýšená aktivita AST a ALT (prejavuje sa biochemickou analýzou krvi);
• potreba kontroly správania antivírusovej terapie;
• počiatočné štádium liečby pre potrebu stanoviť vírusovú záťaž;
• vykonanie poslednej fázy terapie na vylúčenie možných opakovaní;
• pacient má hepatitídu B na vylúčenie vzniku zmiešaného poškodenia pečene.

Ako sa pripraviť na darovanie krvi pre výskum PCR

Príprava na PCR analýzu zahŕňa nasledujúce odporúčania:

• krv sa odoberá ráno;
• analýza sa vykonáva na lačný žalúdok, preto sa odporúča prestávka medzi posledným príjmom potravy 8 až 10 hodín;
• niekoľko dní pred diagnózou by mali byť vylúčené mastné, korenené a vyprážané potraviny, alkoholické nápoje a fajčenie;
• jeden deň pred analýzou sa treba zdržať ťažkej fyzickej námahy, vylúčiť triedy v telocvični alebo bazéne.

Výsledky analýzy: normy a odchýlky

Samotná analýza nie je dlhodobá a vysoko kvalifikovaný špecialista na hepatológ alebo infekčné ochorenie dešifruje výsledky PCR na hepatitídu C. Na základe výsledkov analýzy je pacient diagnostikovaný.

S cieľom správne dešifrovať výsledky prieskumu sa zohľadňujú tieto ukazovatele: t

• biochemická analýza krvi;
• ultrazvukové dáta;
• výsledky biopsie.

Interpretácia kvantitatívnej analýzy

Pri získavaní výsledkov kvantitatívnej analýzy PCR sa zohľadňujú tieto ukazovatele: t

PCR diagnostika hepatitídy C

Hepatitída C je zápal pečeňových buniek, ku ktorému dochádza v dôsledku infekcie vírusom HCV (hepatitída C) kontaktom s krvou infikovanej osoby. Genetický kód HCV flavivírusu nesie molekula RNA (kyselina ribonukleová) obsiahnutá v štruktúre vírusu. Tento život ohrozujúci jav sa vyznačuje utajením v počiatočnom štádiu patológie. Časový interval medzi infekciou a nástupom symptómov (odpoveď imunitného systému) môže byť od jedného mesiaca do šiestich mesiacov. Choroba má spravidla chronickú formu a je ťažké ju vyliečiť.

Moderná medicína vám umožňuje diagnostikovať patológiu s malým poškodením pečene. Medzi najbežnejšie a najúčinnejšie diagnostické metódy patrí analýza PCR. Zvážte v tomto článku, čo to je a aké druhy existujú.

Čo je to štúdia

PCR analýza hepatitídy C je laboratórne vyšetrenie, ktoré detekuje flavírus, genetický materiál kyseliny ribonukleelénovej (RNA). Určuje počet molekúl RNA v krvi, kvalitu biologického materiálu, genetický typ vírusu HCV.

Metóda PCR pre hepatitídu C umožňuje detegovať minimálne množstvo flaviru pred tvorbou protilátok, spravidla krátko po infekcii.

Štúdia je často označovaná ako analýza RNA, pretože detekuje častice ribonukleovej kyseliny s veľkosťou 30-60 nm obsiahnuté v flavavíruse.

Štúdia sa vykonáva nasledovne: na prázdny žalúdok pacient dáva krv zo žily, ktorá sa potom testuje rôznymi metódami:

• PCR v reálnom čase sa uskutočňuje v uzavretom automatizovanom spôsobe a má dolnú hranicu na detekciu vírusu RNA, ktorá sa rovná 15 IU / ml;
• COBAS AMPLICOR s citlivosťou 50-100 IU / ml.

Čím vyššia je prahová hodnota citlivosti diagnostickej techniky, tým väčšia je pravdepodobnosť nájdenia najnižšieho obsahu vírusu v biologickom materiáli, ktorý je predmetom vyšetrovania.

Aké typy analýz sa používajú

Analýza, ktorá sa úspešne používa niekoľko desaťročí, sa nazýva PCR hepatitída a dá sa ľahko a rýchlo zistiť. V medicíne existujú dve metódy reakcie, ktoré sa navzájom zásadne líšia:

• kvalitatívna metóda odhaľuje prítomnosť v biologickom materiáli genetického zdroja špecifického vírusu;
• kvantitatívna analýza meria počet genetických látok, ktoré umožňujú určiť štádium patológie alebo vyhodnotiť účinnosť terapeutického priebehu;
• genotypovanie určuje typ vírusu prítomného v tele.

Všeobecne platí, že krvný test pomáha identifikovať povahu virémie a genetického typu patogénu. Výskum sa spravidla vykonáva raz v závislosti od stupňa citlivosti diagnostického systému. Ak je to potrebné, opakované testovanie sa vykonáva pomocou ultrazvukového činidla.

Vysoko kvalitná PCR

Čo je vysoko kvalitná PCR RNA pre hepatitídu C? Podstata reakcie spočíva v prítomnosti RNA sekvencie hepatitídy a reakcia je možná len v prítomnosti vírusových proteínov s podobnou etymológiou v teste ELISA. V procese porovnávania sa zistí zaťaženie a možné poškodenie oblasti pečene.

Charakteristickým znakom tejto metódy je schopnosť detegovať aj prítomnosť samostatného génu.

Treba poznamenať, že po získaní výsledkov testov PCR a ELISA si pacient vyžaduje vhodnú liečbu bez ohľadu na to, aký bol konečný výsledok imunotestu. Pozitívne indikuje infekciu a PCR negatívne indikuje redukovaný počet vírusových častíc vzhľadom na úroveň citlivosti.

Existuje niekoľko podmienok, ktoré ovplyvňujú produkciu negatívnej PCR a ELISA:

• nedostatok vhodných podmienok zberu materiálu;
• výsledná analýza obsahuje kontamináciu;
• v prípade skorej injekcie heparínu pacientovi.

Pacient nemusí dodržiavať určité pravidlá odberu vzoriek krvi na analýzu PCR, v tomto prípade závisí kvalita tejto analýzy od toho, či lekár vykonal zákrok. Schopnosť stanoviť prítomnosť ochorenia (najmä v akútnej forme) sa objaví v priebehu niekoľkých týždňov po infekcii.

Kvantitatívna analýza

Kvantitatívny test sa odporúča na detekciu vírusovej záťaže bezprostredne pred tvorbou ďalšej terapie a reakcie organizmu. Proces odberu krvi sa vykonáva podobným spôsobom ako pri vysokokvalitnej PCR a ELISA, jedinou podmienkou je absencia možnosti fajčiť pacienta pred zákrokom.

Vzhľadom na charakteristiky získané štúdiom údajov je zvýšená záťaž charakterizovaná indikátormi od 800000 IU / ml, nízkymi - 400000 IU / ml. Prítomnosť vírusu v tele pacienta je indikovaná PCR na hepatitídu nie je negatívny kvalitatívny test.

Tento druh výskumu umožňuje určiť, aký nebezpečný je pre ľudí ľudí okolo neho. Napríklad identifikácia vysokej hladiny indikuje zvýšenú infekčnosť pacienta. Okrem toho výsledky analýzy pomáhajú formulovať ďalšiu najúčinnejšiu liečbu a určiť, do akej miery sa súčasná liečba považuje za účinnú.

Rýchla negatívna reakcia testov indikuje úspech zvolenej techniky a pomalá naznačuje potrebu úprav a použitia viacfázovej liečby.

Proces vykonávania analýzy závisí od konkrétneho dňa priebehu ochorenia. Prvé stanovenie sa uskutoční prvý deň po prijatí pacienta do nemocnice, potom sa postup opakuje po 4, 12 a 24 týždňoch po užití liekov.

Kvantitatívna analýza teda ukazuje, ktorá liečba je najefektívnejšia, trvanie dostupnej terapie a nebezpečenstvo pacienta vo vzťahu k iným osobám.

genotypu

V štúdii materiálovej analýzy je dôležité určiť presnosť genotypu vírusu, ktorý sa uskutočňuje. V súčasnosti existuje 11 druhov vírusu hepatitídy C, ktoré zase zahŕňajú určité poddruhy.

Všetky tieto druhy reagujú odlišne na rôzne liečby, pričom jednotlivé odrody sú absolútne odolné voči mnohým liekom.

Genotyp umožňuje určiť a ukázať stav pečene. Nie je nezvyčajné, že výsledky nie sú vo výsledkoch „typizované“, čo znamená, že týmto testovacím systémom nie je detekovaný vírus v krvi pacienta. To sa dá zistiť, ak určitý genotyp nezodpovedá tejto zóne. V takejto situácii sa analýza vykonáva opakovane a na štúdium materiálu sa používa citlivejší systém.

Ultra citlivá metóda

Ultrazvuková metóda je nevyhnutná v niektorých prípadoch, keď diagnózu hepatitídy nie je možné vykonať inými metódami, a ak je potrebné vykonať analýzu, určí ošetrujúci lekár:

• ak máte podozrenie na prítomnosť vírusu hepatitídy C u pacientov so skrytou odrodou ochorenia;
• prítomnosť protilátok proti vírusu hepatitídy C, ktorá nebola potvrdená PCR diagnostikou;
• aby sa určila kvalita účinnosti zvoleného spôsobu liečby a potvrdila eliminácia ochorenia.

Citlivosť tejto metódy je oveľa vyššia ako citlivosť bežne používaná, avšak táto metóda nevylučuje získanie falošných výsledkov, pozitívnych aj negatívnych. V takejto situácii je dôležité kontrolovať kvalitu postupu a možnosť kontaminácie samotného materiálu.

Vysvetlenie PCR analýzy

Dekódovanie analýzy sa vykonáva na základe predložených materiálov, pričom výsledky laboratórneho výskumu zahŕňajú určité údaje opísané vyššie.

Transkript môže zahŕňať pozitívnu PCR polymerázovú reťazovú reakciu a negatívny test ELISA v teste, čo znamená, že pacient nemá žiadne príznaky hepatitídy C v krvi, ale v minulosti preniesol akútnu formu ochorenia. Spravidla sa pri diagnostikovaní špecialisti uchyľujú k použitiu indikátorov testu PCR.

Ak zhrnieme všetky uvedené skutočnosti, je možné konštatovať, že počas analýzy je dôležité dodržiavať všetky pravidlá a odporúčania tak, aby boli získané výsledky čo najpresnejšie a na základe získaných údajov je možné určiť efektívnosť použitej terapie a ďalšiu šancu na úplné uzdravenie.

PCR analýza pre hepatitídu C

Na diagnostiku "chronickej vírusovej hepatitídy C (CVHS)" je potrebné komplexné vyšetrenie osoby, ktorá zahŕňa klinické, laboratórne a inštrumentálne štúdie. Z hľadiska diagnózy pre správnu diagnózu je dôležitá metóda PCR - polymerázová reťazová reakcia.

Čo táto analýza ukazuje a prečo je potrebná?

Táto laboratórna metóda detekuje RNA vírusu hepatitídy C v ľudskej krvi. Spolu s enzýmovou imunoanalýzou (ELISA) na protilátky proti vírusu sa používa PCR na stanovenie diagnózy CVHC a jeho genotypu patogénu. Tento výskum je jednou z najnovších metód laboratórnej diagnostiky. Jeho spoľahlivosť pri CVHS prevyšuje 97%, čo sa považuje za veľmi dobrý ukazovateľ výskumu.

Existujú tri PCR krvné testy na CVHS: kvalitatívne, kvantitatívne a vírusové genotypovanie. Prvá štúdia (kvalitatívna analýza) vírusu ho deteguje v krvi, a preto sa používa len na diagnostiku.

Druhá (kvantitatívna) štúdia určuje stupeň vírusovej záťaže na tele, preto sa používa na monitorovanie účinnosti liečby.

Tretia PCR (genotypizácia) objasňuje diagnózu a stanovuje genotyp vírusu, ktorý je veľmi dôležitý pre určenie správnej antivírusovej liečby.

Podstatou techniky polymerázovej reťazovej reakcie je použitie enzýmov, ktoré znásobujú genetický materiál patogénu v biomateriáli. V procese takejto replikácie sa skúmavka s krvou niekoľkokrát zahrieva a ochladí na teplotu potrebnú na urýchlenie enzymatickej reakcie. V dôsledku týchto manipulácií sa množstvo vírusového genómu mnohokrát zvyšuje, čo umožňuje jeho detekciu aj pri minimálnom množstve.

PCR diagnostika má mnoho výhod oproti iným laboratórnym testom:

• vysoká citlivosť - 97-98%;
• zaručená analytická špecifickosť (odhaľuje presne patogén, ktorý chcete nájsť, a nie jeho príbuzný kmeň);
• rýchlosť vedenia (nie je to viac ako 2 dni, aby sme dospeli k záveru).

Tri typy PCR testov

Vysoko kvalitná PCR analýza je priradená všetkým pacientom, u ktorých analýza ELISA detegovala protilátky proti vírusu HVGS. Po vykonaní vysoko kvalitnej PCR je možné získať dve možnosti odpovede: "RNA je detekovaná" alebo "RNA nie je detekovaná." Na zistenie minimálneho množstva vírusu v krvi sú potrebné testovacie systémy s citlivosťou najmenej 50 IU / ml. Ak je koncentrácia vírusu v krvi pacienta nižšia, ako môže určiť diagnostika, výsledok štúdie môže byť falošne negatívny. Aby sa zabránilo takejto diagnostickej chybe, laboratóriá vykonávajúce PCR diagnostiku by mali byť vybavené vysoko citlivými testovacími systémami. V laboratóriu "Invitro" sa používajú napríklad testy s citlivosťou 15 IU / ml. Laboratórni pracovníci sú povinní poskytnúť pacientom a lekárom informácie o citlivosti testov na základe ich prvej žiadosti.

Kvantitatívna analýza PCR určuje stupeň virémie, to znamená koncentrácie patogénu v krvi, vírusovej záťaže. Výsledok tejto štúdie, na rozdiel od vysoko kvalitnej PCR, je vyjadrený v počtoch, napríklad 2 x 10 x 6 IU / ml, čo znamená 2 milióny medzinárodných jednotiek v 1 ml krvi. Niektoré laboratóriá používajú iný indikátor - počet kópií / ml. Tieto dva ukazovatele sa ľahko konvertujú: 1 medzinárodná jednotka sa rovná 4 kópiám RNA. Teda 2 x 10 x 6 IU / ml bude znamenať, že 8 x 10 x 6 kópií vírusovej RNA v 1 ml, t.j. 8 miliónov kópií v 1 ml krvi.

Genotypizácia je definícia jedného zo šiestich genotypov vírusu. Klinický obraz, rýchlosť vývoja komplikácií pečene a prognóza budúceho života pacienta závisia od genotypu pôvodcu. Genotyp vírusu je veľmi dôležitý už v štádiu diagnózy, pretože kombinácia liečiv a trvanie terapeutického postupu určeného pacientovi závisí od jeho správneho určenia.

Avšak aj tento zdanlivo „dokonalý“ laboratórny výskum má svoje nevýhody:

• štúdia replikuje genetický materiál všetkých patogénov, dokonca aj neživých, ktorý môže skresliť výsledok. Preto, aby sa sledovala účinnosť pomocou PCR, re-analýza sa vykonáva najskôr 2 mesiace po predchádzajúcom, takže mŕtve vírusy môžu „opustiť“ organizmus pacienta;
• časť vírusového genómu, ktorá sa stanoví pomocou testovacích systémov, môže byť teoreticky prítomná v iných vírusoch alebo mikroorganizmoch, takže existuje možnosť falošne pozitívnej reakcie;
• vírusy rýchlo mutujú. Niekedy je rýchlosť a rozsah vírusovej mutácie taký vysoký, že testovací systém prestane zachytávať svoj genóm. V dôsledku toho je možný falošne negatívny výsledok.

Na vyrovnanie týchto nedostatkov výrobcovia laboratórnych testovacích systémov pre diagnostiku PCR neustále vykonávajú svoje testy vrátane krížových reakcií a citlivosti na konkrétny genotyp vírusu.

Ako urobiť PCR test na hepatitídu C?

Aby bol záver vyšetrenia PCR spoľahlivý, je potrebné striktne dodržiavať pravidlá jeho prípravy:

• štúdia sa vykonáva nalačno (glukóza, tuky, minerály, ktoré sa dostávajú do krvi z potravy, môže ovplyvniť rýchlosť a kvalitu enzýmovej reakcie);
• medzera medzi posledným jedlom a odberom krvi na analýzu by mala byť najmenej 8 hodín;
• v predvečer štúdie je zakázané konzumovať alkohol a konzumovať tučné jedlá, ktorých doba eliminácie sa predlžuje;
• deň pred odchodom do laboratória by sa mali vyvarovať silného fyzického a emocionálneho stresu;
• do času odberu krvi sa neodporúča fajčiť.

Aby sa predišlo vzniku falošných záverov, údajný pacient musí prísť do laboratória o niečo skôr ako krv. Trvá 15-20 minút, kým človek chytí dych, upokojí sa. Adrenalín, ktorý je prítomný v krvi po rýchlej chôdzi, môže ovplyvniť výsledok vyšetrenia.

Ak pacient uvedený na analýzu vezme nejaké lieky, mal by o tom informovať lekára. Je možné, že niektoré z nich budú musieť byť na určitý čas odmietnuté (ak je to možné).

Výsledok analýzy PCR na hepatitídu C

Dekódovanie výsledkov laboratórneho lekára laboratória, ktoré vykonalo analýzu. Dekódovanie je určenie odchýlky výsledku získaného z normy. Rýchlosť ukazovateľov stanovuje priamo výrobca testovacieho systému, ktorý laboratórium používa na diagnostiku. Preto nie je prekvapujúce, že v niektorých laboratóriách je vírusová záťaž stanovená v IU / ml a v iných v kópiách / ml.

Po získaní záveru je potrebné, aby sme ho mohli správne interpretovať. Ošetrenie výsledkov štúdie by mal vykonať ošetrujúci lekár pacienta s hepatitídou C. Lekár môže po objektívnom, inštrumentálnom a laboratórnom vyšetrení pacienta získať dostatočné množstvo údajov na správnu interpretáciu získaných výsledkov PCR.

Hodnotenie kvalitatívnej analýzy spravidla nespôsobuje ťažkosti ani u pacientov. Výsledkom môže byť iba jeden: "detekovaný" alebo "nezistený". V tomto prípade je druhá z nich normou.

Ukazovatele kvantitatívnej analýzy je zložitejšie interpretovať. Ukazuje stupeň vírusovej záťaže pacienta. Ani medzi hepatológmi neexistuje konsenzus o tom, ako liečiť zistenú virémiu. Väčšina lekárov má sklon veriť, že by sa malo zvážiť vysoké zaťaženie viac ako 8 × 10 * 5 IU / ml. Zaťaženie viac ako 1 x 10 x 7 IU / ml sa považuje za veľmi vysoké, zatiaľ čo nízke zaťaženie je menšie ako 4 × 10 x 5 IU / ml.

Stupeň vírusovej záťaže indikuje virulenciu (agresivitu) vírusu: čím väčšie je jeho množstvo v krvi, tým rýchlejšie sa môžu vyvinúť komplikácie pečene. Vysoká koncentrácia vírusu v krvi tehotnej ženy zvyšuje pravdepodobnosť jeho preniknutia cez hemato-placentárnu bariéru k plodu. Virémia tiež ovplyvňuje účinnosť liečby: pri nízkych počtoch je účinnosť liečby vyššia ako u vysokých.

Aby sme boli presvedčení o presnosti analýzy PCR pre hepatitídu C, je potrebné uprednostniť len tie laboratóriá, ktoré sú dobre overené. Cenová politika by v tomto prípade nemala zohrávať primárnu úlohu.